许亚改,李钊
(1.石家庄市兽用生物制品供应站, 石家庄 050000;2.石家庄市动物卫生监督所, 石家庄 050000)
一是无菌操作。采样过程应无菌操作,器皿、器械等用具事先消毒。二是安全防护。采样时应做好环境消毒和废弃物处理,同时做好人身防护,预防人畜共患病感染。
采样人员应熟悉动物防疫的有关法律规定,具有一定的专业技术知识,熟练掌握采样工作程序和采样操作技术。
2.2.1 样品容器:真空采血管、一次性采血器、采样箱、保温箱、封口袋、塑料包装袋。
2.2.2 防护用品:口罩、一次性手套、乳胶手套、防护服、防护帽、胶靴等。
2.2.3 记录用品:采样单、不干胶标签、签字笔、记号笔、记录本等。
2.2.4 其它: 剪刀、干棉球、胶布、封条、冰袋、试管架等。
根据采集全血或血清目的不同,参考WS/T224-2002选择真空采血管。普通血清管红色头盖,采血管不含添加剂,用于收集血清。肝素抗凝管绿色头盖,采血管内添加有肝素,用于收集全血。在使用过程中,应先进针回血后,再连接真空管,顺序不能倒置,采血结束后,如果使用抗凝管,要轻轻混匀,让血液与抗凝剂充分接触。
采血时应缓慢抽吸,采集完后,将采血器抽杆向后抽拉,拉杆旋转拧下后将盛血器稍倾斜放于试管架孔中或直接斜放于采样箱中,禁止摇晃血样。
4.1.1 颈静脉采血:将头向一侧保定,用手指压迫颈静脉沟处采血部位稍下方(近心端),待血管怒张后,对采血部位消毒,沿颈静脉沟与皮肤呈45°,迅速刺入采血。
4.1.2 尾静脉采血:适用于牛,保定好后,左手托起牛尾与水平成适宜角度,在距牛尾根约10 cm处牛尾腹侧面中心凹陷处消毒、进针采血。
4.1.3 乳静脉采血:适用于经产奶牛。在乳房静脉隆起处消毒,用采血器针头由前向后快速刺入采血。
4.2.1 前腔静脉采血
一般30 kg以下的小猪,采用仰卧保定,使小猪两侧第一肋骨与胸骨结合处的前侧方呈现两个明显的凹陷窝,采血人员左手按住猪下颌骨,右手进针采血。中大猪采用站立式保定,即用套鼻绳套住猪上颌骨,并使头部与水平面成30度仰起,使猪站立成一条直线,并呈后退姿势为佳,使胸前两侧的凹陷窝充分暴露。20 kg以下的小猪应采两前肢与气管交汇处,中大猪和公母猪采血应略靠前,可选颈部两侧最低凹处,消毒进针采血。
4.2.2 耳静脉采血:用于体格较大的猪。耳部消毒,手指压迫近心端耳部静脉,使血管怒张,针头刺入血管,抽血时动作应轻柔、缓慢。
4.3.1 翅静脉采血:翅静脉在肘关节腹侧的表面,肉眼可见。拇指压迫翅静脉近心端,用采血器针头平行刺入静脉,放松按压,抽血时动作应轻柔、缓慢,采血后用干棉球压迫采血处止血。
4.3.2 心脏采血:手指压迫嗉囊,露出胸前口,从V型锁骨前端水平刺入,或者在靠近心脏的胸侧壁刺入,稍回抽针可见回血。
5.1 液态样品不可超过容量的80%。
5.2 品种不同的样品不应混样, 每份样品应分别包装,在样品袋外面贴上标签,标签注明样品名称、编号、采样日期等。
不能冷冻贮存,在(2~6℃)下送至实验室,送检过程中尽量避免血样摇晃。保温容器应密封,防止渗漏。
分离好的血清样品保存在密闭试管或离心管中,如果样品能在24 h内送往实验室,可于4℃保存,如果24 h内不能抵达或需要送往外地实验室时,在不影响实验结果的前提下,样品可做冷冻处理,但应减少反复冻融,并在低温下运送。保温容器应密封,防止渗漏。
参考文献
[1] NY/T541-2002,动物疫病实验室检验采样方法[S].北京:中华人民共和国农业部,2012.
[2] 蒋金贵,张迎锐.动物血液样品的采集保管存在问题及对策[J].畜牧兽医杂志,2012,31(2):75-76.
[3] WS/T224-2002,真空采血管及其添加剂[S].北京:中华人民共和国卫生部,2002.