卵巢上皮癌中相关长链非编码RNA的研究现状

王 哲，朱前勇

（1.新乡医学院，河南 新乡 453000；2.河南省人民医院，河南 郑州 450000）

卵巢上皮癌占卵巢恶性肿瘤的85%～90%，5年内生存率仅为30%，多半的卵巢癌被诊断时已是晚期。2018年，美国数据统计会有约22,240个新发病例和14,070个死亡病例[1]。目前卵巢癌临床治疗以根治性手术辅以铂类静脉化疗为主，其初治缓解率高达75%，但晚期卵巢癌中仍有约75%会在2年内复发，卵巢癌易耐药易复发的特性，使大多化疗药物局限于早期治疗。近年来许多研究发现，长链非编码RNA（lncRNAs）在基因抑癌或致癌的表达上具有调控作用，与恶性肿瘤发生、转移、耐药等方面有密切的关系。目前尽管许多学者研究了不同lncRNAs在卵巢癌中的作用机制，但相较于DNA甲基化、microRNA甲基化等热点方向的研究，lncRNAs在卵巢癌中的研究仍处于初级阶段，本文就目前与卵巢癌相关研究较多的lncRNAs简要综述，为更好发掘lncRNAs的特定功能，寻找新的研究热点提供理论依据。

1 lncRNAs概述

基因组学研究发现，人类基因组百分之九十七是由内含子、调控序列和非编码RNA（ncRNAs）这些非蛋白质编码基因组成[2]，其中长链非编码RNA（lncRNAs）属于不具备编码蛋白质功能RNA（ncRNAs）中的一种，长度大于200个核苷酸。目前被发现的lncRNAs有上千种，最常见的是根据基因组中lncRNAs相对于编码区基因的位置及特征分类[3]，可分为反义、正义、双向、基因内和基因间lncRNA五类，也可根据与癌症之间的关系既可表现为促癌，也可表现为抑癌，也或者二者兼备。虽然目前发现的lncRNAs有众多，但其具体作用机制并不明晰，大致分为蛋白桥梁、染色质修饰酶定位、RNA诱饵及mRNA互补作用。LncRNAs最初因不具备编码蛋白质功能而被认为是“转录垃圾”，但后来越来越多的研究表明，lncRNAs与肿瘤的进展侵袭及耐药有着密不可分的关系。本文通过阐述热门lncRNAs在卵巢癌中的作用机理，为以后的进一步研究提供支撑。

2 lncRNAs与卵巢癌

目前已在胃癌、肺癌、宫颈癌、乳腺癌和卵巢癌等恶性肿瘤中发现并报道了不同的lncRNAs，而与卵巢癌关系密切的lncRNAs也有很多，包括人类卵巢癌特异转录体2（human ovarian cancer specific transcript 2，HOST2）、H19、AB073614、LSINCT5等等，目前，学者对这些lncRNA的研究仍处于初级阶段，其在卵巢癌中的作用机制仍未完全明晰，以下根据卵巢癌发生发展及耐药，对几种相关的lncRNAs分别进行阐述总结。

3 主要与卵巢癌发生、发展相关

3.1 促癌因子

3.1.1 LSINCT5

LSINCT5位于染色体区域5p15.33，相关研究表明其过度表达可以影响卵巢癌细胞的增殖。Long等[4]通过实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应（qRT-PCR）技术对40个卵巢癌和30个正常卵巢组织中的LSINCT5水平进行了评估，发现相对于正常卵巢组织，其在卵巢癌组织中的水平是显著升高的，此外，研究人员敲除LSINCT5基因，发现其下游的CXCR4/CXCL12轴的信号转导受到抑制，进而减弱了卵巢癌细胞的增殖，侵袭和转移，表明LSINCT5可能是通过激活CXCR4/CXCL12信号轴来促进癌细胞的增殖、扩散的。

3.1.2 ANRIL

Qiu等[5]通过qRT-PCR对102例卵巢癌组织与30例非卵巢癌组织中的ANRIL进行了提取对比，发现卵巢癌组织中ANRIL表达显著增高，分析认为ANRIL过度表达与FIGO分级和较高的组织学等级有关，此外，研究中单变量和多元生存分析表明，ANRIL可以作为一个独立的预后指标。他们首次提出了ANRIL可以作为预测卵巢癌的生物标记，同时ANRIL的高表达可能促进卵巢癌的发展。

3.1.3 AB073614

AB073614属于lncRNAs中的一种，相关研究结果表明AB073614通过抑制SOX7激活Wnt/β通路促进神经胶质瘤的发展，已被证实是神经胶质瘤中一个预后不良的生物标记，抑制AB073614的表达，降低其在细胞中的含量可能是治疗神经胶质瘤的一种新思路[6]。近年研究发现，AB073614水平在卵巢癌组织比在正常组织中增加85.3%，AB073614表达水平较高的卵巢癌患者5年生存率反而较低[7]。

3.2 抑癌因子

3.2.1 GAS5

GAS5位于染色体1q25.1，Gao等[8]对60例卵巢癌样本进行分析，发现GAS5在正常卵巢上皮和良性上皮病变之间没有明显的表达差异，而在恶性肿瘤细胞内表达降低。他们认为GAS5的过表达可以促进细胞凋亡，抑制增殖，减少卵巢癌细胞的侵袭和转移。此外，卵巢癌细胞中GAS5越低的表达可能与淋巴多处结转移及FIGO分级有关。为了进一步探讨GAS5在卵巢癌细胞增殖过程中的调控机制，Ma等[9]对53例卵巢癌及正常邻旁组织进行分析对比，发现GAS5在某种程度上是通过对miR-21/SPRY2信号通路的调节来抑制细胞增殖的，但具体机制仍不明晰。

