盐酸恩诺沙星对鲟鱼主要非特异免疫指标影响的研究

文/王静波 徐立蒲 王小亮 张 文 曹 欢 王 姝 王 澎

北京市鲟鱼、鲑鳟鱼创新团队专栏

本试验研究拌饵投喂不同剂量盐酸恩诺沙星对鲟鱼血清中一些指标（GPT、GOT、AKP、SOD和溶菌酶）的影响。试验结果表明，投喂30mg/kg体重（正常量）组的试验鱼血清中上述各项指标与对照组无显著差异；而投喂300mg/kg体重（超10倍量）组的试验鱼血清中GPT、GOT、AKP活性显著高于对照组（P＜0.05），而SOD和溶菌酶活性与对照组差异不显著（P＞0.05）。说明超量使用盐酸恩诺沙星使试验鱼血清中的GPT、GOT、AKP活性升高，反应出对肝脏等组织有一定的损伤。

一、试验材料和方法

（一）试验鱼及饲养条件

鲟鱼（体长：（20.4±1.43）cm；体重：（26.05±7.64）g）购自北京密云古北口某鲟鱼养殖场。试验鱼暂养在0.5m3自动循环水养殖系统（溶解氧：6mg/L~8mg/L；pH：7.2~8.0），水温在（22±1）℃，期间每天投喂1次配合饲料，投喂量按体重的1%计算。1周后开始试验。

（二）盐酸恩诺沙星

本试验所采用的盐酸恩诺沙星购于宁夏康奇动物药业有限公司。试验设3组，每组1个平行。分别为对照组，试验一组和试验二组。其中对照组投喂未添加药物饲料，试验一组和试验二组盐酸恩诺沙星的分别按照30mg/kg鱼体重、300mg/kg鱼体重的剂量添加在饵料中。每天投喂相当于鱼体重1%的饲料，每天一次，连续投喂7d。

（三）采血

分别于实验第1天和第7天每组随机选10尾鱼进行尾动脉取血，按常规方法制备血清，存放于-80℃冰箱用于酶活性测定。

（四）血清中酶活性的测定

谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）、过氧化物酶（POD）、碱性磷酸酶（AKP）、超氧化物歧化酶（SOD）和溶菌酶均采用南京建成生物公司生产的相应试剂盒测定。

（五）数据分析

所有实验数据均用平均值±标准差表示。利用SPSS16.0软件对各组结果进行方差分析。

二、结果

（一）血清中谷丙转氨酶（GPT）活性的变化

投喂添加不同剂量的盐酸恩诺沙星的饲料后，对照组和试验组鲟鱼血清中GPT活性测定结果如图1所示。从图1可以看出，对照组GPT活性试验前后无显著差异（P>0.05）；试验一组和试验二组GPT活性试验后均有升高趋势，但试验一组与对照组差异不显著（P>0.05），而试验二组GPT活性与对照组差异显著（P<0.05）。

（二）血清中谷草转氨酶（GOT）活性的变化

投喂添加不同剂量的盐酸恩诺沙星的饲料后，对照组和试验组鲟鱼血清中GOT活性测定结果如图2所示。从图2可以看出，对照组GOT活性试验前后无显著差异（P>0.05）；试验一组和试验二组GOT活性试验后均有升高趋势，但试验一组与对照组差异不显著（P>0.05），而试验二组GOT活性与对照组差异显著（P<0.05）。

（三）血清中碱性磷酸酶（AKP）活性的变化

投喂添加不同剂量的盐酸恩诺沙星的饲料后，对照组和试验组鲟鱼血清中AKP活性测定结果如图3所示。从图3可以看出，对照组和试验一组AKP活性试验前后无显著差异（P>0.05）；试验二组AKP活性与对照组差异显著（P<0.05）。

（四）血清中超氧化物歧化酶（SOD）活性的变化

投喂添加不同剂量的盐酸恩诺沙星的饲料后，对照组和试验组鲟鱼血清中SOD活性测定结果如图4所示。从图4可以看出，对照组、试验一组、试验二组SOD活性试验前后无显著差异（P>0.05）。

（五）血清中溶菌酶活性的变化

投喂添加不同剂量的盐酸恩诺沙星的饲料后，对照组和试验组鲟鱼血清中溶菌酶活性测定结果如图5所示。从图5可以看出，对照组、试验一组、试验二组血清中溶菌酶活性试验前后无显著差异（P>0.05）。

三、讨论

盐酸恩诺沙星是一种抗菌力极强的杀菌药，对水产养殖中很多常见的细菌性疾病均有很好的疗效，但是剂量过大会损害鱼类内脏的正常功能。本实验结果显示，盐酸恩诺沙星投喂量增加到正常投喂量10倍时，试验组血清GPT、GOT、和AKP活性均显著高于对照组，这表明，盐酸恩诺沙星已经对试验组鲟鱼肝脏造成损伤。AKP是磷代谢过程中的重要酶类之一，主要存在于骨骼、肝脏、肠粘膜细胞中，与机体生长密切相关，在机体代谢中起着非常重要的作用。朱建勇等研究恩诺沙星对鲫鱼的AKP具有一定的诱导作用，在给药后的第5天，药物在鱼体肝脏和肾脏组织内浓度逐渐升高，各试验组肝脏、肾脏的AKP活性开始上升，到第10天，肝脏和肾脏的AKP活性达到最高水平。本实验结果与之相似。

另外，盐酸恩诺沙星具有较长的休药期，从而对人体健康构成威胁，因此生产上在使用的时候，一定要按照使用说明慎重选择剂量和使用方法，并且不能忽视该药的休药期。