风湿热患者血清ASO滴度与HDL水平的相关性分析

张会品，张建春，郭兰芳

(1.南京市高淳区人民医院检验科，南京 211300；2.镇江市第四人民医院检验科，江苏镇江 212001)

风湿热是一种与A群链球菌(group Astreptococcus，GAS)感染有关的全身性结缔组织非化脓性疾病，曾经是危害学龄儿童及青少年生命和健康的主要疾病之一，风湿热的病因和发病机制迄今尚未完全阐明，但目前公认风湿热是由于GAS咽部感染后产生的自身免疫性疾病。风湿热临床表现主要为心脏炎、关节炎、舞蹈症、皮下小结和环形红斑；发热和关节炎是最常见的主诉，证明原有链球菌感染是必需的诊断条件，咽拭子培养阳性或抗链球菌抗体阳性可证明有过链球菌感染。GAS也称为化脓性链球菌，是人类细菌感染中常见病原菌之一。它广泛存在于自然界、人和动物粪便以及健康人的鼻咽部[1]。GAS依其表面抗原的不同又可分为100多种血清型。目前对表面抗原R，T，S蛋白成分的作用还不了解，M蛋白则是链球菌有致病能力的重要因素，它可抵抗机体白细胞对它的吞噬作用，如无M蛋白则无毒力[2]。GAS引起的感染主要有急性咽炎、急性扁桃体炎、丹毒，也可致肺部感染、心内膜炎、猩红热、皮肤软组织感染，并可致全身性感染，同时该菌也是变态反应性疾病风湿热和急性肾小球肾炎的间接原因[3，4]。HDL与其相关脂蛋白主要包括apoA-I能够阻断某些细菌在血液中的增殖分化，结合并中和某些来源于细菌的化学物质如游离脂肪酸，同时也可以中和细菌，抑制巨噬细胞抗原提呈，影响后天免疫，同时能够阻止泡沫细胞炎症因子的表达，从而影响抑制炎症反应，降低细菌感染对机体产生的损伤与危害。有研究表明HDL及其相关脂蛋白对于革兰氏阴性细菌和寄生虫所引起的炎症反应具有一定的抑制作用，为此国内外研究表明HDL可以作为机体固有免疫系统的一部分，同时也可参与后天性免疫，是机体抵抗外来细菌感染的一道屏障[5，6]。但对于HDL在风湿热感染中的变化研究报告较少，现将我们的研究报告如下。

1 材料和方法

1.1 研究对象 回顾性收集镇江市第四人民医院2014年1月～2017年9月诊断为风湿热的病例，从中筛选出符合条件的病例158例，筛选条件：①在入院以及感染时同时检测ASO以及HDL，且感染控制后复检ASO以及HDL数据；②排除类风湿、风湿性心脏病等其它自身免疫性可能导致ASO升高的相关疾病；③排除脂代谢异常的患者。其中男性102例，女性56例，年龄13～22岁，平均年龄15.3±5.3岁；同时选择健康人群150例作为对照组，其中男性100例，女性50例，年龄14～23岁，平均年龄15.0±4.8岁。两组从性别构成以及年龄比较差异均无统计学意义(P>0.05)。

1.2 试剂和仪器 HDL和ASO检测仪器为贝克曼AU5800全自动生化分析仪，试剂分别为浙江夸克生物科技有限公司和重庆中元生物技术有限公司。

1.3 方法 ASO检测方法为散射比浊法，参考区间为0～200 IU/ml；HDL检测方法为均相测定法，参考区间为1.03～1.55 mmol/L。

1.4 统计学分析 采用SPSS19.0统计学软件进行分析，同一组不同阶段数据多重比较检验水准采用bonfferoni校正(α’=α/k，k为多重比较次数)，同一组多个处理数据相互比较或与对照组比较，采用单因素方差分析中的Dunnet检验，检验水准α=0.05，P<α或α’被认为差异有统计学意义。相关性分析用Pearson相关分析。

2 结果

2.1 感染以及治疗后两组ASO与HDL的整体比较 经重复测量方差分析，风湿热感染患者ASO水平在入院时128±28 IU/ml、感染时(220±53 IU/ml)以及感染控制后(140±43 IU/ml)结果比较，差异有统计学意义(F=32.101，P=0.000)；经bonfferoni校正的组间比较，感染时的ASO与入院时以及感染控制后的结果比较，差异有统计学意义(P<0.05)；入院时与感染控制后的结果比较，差异无统计学意义(P>0.05)。GAS感染患者HDL水平在入院时(1.28±0.10 mmol/L)、感染时(0.86±0.09 mmol/L)以及感染控制后(1.25±0.09 mmol/L)结果比较，差异有统计学意义(F=41.032，P=0.000)；经bonfferoni校正的组间比较，感染时的HDL与入院时以及感染控制后的结果比较，差异有统计学意义(P<0.05)；入院时的HDL与感染控制后的结果比较，差异无统计学意义(P>0.05)。经单因素方差分析，感染组与对照组(120±25 IU/ml的ASO结果比较，差异有统计学意义(F=33.236，P=0.000)；感染组与对照组(1.32±0.12 mmol/L)的HDL结果比较，差异有统计学意义(F=40.320，P=0.000)；经Dunnet-t检验，感染时的HDL以及ASO结果与其他处理组以及对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。

