谷溪 张培虎 (山东省成武县畜牧兽医局 274200)
一起仔猪感染圆环病毒2型的诊断及防控
谷溪 张培虎 (山东省成武县畜牧兽医局 274200)
某规模化猪场断奶仔猪发生渐行性消瘦,皮肤发白,精神沉郁,呼吸困难,病程长为特征的疾病。剖检发现肺脏呈橡皮样,腹股沟淋巴结肿大。采集病死猪病料,采用RT-PCR和PCR方法进行检测。结果显示所采样品中,猪圆环病毒2型为阳性,猪瘟病毒野毒株、蓝耳病毒和伪狂犬病毒均为阴性。结合临床症状、剖检病变及实验室检测结果,诊断为猪圆环病毒2型感染。
猪圆环病毒(Porcine circovirus virus,PCV)属于圆环病毒科圆环病毒属的单股环状负链DNA病毒,为已知最小的动物病毒之一[1]。目前PCV主要分为PCV1和PCV2两种血清型,其中PCV-1在猪群中广泛存在,但无致病性,而PCV-2能引起猪繁殖障碍、猪皮炎与肾病综合征、仔猪先天性震颤等一系列临床表现,统称为猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)[2]。由于该病主要破坏动物机体的免疫系统,造成免疫抑制,引起继发感染并诱发细菌和病毒的混合感染,给养猪业带来了巨大的经济损失。
该猪场存栏仔猪200头,从2017年2月有35~50日龄仔猪陆续发病,发病率不高,但病程较长,最长有1个月,死亡率较高达20%。该批仔猪按照本场免疫流程进行了伪狂犬、猪瘟等疫苗的免疫,但未免疫过蓝耳疫苗和圆环病毒疫苗。
仔猪被毛粗乱无光泽,皮肤发白,精神沉郁,眼睛分泌物增多,发热,咳嗽、腹部和四肢等部位出现暗红色病灶,触摸淋巴结肿大等,生长缓慢消瘦,群体大小不均一。个别出现关节肿大,呼吸困难等临床症状。
对病死猪进行剖检发现,主要肺脏变硬,苍白呈橡皮样,腹股沟淋巴结肿大,肾脏水肿苍白,其他脏器无明显肉眼可见病变。
4.1.1 试剂 猪瘟病毒野毒株实时荧光RT-PCR检测试剂盒和猪繁殖与呼吸综合征病毒通用型实时荧光RT-PCR检测试剂盒,购自北京世纪元亨动物防疫技术有限公司;猪伪狂犬病毒荧光PCR检测试剂盒和猪圆环病毒2型荧光PCR检测试剂盒及病毒DNA/RNA柱式提取试剂盒,均购自北京森康生物技术开发有限公司。
4.1.2 检测方法 无菌采集病死猪的肾脏、肺脏、脾脏和腹股沟淋巴结。将4种脏器混合剪碎后,研磨并匀浆,反复冻融4次,4℃,8000r/min离心5min,取上清液分别用DNA/RNA柱式提取试剂盒提取核酸,置于-20℃保存备用。猪瘟病毒野毒株和猪繁殖与呼吸综合征病毒的反转录、扩增,伪狂犬病毒和圆环病毒2型的扩增均按试剂盒说明进行操作。
4.1.3 结果判定 猪瘟病毒野毒株和蓝耳病病毒(通用型)判定方法:Ct值≤30并出现特定的扩增曲线判为阳性;30
附表 猪瘟病毒野毒株、猪蓝耳病病毒(通用型)、猪伪狂犬病毒和猪圆环病毒2型的荧光RT-PCR /PCR检测结果
项目猪瘟病毒野毒株蓝耳病病毒(通用型)猪伪狂犬病毒猪圆环病毒2型 Ct值结果Ct值结果Ct值结果Ct值结果 阳性对照阴性对照15.360试验成立24.250试验成立23.340试验成立14.3260试验成立 样品B0阴性0阴性0阴性6.920阳性 样品C0阴性0阴性0阴性20.037阳性
注:样品B为病死猪,样品C为发病活猪。
从附表可以看出,2份样品猪瘟病毒野毒株、蓝耳病病毒(通用型)和伪狂犬病毒检测结果均为阴性,圆环病毒2型均为阳性,这表明2份样品同时感染了圆环病毒2型。根据发病情况、临床症状、剖检变化、实验室检测等综合判定,本次猪场发病原因主要是由猪圆环病毒2型感染而引起的。
饲养管理是养殖生产中的重要环节。根据仔猪生长情况,及时降低饲养密度,保持良好的圈舍通风。保证猪群全价营养,禁止饲喂发霉变质饲料。实行全进全出的饲养方式,合理进行分群与混养,避免将不同日龄的猪混群饲养,从而减少和降低猪群之间PCV2及其他病原接触感染的机会。
保育猪自身免疫还未健全,同时由于生长、生理特点及环境、营养、应激等因素的影响,可降低断奶仔猪的抵抗力,很容易被病毒感染[3]。仔猪断奶后21~30d是预防本病的关键时期,因此,最有效的方法和措施是尽可能减少对断奶仔猪的刺激[4]。
做好猪瘟、猪伪狂犬病、猪细小病毒病和猪支原体肺炎等疾病的疫苗免疫接种,有效预防和控制其他感染性疾病,提高猪群整体的免疫抗体水平,减少呼吸道系统病原的继发感染。结合周边疾病流行状况和本场实际情况,科学选择圆环病毒(PCV-2)灭活疫苗或亚单位疫苗对猪群进行免疫,降低猪群感染圆环病毒的风险。
科学防控,逐步建立猪场生物安全体系。严格控制外来人员、车辆进入猪场,严防外来病原的引入。避免从疫区引进猪只,保障本场猪群健康。对早期发现疑似感染猪进行检查、隔离、淘汰,病死猪及粪便排泄物做无害化处理。建立消毒制度,定期消毒,彻底对畜舍进行打扫消毒,切实做好猪场的生物安全工作。
为更好地提高猪群的免疫力、抗病力,预防和减少其他疫病的混合感染或继发感染,可在饲料中适当添加党参、白术、黄芪之类的补气扶正药,配合添加优质电解多维,对防控猪圆环病毒相关病很有益处[5]。
[1] 田家伟, 吴霞, 张亮等. 重庆地区某规模化猪场猪圆环病毒2型的PCR检测[J]. 黑龙江畜牧兽医. 2013, 03(上): 89-91.
[2] 陈陆, 彭志锋, 杨霞等. 10株猪圆环病毒2型(PCV2)河南株全基因组的克隆与序列分析[J]. 中国兽医学, 2010, 30(2): 166-173.
[3] 芦银华, 陈德胜, 戴亚斌等. 应用复合PCR法检测猪圆环病毒[J]. 中国兽医科技, 2001, 31(9): 8-9.
[4] 方博, 宋慧敏, 钟丽红等. 猪圆环病毒2型的临床特点及综合防控[J]. 广东饲料, 2017, 26(5): 48-50.
[5] 怀川, 王茜, 王升等. 猪圆环病毒相关病(PCVAD)及其防治措施[J]. 中国畜禽种业, 2013. 9(3).112.
(2017–09–19)
S858.28
B
1007-1733(2018)02-0039-02