苯酚凝胶造模与混合细菌悬液慢性盆腔炎造模方法的对比

侯金萌，高 慧*，张 晴，代春玲

（1.华北理工大学中医学院，河北 唐山 063000；2.承德医学院附属医院，河北 承德 067000）

盆腔炎性疾病（pelvic infammatory disease，PID）是由女性上生殖道炎症引起的一组疾病，包括子宫内膜炎、输卵管炎、输卵管卵巢脓肿和盆腔腹膜炎等[1]。慢性盆腔炎的发生伴随着炎症因子的改变及机体免疫功能的下降[2]。盆腔炎多因治疗不及时，若处于同样的高危因素可反复发作，导致慢性盆腔痛、不孕、宫外孕等后遗症，其给生活、工作带来严重影响。因而对于慢性盆腔炎模型的研究越来越重要，可以对疾病发展研究提供基础。

1 材料与方法

1.1 实验动物

选用SD雌性大鼠,体重为200g～250g,鼠龄12周,购自河北医科大学实验动物中心（许可证号：SCXK冀-2013-1003）。

1.2 实验基地

河北中医学院实验室。

1.3 主要试剂

25%苯酚凝胶（液化苯酚5ml,西黄芪胶lg,甘油4ml,加蒸馏水至20ml,配成25%的苯酚凝胶）。

大肠杆菌（菌株号32210）、金黄色葡萄球菌（菌株号26102）、乙型溶血性链球菌（菌株号44110）以2∶1∶1的比例溶于无菌生理盐水，配成浓度为3×109个/ml的混合细菌悬液。

1.4 动物分组

取大鼠40只，随机分为4组(空白组，混合细菌悬液组，苯酚凝胶组、假手术组)，每组10只。

1.5 动物模型制备

1.5.1 混合细菌接种

实验方法：将混合细菌悬液组大鼠，称重。用2%戊巴比妥钠按50mg/kg的剂量腹腔注射麻醉大鼠，待大鼠被麻醉后，在无菌条件下取大鼠下腹正中切口长约1cm，固定左侧子宫，注入混合细菌悬液0.4mL。注射完毕，夹闭针孔防止溶液流出，垫高大鼠臀部偏向于左侧，使菌液在子宫内不会流出，之后逐层缝合切口，碘酊消毒术区皮肤，将大鼠伤口敷料覆盖包扎皮肤；

1.5.2 苯酚凝胶接种

实验方法：将苯酚凝胶组大鼠，称重，用2%戊巴比妥钠按50mg/kg的剂量腹腔注射麻醉大鼠，待大鼠被麻醉后，在无菌条件下取大鼠下腹正中切口长约1cm，固定左侧子宫，注入混合细菌悬液0.06mL。注射完毕，夹闭针孔防止溶液流出，垫高大鼠臀部偏向于左侧，使菌液在子宫内不会流出，之后逐层缝合切口，碘酊消毒术区皮肤，将大鼠伤口敷料覆盖包扎皮肤。

1.5.3 假手术组

实验方法：将假手术组大鼠，称重，用2%戊巴比妥钠按50mg/kg的剂量腹腔注射麻醉大鼠，待大鼠被麻醉后，在无菌条件下取大鼠下腹正中切口长约1cm，随后分层关腹，消毒术区。

2 取材与处理

在造模20天期间，每周称体重，观察大鼠是否出现弓背、蜷缩、脱毛、行动缓慢、体质量下降等现象；造模结束后，取子宫组织放置于10%中性福尔马林中固定，切片，常规HE染色，光镜下观察子宫病理组织形态。

3 结 果

3.1 形态学改变

模型组：正常饮食水、毛发光泽。

假手术组：手术恢复期时食欲较差，后期饮食水同模型组，毛发可。

苯酚凝胶组：饮食水较少，出现弓背、蜷缩、脱毛、行动缓慢、体质量下降等情况。

混合细菌悬液组：饮食水较少，出现弓背、蜷缩、脱毛、行动缓慢、体质量下降等情况。

3.2 肉眼观察

模型组：子宫形态、大小正常。基本无充血水肿。

假手术组：子宫形态、大小同正常组，无水肿，有部分充血。

苯酚凝胶组：子宫胀大，与周围结缔组织粘连，充血水肿，宫腔有少许积液，盆腔充血，部分形成包块。

混合细菌悬液组：子宫形态明显肿大，充血肿胀，宫腔粘连、宫腔内见积液，与周围组织粘连。

3.3 病理学结果

正常组：子宫腔壁结构、细胞形态正常，无明显充血水肿，未见炎性细胞浸润。

假手术组：子宫腔壁结构、细胞形态基本正常，无明显损伤变性，偶见中性等少量炎细胞浸润。

苯酚凝胶剂量组：子宫壁增厚，细胞形态被破坏，正常结构紊乱，代之大量纤维结缔组织增生及慢性炎细胞浸润。

混合细菌悬液剂量组：子宫壁增厚明显，腔壁结构紊乱，内膜明显充血水肿，管腔增粗，全层见大量炎性细胞浸润。

5 小 结

在本次实验中，采用20天造模，不同剂量的造模方式。炎症是慢性盆腔炎的最主要的表现[3]，因而在实验造模方式中，更加注重模型结果的致炎途径，病理学结果。苯酚凝胶造模方式与人类盆腔炎的致病原因有区别，但其费用低、造模成功率更高。混合细菌悬液的造模方式与人类盆腔炎致炎途径类似，感染率高。在以往的实验研究中，根据CPID的感染方式、传播途径、病变特点及大鼠子宫在其盆腔生殖器官中所占比重高的特点，混合细菌悬液造模方式更接近于人类慢性盆腔炎的致病途径类似，感染率高。然而目前，在中医治疗慢性盆腔炎更有特色，中医药的免疫调节机制却可以取得较好疗效[4]，以辨证论治为主，多法并用。因而在未来的慢性盆腔炎造模方法更应尝试创新，建立慢性盆腔炎中医证型的模型，加强祖国医学在治疗慢性盆腔炎的特色与专长。