老年糖尿病性牙周病人血浆细胞骨代谢因子与促炎因子浓度变化意义的研究

宋 娟，王晓飞，袁廉蜀，郑 燕，程兴焕，赵 玮，蒋丽丽，王建华，李桂忠

我国人口老龄化趋势日渐加快，同时老年人2型糖尿病的患病率高达19.6%[1]。另外，牙周病是人类最常见的口腔疾病之一，老年人牙周病的患病率高达73.73%[2]，同时也是导致成年人牙齿缺失的最主要原因。而对于糖尿病患者由于体内糖、脂肪和蛋白质代谢出现紊乱，进一步影响牙齿周围组织的代谢过程和修复能力。糖尿病本身不会引起牙周炎，但是糖尿病可以增加牙周病的发病风险，也就是说牙周病是糖尿病合并感染性疾病的易感因素和促进因素[3]。有学者研究证实，糖尿病患者的牙周病患病率明显高于无糖尿病患者，两者之间存在一定的相关性，可以相互影响彼此的转归情况[4]。组成牙周膜的细胞可以产生并分泌与骨代谢有关的一些细胞因子，这些细胞因子在维持牙周组织代谢平衡中具有重要作用[5]，有研究证明一些促炎细胞因子参与牙周病的过程[6]。本研究以老年2型糖尿病性牙周病患者作为研究对象，旨在探讨骨代谢相关细胞因子与促炎细胞因子血浆浓度对老年2型糖尿病性牙周病的影响及其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料：所有研究对象均来自于宁夏医科大学附属银川市口腔医院特诊科就诊患者，对照组选取年龄60～69岁的老年人32例(男21例，女11例)，无高血压、糖尿病、肺部及肾脏疾患等慢性病，仅由于牙周病而就诊的患者。实验组选取年龄60～69岁的老年人39例(男26例，女13例)，由市级以上综合性医院明确诊断为2型糖尿病患者(均为诊断明确后经过正规治疗，但是由于个人重视程度不同，血糖浓度控制的情况并不很理想)，同时出现牙周病症状而就诊的患者。

1.2 血浆标本采集和血糖浓度的测定：患者空腹抽取血液，选用含有EDTA-K2抗凝剂的采血管抽取静脉血5 mL，分离(3 000 r/min，10 min)出血浆，抽取一部分血浆2 h内测定血糖浓度(由医院检验科测定)，一部分血浆用EP管进行分装，同时加入10 μl抑肽酶后编号，冻存于低温冰箱中(-80 ℃)，用来备测血浆中破骨细胞分化因子、破骨细胞生长抑制因子和白细胞介素-8浓度。

1.3 细胞因子浓度的测定：检测试剂盒为深圳晶美生物工程有限公司生产的ELISA试剂盒，测定前0.5 h从冰箱冷藏室取出试剂盒置于室温进行平衡温度，样本从-80℃低温冰箱中取出放置于冰箱冷藏室中进行自然解冻2 h，选用96孔板。样本取双份进行检测，操作步骤严格按照试剂盒说明书的操作进行测定，即对倍稀释标准品→加样→孵育→洗涤→加酶→孵育→洗涤→显色→终止→测定的步骤进行。最后以450 nm波长，用仪器(美国伯腾仪器公司EPOCH酶标仪)依照顺序测定各孔标准品和测定样本的吸光度值，绘制标准曲线，得出函数计算公式，计算出各个样本的破骨细胞分化因子、破骨细胞生长抑制因子和白细胞介素-8浓度值。

2 结果

对照组和实验组的年龄、血浆中空腹血糖浓度、破骨细胞分化因子、破骨细胞生长抑制因子和白细胞介素-8的浓度见表1。对照组和实验组年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)；血浆中空腹血糖浓度、破骨细胞分化因子、破骨细胞生长抑制因子和白细胞介素-8的浓度2组患者比较差异有统计学意义(P<0.05)。

表1 对照组和实验组观察指标的比较

3 讨论

长期以来牙周病被认为是一种位于口腔的局部感染，实际上牙周袋内的菌群和宿主之间的损伤与抗损伤性反应过程中会产生一系列的免疫及炎症反应，使得机体会出现一些细胞因子、局部功能、代谢方面的变化[7]，也就是说牙周病对宿主全身健康能造成一定的影响。而糖尿病是一种与遗传、自身免疫和环境因素有关的最为常见的代谢紊乱综合征，会影响到碳水化合物、脂类、蛋白质的正常代谢，尤其是糖尿病和牙周病同时存在时就可以出现相互影响的情况。糖尿病牙周组织中有氧代谢、无氧酵解、蛋白合成及糖的代谢分解均减弱，牙周膜内与物质代谢有关的酶如苹果酸脱氢酶、乳酸脱氢酶及谷氨酸脱氢酶的活性均有不同程度的下降；由于物质代谢紊乱进而影响到牙周纤维的正常排列，会发生牙周膜胶原纤维肿胀断裂，排列紊乱，与牙槽骨脱离，引起炎性细胞浸润，随着糖尿病病程的延长，牙周膜逐渐损伤并加重[8]。

