非小细胞肺癌胸腔积液细胞块与组织学ALK检测的效果对比

徐东来

（抚顺矿务局总医院病理科，辽宁 抚顺 113008）

当前，我国对于肺癌的治疗方法多样并日渐成熟，在临床的应用实践中，多针对络氨酸激酶抑制剂和淋巴瘤激酶进行组合的基因检测[1]，其检测的类型多样，有各类的组织学样本，脱落的细胞和血液的清样等。同时，很多患者在年龄、身体状态等方面存在着一定的不同，其样本存在诸多差异，对于肺癌的个体化检测来说无法较好的保证样本的可靠性。当前细胞蜡块的技术研究数量较多，很多的报道中明确提出，可以将细胞蜡块应用在分子的检测之中，但是具体的医院实践治疗很少有相关的案例。本文对脱落细胞形成的细胞块在肺癌患者中和荧光的原位进行杂交检测，现将相关的应用价值报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选择本院病理科从2017年1月至2017年12月经过病理组织学诊断患有非小细胞腺癌患者或者同时体内的细胞快被诊断成为癌症或者疑惑癌症的患者共计100例。根据细胞样本的来源不同，主要为胸腔积液。另外，组织块的样本具体包括经过胸膜的活体检验和手术检验等，将组织学的诊断结果作为金标准，分析其中的疾病组成，其中100例患者中鳞癌患者18例，肺腺癌患者79例，其他肺癌类型的患者3例。100例患者中，男性54例，女性46例，年龄为42～46岁，中位年龄为44岁。

1.2 检测方法

1.2.1 细胞块制备：将新鲜的胸腔积液放置在4 ℃的冰箱中静置处理，并收集底部的沉淀液，将其放置在离心管中，转速为2500 r/min。进行离心处理3 min，后加入10 mL福尔马林，以同样的离心处理方式得到弃掉上清液，最后放入95%的乙醇进行处理，处理之后弃掉上清液。将以上的沉淀物质放置在擦镜纸上，收集患者体内的常规组织，并进行脱水处理，最终制成石蜡块。

1.2.2 IHC方法：其中的免疫组化ALK抗体从北京的中杉公司，其中的试剂盒选择福州的迈新制药有限公司，进行DAB染色处理。

1.3 结果判定：5%的肿瘤细胞呈现颗粒状的分布，其中强着色被判定为（+++），超过5%的肿瘤细胞呈现中度细胞质着色现象（+-+），超过5%的肿瘤着色现象向相对较为微弱，细胞无显著的着色现象，临床判定为ALK IGC（0）。

2 结 果

在被测试的所有样本中，其中（+++）和（++），（+）的共计28例，阳性率为28.00%。细胞块测试后免疫结果显示为（+-+）和（++）还有（+）的患者共计13例，阳性率为13.00%。以上两组的组织块和融合基因在荧光位置上的杂交结果均呈现阳性特点，其与免疫组化的结果明显相同。

3 讨 论

国外的研究中，在2号染色体的断臂位置形成了动物的微管相关性蛋白，其与简便性的淋巴瘤激酶等构成融合基因，其研究已经成为了医学界的重大突破。IHC是进行ALK蛋白表达检验的一种较为可靠的方法[3]，国外的研究中明确指出ALK D5F3中敏感度超强，已经达到了98%的特异性，其各种断裂方式和拷贝数量等已经成为了当前靶向治疗严重性的重要依据，但是使用ALK D5F3方式需要相对较高的成本，对患者的收费相对较高，并不适用于临床的广泛推广，当前阶段，对于疾病的诊断多是使用IHC进行预审核筛选，其中的阳性患者在进行FISH的检验。在本次调查研究中（+++）和（++），（+）的FISH的结果均为阳性，在细胞蜡块中，固定单个细胞的过程中会尽可能的保持抗原原有的活性，同时，细胞中蜡块中的恶性肿瘤成分经过集聚之后，其内容和类型较为单一，直接为FISH和IHC等提供了一定的抗原标本。

综上所述，对于恶性肿瘤来说，其原发灶和转移灶之间存在着相对较大的差异，原发灶细胞的基因状态和体液脱落细胞的基因状态之间存在一定的异质性，但是经过肿瘤的基因检测发现，其阳性率显著低于组织学的样本，最终的结果较为可信。对于晚期的非小细胞肺癌的患者来说，已经成为了一种较为可靠地检测方式。传统的细胞保留方式不够成熟，无法长期有效的保存处理，伴随着细胞蜡块技术的发明，已经解决了细胞的长期保留难题，并能够通过重复的切块，最终为整体的实验创造了较好的条件，很多无法获取组织学样本的中晚期肺癌患者可以进行全面有效的肺癌分子检测，该种方式具有较强的临床价值。