温度对金银花黄酮提取率与抗氧化活性的影响

展俊岭 皇甫阳鑫 高子怡 赵二劳

(忻州师范学院化学系，山西 忻州 034000)

工艺·试验《Technology&Experiment》

温度对金银花黄酮提取率与抗氧化活性的影响

展俊岭 皇甫阳鑫 高子怡 赵二劳

(忻州师范学院化学系，山西 忻州 034000)

通过金银花黄酮浸提法试验，研究了提取温度对金银花黄酮提取率与抗氧化活性的影响。结果表明：提取温度对金银花黄酮提取率和抗氧化活性都有一定的影响，选择金银花黄酮提取工艺条件时，需同时考虑黄酮的提取率和抗氧化活性。

金银花 黄酮 温度 提取率 抗氧化活性

金银花为忍冬科多年生植物忍冬的花蕾或初开的花，为我国传统常用中药，具有清热解毒、凉散风热、保肝利胆等功效，常用于各种感染、发炎、高血脂、肿瘤放疗与化疗口干等症的预防与治疗，享有“中药中的青霉素”之美誉[1,2]。黄酮类物质是金银花中的主要活性成分之一，相关研究[3,4]已表明，黄酮类化合物具有清除自由基、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、提高免疫力、改善血液循环、降血压、降血脂等多种生物活性，研究金银花中黄酮类成分的提取及功能活性具有重要的实际意义。我国有丰富的金银花资源，具有得天独厚的资源优势。目前，有关金银花中黄酮类成分提取及其功能活性的研究不少[5～7]，但有关提取温度对金银花黄酮抗氧化活性影响的研究鲜见报道。为此，本文研究提取温度对金银花黄酮提取率与抗氧化活性的影响，为金银花资源的综合开发和金银花中黄酮的有效提取提供科学依据。

1材料与仪器

1.1 材料

1.1.1原料

金银花产地山东，购买于忻州市本草堂，药材粉碎机粉碎，过20目筛。

1.1.2试剂

芦丁标准品，北京化学试剂公司；1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH·)：日本东京化成工业株式会社；其余乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等试剂均为国产分析纯。实验用水为二次去离子水。

1.2 仪器

723型可见分光光度计，上海光谱仪器有限公司；AL204电子分析天平：梅特勒-托利多仪器上海有限公司；SHZ-2D循环水式真空泵：巩义市予华仪器有限责任公司。

2方 法

2.1 金银花黄酮提取

称取金银花样品1.0 g，以体积分数50%乙醇溶液为提取剂，料液比 (g/mL)1∶30，在不同温度下浸提40 min。提取液过滤后，定容为100 mL，待测。

2.2 芦丁标准曲线的绘制

根据参考文献[8]的方法，准确移取质量浓度为0.25 mg/mL的标准芦丁溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0和8.0mL分别加入25 mL比色管中，都加入5%亚硝酸钠溶液1.0 mL，摇匀，静置6 min，再都加入10%硝酸铝溶液1.0 mL，摇匀，静置6 min，加入4%氢氧化钠溶液10 mL，以水定容至25 mL，静置反应15 min后。以试剂空白对照，在最大波长510 nm处测定吸光度。以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标，绘制芦丁标准曲线并求回归方程。

2.3 金银花黄酮提取率测定

准确移取不同温度下金银花黄酮提取液1.0 mL，按2.2中方法测定其黄酮含量，进而计算金银花黄酮提取率，比较不同提取温度对金银花黄酮提取率的影响。

2.4 温度对金银花黄酮抗氧化活性的影响

试验以清除DPPH·法评价金银花黄酮的抗氧化活性。对DPPH·清除率越高，则其抗氧化活性越强。

2.4.1金银花黄酮对DPPH·的清除率的测定

根据参考文献[9]的方法，取浓度为0.4 mg/mL的DPPH·溶液1.0 mL置于10 mL的比色管中，用体积分数50%乙醇定容至刻度，在波长517 nm处测定其吸光度为A0；取浓度为0.4 mg/mL的DPPH·溶液与金银花黄酮提取液各1.0 mL，置于10 mL比色管中，用体积分数50%乙醇定容至刻度，摇匀，避光反应30 min后，测定其吸光度为Ai；取金银花黄酮提取液1.0 mL，置于10 mL比色管中，用体积分数50%乙醇定容至刻度，在波长517 nm处测定其吸光度为Aj。按下式计算对DPPH·清除率：清除率(%)=[1-(Ai-Aj)/ A0] ×100。

