血浆基质金属蛋白酶-9与H型高血压及冠状动脉病变程度的相关性研究

马伟利，张月兰，宝凤梅，蔡颖

高血压病、冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）等动脉粥样硬化（AS）相关疾病已成为目前人类死亡的第一杀手，尤其是伴有同型半胱氨酸（Hcy）水平升高的H型高血压，其心脑血管并发症远高于高血压病，严重威胁人类健康[1-3]。研究表明，AS形成和发展的过程其实也是细胞外基质（ECM）重构的过程，而作为ECM水解酶的基质金属蛋白酶-9（MMP-9）促进了这一过程[4,5]，因此，MMP-9与高血压病及冠心病的关系密切。本研究主要观察H型高血压患者血浆MMP-9水平变化及其与冠状动脉（冠脉）病变程度的相关性，为H型高血压及冠心病的发病机制与风险评估提供新的思路。

1 资料与方法

1.1 研究对象选择2015年5月～2016年3月于朝阳市中心医院心内科住院疑诊为冠心病并行冠脉造影的高血压病患者140例，其中男性78例，女性62例，年龄32～79（59.14±10.06）岁。伴有Hcy水平升高（Hcy≥10 μmol/L）的高血压被定义为H型高血压[6]。根据患者血浆Hcy水平将研究对象分为H型高血压组（HH组）96例和非H型高血压组（NHH组）44例。

高血压诊断按《中国高血压防治指南2010》推荐的标准，即非同日3次测量血压，收缩压≥140 mmHg和（或）舒张压≥90 mmHg（1 mmHg=0.133kPa），或正在服用降压药物。研究方案及知情同意书均经我院伦理委员会审核通过，所有患者均签署知情同意书。排除标准：排除继发性高血压、风湿性心脏病、周围血管疾病、贫血、肿瘤、免疫系统疾病、感染、严重肝肾功能不全者。

1.2 一般资料收集记录所有入选者的一般临床资料，包括性别、年龄、身高、体重、血压、脉搏、既往病史（糖尿病、脑卒中、血脂异常、肿瘤性疾病等）、吸烟史、饮酒史、用药史等。体质指数（BMI）的计算方法：BMI=体重（kg）/身高2（m2）。

1.3 冠状动脉病变程度的判断采用美国心脏病协会制定的Gensini积分评价冠脉病变程度，每处病变的积分=狭窄程度评分×病变部位评分，各处病变积分的总和即为患者的Gensini积分（表1）。

表1 Gensini评分方法

1.4 血生化指标的检测所有患者空腹12 h后清晨采静脉血，以2000 r/min 速度离心10 min，取血浆分装于EP管，部分置于-70℃冰箱保存以备统一测定MMP-9，另一部分行血常规、生化如血糖、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、C反应蛋白（CRP）、尿酸（UA）、Hcy等检测。生化指标检测采用贝克曼公司生产的DXC-800型全自动生化分析仪。MMP-9的检测采用酶联免疫吸附（ELISA）法，操作严格按照试剂盒说明进行。

1.5 颈动脉多普勒超声检查采用东芝6000彩色多普勒超声诊断仪，探头率为5～12 MHz，受检者取仰卧位，头略向受检对侧倾斜，充分暴露颈部。探头置于胸锁乳突肌前缘或后缘，沿血管走行纵向扫描。于左、右颈总动脉分叉下方1.5 cm处测量颈动脉内膜-中层厚度（CIMT），由同一专业资深医生对所有研究对象进行检查。每位患者测量3次，取平均值。

1.6 统计学方法采用SPSS 22.0统计软件，计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间的比较采用独立样本t检验；计数资料以例数（构成比）表示，采用χ2检验；多变量采用logistic回归分析；运用受试者工作特征曲线（ROC）评估MMP-9对Gensini评分≥30的预测价值。结果以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般临床情况比较两组一般临床情况比较，HH组患者脑卒中患病率及吸烟比例均高于NHH组，差异有统计学意义（P＜0.05，表2）。

表2 两组患者一般临床资料比较

2.2 两组化验室指标比较与NHH组比较，HH组患者血浆LDLC、UA、CRP、Hcy及MMP-9水平均明显升高，差异均有统计学意义（P＜0.05，表3）。

表3 两组患者生化资料、CIMT及Gensini评分比较

2.3 两组CIMT及Gensini评分比较与NHH组比较，HH组患者CIMT及Gensini 评分明显升高，差异均有统计学意义（P＜0.01，表3）。

2.4 Logistic回归分析选择单因素分析中有统计学差异的脑卒中、吸烟、血浆LDL-C、UA、CRP、Hcy、MMP-9水平、Gensini评分及CIMT为自变量，以H型高血压为因变量，进行Logistic多元回归分析，结果显示MMP-9水平及CIMT进入回归方程，是H型高血压的独立相关因素（P＜0.05，P＜0.01）（表4）。