2.2 风湿热感染时不同ASO范围内HDL的变化 见表1。经单因素方差分析，感染组HDL结果在不同ASO范围内比较，差异有统计学意义(F=5.539，P=0.012)；对照组HDL结果在不同ASO范围内比较，差异有统计学意义(F=3.195，P=0.021)。对不同ASO范围内的HDL结果行Dunnet-t检验做多重比较，结果ASO浓度<50 IU/ml感染组的HDL与ASO浓度在51～100 IU/ml范围内感染组的HDL结果以及101～200 IU/ml范围内对照组的HDL含量比较，差异无统计学意义(P>0.05)；ASO浓度<50 IU/ml对照组的HDL与ASO浓度在51～100 IU/ml范围内对照组的HDL结果比较，差异无统计学意义(P>0.05)；其余ASO范围内的HDL结果无论是感染组还是对照组相互比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。

2.3 风湿热感染时ASO与HDL的相关性分析 风湿热感染时HDL与ASO呈明显的负相关(r=-0.876，P<0.05)。

3 讨论

GAS所致疾病谱广泛，轻者如咽炎、扁桃体炎、猩红热等，重者如坏死性筋膜炎、急性肾小球肾炎、链球菌中毒性休克综合征等[7]。风湿热患者链球菌感染最直接的证据是在咽部培养出GAS，其阳性率仅有20%～25%。ASO滴度升高也是新近链球菌感染的可靠指标，链球菌感染后约两周左右，大多数风湿热患者(75%～80%)的ASO滴度升高大于500U，4～6周时达高峰，8～10周后逐渐恢复正常。研究显示，GAS毒力调控感受基因(virulence regulated receptor gene，covRS)调控约10%～15%的GAS基因[8]，covRS突变可上调毒力相关基因表达，如透明质酸荚膜、ASO，链球菌补充抑制剂等，或是减少链球菌致热外毒素的表达，从而使疾病严重化[9]。

有研究表明，HDL通过与内毒素脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)结合并将其从血浆中清除，减弱机体对LPS的生物反应，当巨噬细胞抵抗LPS时，HDL可以使LPS远离单核细胞和巨噬细胞，减弱免疫细胞的激活以便与其发挥其固有功能，同时减少释放促炎症细胞因子，从而减弱LPS的毒性[10]。载脂蛋白AI(apolipoprotein AI，Apo AI)、载脂蛋白E(apolipoprotein E，Apo E)、载脂蛋白C(apolipoprotein C，Apo C)、ApoA-IV可能参与和帮助HDL中和LPS[11]。其中，大多数脂多糖结合蛋白结合含有Apo AI的分子，因为Apo AI含量最丰富，其它载脂蛋白一起参与抗炎作用[12]。A群链球菌表面的血清不透明因子(serum opacity factor，SOF)可以与ApoAI，ApoAII结合，破坏HDL的结构使脂质释放，进而导致血浆变得浑浊。SOF同时可以消除HDL的抗细菌感染作用，从而使A群链球菌致病[13]。有研究表明GAS的M41血清型重组链球菌I型胶原样蛋白(recombinantStreptococcustype I collagen like protein，Scll)可能通过疏水相互作用使其V区与HDL结合[14]。Scll还有作为亲和材料的潜在可能，可用于从血浆中特异性吸附并分离HDL以及ApoB100，从而导致HDL的抗感染能力降低。

本研究显示，风湿热患者入院时、GAS所致疾病患者入院时与正常对照组人群比较HDL差异无统计学意义，但随着GAS感染后，患者的HDL水平明显低于入院时以及正常对照组，随着抗感染的治疗，HDL水平逐渐回升，与入院时基本没有差别。不同滴度的ASO感染时，随着滴度的增加，HDL的值逐渐降低，且随着ASO浓度的增加感染时HDL结果降低的程度要比对照组HDL降低的程度要大，说明GAS感染越严重，HDL的水平越低，这与上面的研究基本一致。我们的研究对于GAS与宿主的相互作用是一个重要的补充。