2.4.2温度对金银花黄酮抗氧化活性的影响

分别取不同温度下所提、相同浓度的金银花黄酮提取液1.0 mL，按2.4.1的方法测定其对DPPH·的清除率，研究提取温度对金银花黄酮抗氧化活性的影响。

3结果与分析

3.1 芦丁标准曲线及回归方程

按试验方法，测得芦丁标准曲线如图1。由标准曲线求得回归方程为：A=10.439c+0.0084，相关系数R2=0.9992。芦丁在质量浓度0.01 ( 0.08mg/mL的范围内与其吸光度呈良好的线性关系。

图1 芦丁标准曲线Fig 1 Standard curve of Rutin

3.2 温度对金银花黄酮提取率的影响

按试验方法，测定不同温度下金银花黄酮提取率如图2。由图2可知，随提取温度的增加，金银花黄酮率呈先升后降趋势。在30 ℃～70 ℃温度范围内，随提取温度的增加，金银花黄酮提取率逐渐增大，提取温度为70 ℃时，金银花黄酮提取率达到最大值10.51%。提取温度高于70 ℃后，金银花黄酮提取率呈下降趋势。显见，提取温度不同，金银花黄酮提取率不同，提取温度对金银花黄酮提取率有一定影响。

图2 温度对黄酮提取率的影响Fig 2 Effects of temperature on extraction rate

3.3 温度对金银花黄酮抗氧化活性的影响

按试验方法，测得不同温度下所提金银花黄酮对DPPH·清除率如图3。由图3可知，在30 ℃～60 ℃温度范围内，随提取温度的增加，金银花黄酮对DPPH·清除率增大，提取温度为60 ℃时，金银花黄酮对DPPH·清除率达到最大值76.2%。在60 ℃～80 ℃温度范围内，随提取温度的增加，金银花黄酮对DPPH·清除率逐渐减少。其原因可能是提取温度相对较高时，易于使黄酮活性降低。显见，不同提取温度对DPPH·清除率有一定的影响，即温度对金银花黄酮的抗氧化活性有一定的影响。

图3 金银花黄酮对DPPH·清除率Fig 3 Scavenging rate of flavonoids on DPPH·

4结 论

通过金银花黄酮浸提法试验研究表明，提取温度对金银花黄酮的提取率和抗氧化活性都有一定影响。提取温度为70 ℃时，金银花黄酮提取率最高，达到10.51%。提取温度为60 ℃时，金银花黄酮抗氧化活性最强，对DPPH·清除率达到76.2%。显见，选择金银花黄酮提取工艺条件时，需同时考虑黄酮的提取率和抗氧化活性。

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EffectofTemperatureontheExtractionYieldandAntioxidantActivityofHoneysuckleFlavonoids

Zhan Junling Huangpu Yangxin Gao Ziyi Zhao Erlao

(Department of Chemistry, Xinzhou Teachers University, Shanxi Xinzhou 034000)

The extraction yield and antioxidant activity of Honeysuckle flavonoids were studied based on soaking extracting method. The results showed that the temperature had certain effects on the extraction yield and antioxidant activity of Honeysuckle flavonoids. The extraction yield and antioxidant activity should be considered simultaneously when choosing the extraction process of Honeysuckle flavonoids.

Honeysuckle Flavonoids Temperature Extraction yield Antioxidant Activity

10.16597/j.cnki.issn.1002-154x.2017.11.006

2017-08-14

国家级大学生创新创业训练计划项目(201610124001)；山西省高等学校大学生创新创业训练计划项目(2016381)；忻州师范学院化学化工创新基地项目(2017)

展俊岭(1996～)，男，本科生，研究方向：天然产物化学。通讯作者：赵二劳(1952-)，男，教授，研究方向：天然产物化学。E-mail: zel0350@163.com