做好微生物学实验教学物品准备的几点体会

褚一凡 ，陈登宇 ，2，刘从森 ，郑庆委 ，2，管俊昌 ，2

（1.蚌埠医学院，安徽 蚌埠 233030；2.安徽省感染与免疫重点实验室，安徽 蚌埠 233030）

实验课在整个医学微生物学及临床微生物学检验教学中地位都十分重要[1]。提高实验教学质量的关键之一，在于实验教学物品的准备工作。微生物实验课不同于其他形态学课程，使用的物品多是活菌，因而如果没有事先准备的新鲜培养的及纯化的细菌、菌种，学生实验时就可能无法做出正确的细菌传代培养物、生化反应结果，导致实验教学失败。如何做到事半功倍、高效率、高质量的实验准备，是摆在实验物品准备人员、实验技术人员和青年教师面前的一个课题[2]。新进的微生物学青年教师入职一两年，根据教师培养计划，要参加实验准备工作，以利于其熟悉菌种、实验室，掌握实验技能，为以后的课堂教学打牢专业技能基础[3]。在长期的实验教学准备实践上，我们有了些心得和体会，现总结如下。

1 强调实验准备中无菌操作的重要性

医学院校中医学及临床微生物学实验教学的实验对象一般是活的细菌，而且大多数是致病菌、病原菌或条件致病菌，如金葡菌、乙链是标准的致病菌，个别细菌还有较强的致病性和传染性，如伤寒杆菌、痢疾杆菌分别是乙类消化道传染病伤寒、痢疾的病原体。因此要保证自身的安全，树立无菌观念、进行无菌操作，切勿大意，以免实验室感染及污染[4]。微生物实验操作要规范，严格消毒灭菌，对于实验用过的有菌物品如玻璃器皿，要灭菌处理后洗刷干燥回收。无菌观念的树立、规范的无菌操作技术，是做好微生物实验物品准备的基本功，对于微生物实验人员来说，是专业素养的体现，必须牢记并掌握，不然会害人害己。无菌操作是保障实验室安全运转的行为规范，必须严格遵守执行，避免实验室感染或污染事故的发生。

2 相对丰富全面的理论知识才能保证实验的顺利进行

理论知识是做好实验的奠基石，只有拥有全面丰富的理论知识，才能及时发现问题、分析问题、解决问题。实验的结果，可能会因为各种不确定因素导致结果的千差万别。例如不同细菌所需生长周期不同，如果菌体未成熟或已老化，则达不到预期的实验结果[5]。例如大肠杆菌由于多次传代，吲哚试剂滴进去，培养物液面处变红不明显，吲哚试验结果不明显；霍乱弧菌，实验室保存菌种常氧化酶阴性结果，与理论不符。这些基本都是菌种老化或退化的问题，应该注意菌种的活化、复壮或更新标准菌株，保障学生实验时结果的可靠、稳定。肠道杆菌在SS培养基上的培养物，因培养基中还原剂，如果挑取SS平板培养物，则会出现氧化酶阳性的假阳性结果，正确做法是应该取普通平板的培养物做氧化酶试验才能出现正确的阴性结果。扎实的理论知识是做好实验的奠基石，实验技术人员发现问题、解决问题的能力在很大程度上取决于其理论知识水平和经验积累，因而应该注重理论的学习，才能从容应对出现的问题和变化，并科学、合理地解决问题。

3 培养熟练的操作技能

对于医学院校，为了培养学生的专业素养，微生物学作为医学专业基础课或专业课，实验内容是丰富的，实验准备工作量是很繁重的，需做到又快又好，才能保障实验教学的顺利进行。熟练、规范的操作技能，可以保证实验操作的高效准确。实验准备工作繁杂，新进的实验技术人员切勿为了量而忽略了质，因为操作规范与否，直接影响到实验准备的好坏。工作伊始，即使耗费的时间长些，也要着重养成规范操作的习惯。比如，最常见的细菌接种，在每次接种前后，一定要灼烧接种环或接种针进行灭菌，接种前灭菌是为防止环境中细菌污染标本或纯种细菌，接种后灭菌是防止标本或纯种细菌污染环境。而且灼烧灭菌后的接种环或接种针在挑取细菌之前一定要冷却。重视细节、规范操作不仅是做好实验准备的必要条件，也是有效防止微生物实验准备过程中自身感染及环境污染的有效措施。

4 实验物品准备要有统筹思想，避免重复劳动

对于实验物品准备的精心计划、统筹安排、合理安排，是为了更有效率的实验准备。教学工作中，常常一周要针对不同专业学生的微生物实验课做几个不同的实验准备。一个准备完了再做下一个，耗时耗力。各个实验中有相同步骤的，不妨合并在一起，如单糖发酵试验、吲哚试验、细菌生长现象就是安排在一次实验课中的。可以先高压出液体培养基，部分加入单糖为单糖发酵试验做准备。部分加入吲哚和蛋白胨，供吲哚试验使用。细菌生长现象就需要液体培养基，其中的半固体培养基也可用液体和固体培养基成比例混合而成。掌握实验教学全局情况，关注教学进度，了解耗材的使用情况。根据学生的课程内容、上课人数、分组情况提前计算好下一周需要多少平板，需要哪些现配的染液、示教材料等，并预留几份实验用品，这样既不浪费，又保证了材料充分，防止了教学事故的发生。学期结束前，保存菌种，整理上报下学期要用的试剂、培养基、耗材数量，以利于学校统一采购。

5 不要忽略预实验，确保实验结果的正确和稳定

实验准备中常会受到多种影响而难以把握实验结果，为了保证能达到预期实验结果，做预实验的重要性不言而喻[6]。实验准备人员对此应认真对待，不可忽略。做预实验也是为了让实验技术人员及青年教师能更好地理解实验目的、原理、需要的材料及操作过程。若有遗漏的实验物品，也可在预实验中查漏补缺。当没有达到预想结果时，追根溯源，找到原因。每一次实验结果不理想的原因都可能不同，例如菌种变异、试剂变质甚至是试剂批次都会影响到预实验结果。寻找原因是对实验准备人员观察能力、解决问题能力的考验。如何精准地发现是哪个环节出了偏差，并不是一蹴而就的，新进实验技术人员及教师不妨将每次的原因记下来，在摸索中不断积累经验。

6 不断学习，提高综合素质

随着基础及检验医学的发展、微生物课程教学的发展，微生物课程的实验方法和仪器设备不断更新，学生实验也在不断改进、内容也在不断更新。这些都是实验技术人员及教师学习新知识的不懈动力。只有潜下心来刻苦钻研，提高综合素质，才能与时俱进，迎接新的挑战[7]。

做好微生物实验课实验物品准备，才能确保实验教学的顺利进行，在实验物品准备的过程中，还可以培养新进微生物青年教师的实验技能、提高专业素养。我们总结了在微生物学实验物品准备中的经验、技巧和教训，供同行相互借鉴、学习探讨，以利于保质保量地完成微生物实验教学物品准备工作。