2.5 MMP-9预测Gensini评分≥30分的ROC曲线以灵敏度为纵坐标，1-特异性为横坐标，根据Gensini评是否≥30分，做H型高血压患者血浆MMP-9对Gensini评分≥30分预测能力的ROC曲线，其曲线下面积为0.753（95%CI：0.661～0.845，P＜0.05）（图1）。

表4 H型高血压独立相关因子的Logostic 多因素回归分析结果

图1 MMP-9对Gensini评分≥30分的ROC曲线图

3 讨论

我国高血压病、冠心病等AS相关疾病的患病率正逐年上升，其高死亡率、高致残率和高复发率导致了沉重的社会和经济负担。H型高血压占我国高血压人群的四分之三以上，高血压病与高水平的Hcy协同作用，使心脑血管事件的发生率成倍增加[7,8]。因此，H型高血压越来越引起人们的重视[9]。Gensini评分是基于冠状动脉造影像，从冠脉病变的数目、部位和程度进行评分，是较为客观地评估冠脉病变严重程度的有效方法。本研究发现：HH组患者脑卒中患病率、Gensini评分等均高于NHH组，提示H型高血压患者预后更差。

H型高血压并不是高血压和高Hcy的简单组合，Hcy的升高不仅加速了高血压病的进展，显著放大了高血压导致心脑血管事件的风险[10,11]。其可能的机制包括：一方面，高水平的Hcy不仅可直接损害血管内皮细胞（EC）导致一氧化氮（NO）释放的减少，还可通过氧化应激反应，产生过氧化氢、羟自由基等刺激血管壁，进一步损伤EC，使NO、前列环素生等舒张血管的物质生成减少、缩血管因子内皮素增加，使总外周血管阻力增加、血压增高，促进冠心病的发生与发展[12]。另一方面，Hcy可促进脂质过氧化，形成氧化型低密度脂蛋白，还可促进脂质沉积于损伤后的动脉管壁，脂质摄取增加，加速冠心病的进程。本研究发现，H型高血压患者血浆LDLC及UA水平均高于非H型高血压患者，提示血脂和UA可能参与了H型高血压的形成及冠心病的发生与发展。同时，Hcy诱导血管EC血管紧张素受体1相关的MMP-9合成增加，从而使血管壁纤维及胶原蛋白的比例失调，破坏血管正常结构，引发血管重构[13]。本研究发现：在Hcy水平较高的H型高血压患者中MMP-9进一步升高，而且CIMT的厚度也明显增加，提示Hcy可能通过调节MMP-9的合成而加重了高血压患者AS程度。

ECM内富含弹性蛋白、胶原及蛋白多糖等物质，是血管壁的重要成分。MMP-9是降解血管ECM的主要酶类，MMP-9的过度生成和激活可大量降解血管壁的弹性纤维，对血管平滑肌细胞的增殖及迁移具有重要影响，从而参与内膜的增厚和管壁对损伤的反应性重塑[14-17]。因此，MMP-9贯穿于血管壁重塑即AS的整个过程。有研究发现：在血管EC中，病理浓度Hcy可改变血管EC内的基质金属蛋白酶及其抑制剂mRNA的表达，使血管EC内的 MMP-9表达增加而其抑制剂表达减少，促进ECM的降解，降低动脉粥样硬化斑块的稳定性。目前，关于MMP-9水平与H型高血压患者冠状动脉硬化相关性的临床研究较少。本研究发现：MMP-9水平是H型高血压的独立相关因素，提示MMP-9与AS高度相关。通常将Gensini积分＞30分作为冠脉病变程度严重的标准。本研究在MMP-9预测Gensini评分≥30分的ROC曲线中，曲线下面积为0.753（95%CI：0.661～0.845，P＜0.05），表明MMP-9对冠脉病变严重程度具有一定的预测价值。

总之，血浆MMP-9水平与H型高血压及冠脉病变程度有显著的相关性，对于预测冠脉病变程度具有一定价值，可作为监测心血管疾病风险的一个指标。