组成牙周膜的成纤维细胞、成骨细胞、破骨细胞、成牙骨质细胞、未分化间充质细胞和上皮剩余细胞等，可以产生并分泌骨代谢因子破骨细胞分化因子和破骨细胞生长抑制因子[9]。破骨细胞分化因子在细胞膜上与其受体结合后可以刺激破骨细胞，并使其发挥生物学功能，减少成熟破骨细胞的细胞凋亡，对于牙齿周围的骨质具有一定的保护作用，但是其作用会被破骨细胞生长抑制因子所抵冲；破骨细胞生长抑制因子具有抑制骨骼吸收，反向调节骨成熟、骨分化、骨活性的作用[10]。本实验结果显示，实验组患者由于合并糖尿病而出现了破骨细胞分化因子浓度的增加，而破骨细胞生长抑制因子浓度下降，在一定程度上会影响到牙周病附近牙槽骨的坚固性能，从而会缩短老年人牙齿在口腔内的存留时间；同时，由于牙周病是慢性炎性骨吸收性疾病，其主要变化是牙周组织的慢性炎症与牙槽骨的吸收，所以对于存在有糖尿病基础病的牙周患者控制好病情会减慢病变周围牙槽骨的代谢过程。

糖尿病牙周病患者血浆中细胞因子白细胞介素均有增加[11]，这一结果在本实验中选择的观察指标白细胞介素-8也有所体现[12]。白细胞介素是具有免疫调节功能的细胞因子，可以活化单核巨噬细胞等炎症细胞产生其他类型的炎症因子和趋化因子，有利于减轻局部的炎症反应。对于糖尿病人体内白细胞介素的升高是较为普遍的现象[13]。我们在实验中也看到糖尿患者白细胞介素-8血浆浓度升高，一方面可以从调节促炎和抗炎平衡的调节来减轻或者是逐步消除炎症反应，另一方面可能也参与了骨代谢相关细胞因子的网络调节作用，对于其作用与骨代谢因子的相互关系有待于进一步研究。

总之，老年2型糖尿病牙周病与不伴有糖尿病的老年牙周病患者相比较，其发生、发展过程可能存在着较为明显的骨代谢因子和炎症因子之间的相互作用，但相互作用的确切过程和机制尚不清楚，有待于今后更多相关研究进行探讨。

[1] 张静，赵丽云，于冬梅.老年糖尿病的流行病学研究进展[J].世界最新医学信息文摘，2016，16(80)：34-35.

[2] 黄宏硕.220例老年人牙周病患病调查分析[J].右江医学，2010，38(2)：183-184.

[3] Slade GD,Ofenbacher S,Beck JD,et al.Acute-phase inflammatory response to periodontal disease in the US population[J].Journal of Dental Research,2000,79(1):49-57.

[4] 李增祥.426例老年人牙周病患者并发糖尿病的相关性研究[J].当代医学，2011，17(2)：99-100.

[5] Yasuda H,Shima N,Nakagawa N,et al.Osteoclast differentiation factor is a ligand for osteoprotegerin/osteoclasto genisis inhibitary factor and is identical to TRANCE/RANKL[J].Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America,1998,95(7):3597-3602.

[6] 宋红，吴织芬，史俊南.Aa,Bm,Sp对牙周膜细胞产生IL8,TNFα的影响[J].牙体牙髓牙周病学杂志，1999，33(3)：120-199.

[7] 刘宏伟，马良，欧龙.年龄对牙周膜细胞钙化表达的影响[J].中华口腔医学杂志，1998，11：329-330.

[8] 秦明群，于健.2型糖尿病合并牙周炎经强化治疗后的牙周状况分析[J].山西医药杂志，2007，7(5)：110-111.

[9] 宋红，马秦，陈永进.破骨细胞分化因子和破骨细胞生长抑制因子在牙周组织细胞中的表达[J].实用口腔医学杂志，2009，25(5)：710-714.

[10] 王峰，林松杉，林珠.破骨细胞分化因子和破骨细胞发生抑制因子的研究进展[J].海军总医院学报，2006，19(4)：228-231.

[11] 张黎明，高凌.炎症细胞因子在2型糖尿病发病机制中的研究进展[J].重庆医学，2016，45(8)：1113-1116.

[12] 魏东，章晓蕾，杨春秀，等.牙周病患者血清细胞因子测定的临床意义[J].放射免疫学杂志，2008，21(2)：119-121.

[13] 张洁，王伟超，王虹，等.老年人群泪液白细胞介素-6与糖尿病及其视网膜病变的相关性[J].中国老年学杂志，2016，36(18)：4472-4473.