3.2.2 BC200(BCYRN1)

BC200最早在神经元中被发现，是一种特异性地在神经系统中表达的lncRNAs。Wu等[10]对比分析了10个正常卵巢样本和12个卵巢癌样本中的BC200水平，发现正常组织中BC200的平均水平比在卵巢癌组织中的平均水平显著升高。这表明BC200的下降可能与卵巢癌的发生发展有关。此外，化疗药卡铂可以促进BC200的表达，而BC200的表达又提高了卵巢癌细胞对卡铂的敏感性。以上研究推测，BC200在卵巢癌中可能具有抑制肿瘤的功能。

3.3 双重作用因子

H19是第一个被发现与恶性肿瘤有关联的lncRNAs，位于染色体11pl5.5。最初，H19在肝细胞癌的转移中表现出抑制作用而被认为是一种肿瘤抑制因子，之后，有相关研究发现H19在膀胱癌等许多恶性肿瘤中水平较高，这种结果表明H19可能与肿瘤的发生进展同样有着密切的关系。Yan等[11]发现H19是通过抑制let-7来促进卵巢肿瘤细胞侵袭和转移的，并验证药物二甲双胍通过促使H19启动子甲基化，进而抑制肿瘤细胞的发展的。

4 与卵巢癌耐药相关

4.1 UCA1

UCA1是一种长1.4kb主要存在于细胞质中的大分子，因其在膀胱癌组织中的含量高于正常组织而被首次发现。最近的相关研究表明，UCA1在癌症对药物的耐药性方面有密切的联系[12-13]。Wang等[14]在实验中发现UCA1的过表达与人体细胞中顺铂的耐药性有密切的关系。另外，Schenk等[15]发现 SRPK1激酶的激活可以在卵巢癌细胞系中诱发顺铂耐药性，UCA1在卵巢癌的作用效果可能与激酶SRPK1有关。

4.2 H19

H19已被证明在肿瘤的发生发展中具有双重功能，即在不同的肿瘤中表现出抑癌或致癌不同的特性。最近研究表明，H19还在卵巢癌耐药细胞中水平明显升高[16]。在H19表达增强的细胞中，敲除H19可恢复细胞对顺铂的敏感性。此外，在调节细胞耐药性机制中，发现H19与谷胱甘肽代谢之间也存在联系，敲除过H19的细胞对过氧化氢的处理非常敏感，并表现为低谷胱甘肽水平[17]，但机制却不清楚。Mizrahi等[18]针对卵巢肿瘤细胞中H19调控序列控制下的白喉毒素A（DTA）基因的表达开发了一种新的治疗策略：即把DTA-H19联合起来注射到肿瘤内抑制其生长，在此基础上又提出将H19- TNF-DTA三者结合的质粒导入肿瘤细胞中，抑癌效果比二者结合的质粒更加显著。

4.3 HOTAIR

一项研究表明，在卵巢癌顺铂耐药细胞系中，HOTAIR的水平要高于敏感细胞系；敲除耐药细胞系中的HOTAIR基因，能够恢复其对顺铂治疗的敏感性[19]。另有研究表明，在顺铂治疗后，HOTAIR表达可以导致细胞DNA损伤应答持续激活，不仅如此，与原发性卵巢肿瘤相比，在复发性顺铂耐药的卵巢肿瘤中，HOTAIR的水平也更高[20,21]。因此，HOTAIR过表达不仅可以影响肿瘤耐药，还在肿瘤复发方面起着一定作用。

4.4 PVT1

PVT1位于染色体8q24.21，致癌基因MYC附近，长度为1.9kb。Liu等[22]运用qRT-PCR技术检测对比了耐药细胞株和敏感细胞株中PVT1的水平，分析PVT1高表达或沉默对细胞顺铂耐药性的影响。实验发现PVT1在卵巢癌耐药株中高表达，而且是通过调节细胞凋亡途径来促进耐药性发生的。

4.5 XIST

XIST，一种长度为17kb，位于染色体Xq13.2的lncRNA。在女性中，X染色体复制后的其中一个会被随机灭活，X染色体随机灭活（XCI）是由XIST启动，由组蛋白修饰或启动子甲基化处理而灭活[23]。有研究发现XIST的低表达可以降低卵巢癌细胞对紫杉醇的敏感度，原因可以用紫杉醇的XIST毒性作用来解释，也可以认为与X特异性抵抗基因的重新激活有关，并且在X染色体上增加了这些基因的表达，还可以理解为，XIST的丧失是由基因不稳定引起的，从而促进了对紫杉醇的耐药性，这表明XIST可以作为卵巢癌预后的生物标记[24]。

5 结 语

本文分别简单阐述了几种主要与卵巢癌相关的lncRNAs，除此之外，仍有多种lncRNAs功能未被发掘。通过对相关实验研究结果的阐述，针对不同lncRNAs的差异功能，可以另辟新径研究lncRNAs在卵巢癌中更多的作用机理。虽然目前被发现的lncRNAs已有很多，但对每一种lncRNA的功能及作用机制的研究仍处在探索期，还需要大量研究，长期实践才能逐步完善。随着高新技术的不断发展，更多的lncRNAs将会被不断被研究和发现，其在恶性肿瘤中的作用机理也会逐渐清晰化、立体化，在预测卵巢癌的发生发展及耐药方面的特异性也会大大提升。目前认为LncRNAs在卵巢癌的特异诊断、靶向治疗、评估预后方面具有重大潜力和价值，有希望在攻克恶性肿瘤方面发挥重要作用。