安启源 刘璇 马金龙
摘要:通过水煮法对绿豆皮和绿豆仁中多糖的含量进行比较分析。在料液比1:20,提取温度为80℃,浸提时间为1.5h,碱浓度为0.2mol/L的情况下,绿豆皮中多糖的产率为6.22%,绿豆仁中的多糖产率为4.61%。
关键词:绿豆;多糖;提取;纯化
绿豆,又名文豆,是我国传统杂粮作物,属高蛋白、低脂肪、中淀粉作物,营养丰富,经济利用价值高。现代医学认为绿豆在抑菌、降温、抗肿瘤和解毒方面功效颇佳。多糖是一种复杂的高分子化合物,具有多种生物活性,再生物体内起着重要的作用。自20世纪50年代末,人们发现真菌多糖具有抗癌活性以来,多糖的研究受到越来越广泛的重视。绿豆多糖对羟自由基、DPPH和超氧自由基有较好的清除效果,最高清除效果可达到90%以上。钟葵采用响应面法对绿豆仁中多糖堿液提取工艺进行优化;陈群等人对银杏白果多糖进行了分离纯化和分析;余稳稳等对去皮绿豆水溶性多糖的分离纯化,为试验确定了基础。目前对绿豆的研究基本都是对绿豆整体以及对绿豆的仁进行研究,而绿豆皮与绿豆仁对比之间的研究存在一定的发展空间,以及一些方法的优化也都存在待提高的空间。
1材料与方法
1.1试验材料
绿豆(市售),去离子水,无水乙醇,氯仿,正丁醇,0.2mol/L的氢氧化钠溶液。
1.2试验器材
恒温加热磁力搅拌器、循环水式真空泵、旋转蒸发器、电子天平、恒温培养振荡器、洁净工作台,低温冷冻离心机、电热恒温鼓风干燥箱、植物组织粉碎机。
1.3试验方法
1.3.1材料预处理。将绿豆在水中浸泡12h,之后手工使绿豆皮和绿豆仁分离,之后在干燥箱中烘干4h至样品彻底干燥,之后在植物粉碎机中将样品打碎成粉状。1.3.2水煮提取法。取样品2g,以料液比为1:20加入0.2mol/L的氢氧化钠溶液,在恒温加热磁力搅拌器中以80℃,恒温提取1.5h,之后在旋转蒸发器中真空浓缩至1 5mL左右,用循环水式真空泵抽滤使残渣与溶液分离。
1.3.3杂蛋白的去除。用Sevag的方法去除杂蛋白,氯仿、正丁醇按体积比3:1混合均匀之后加入到粗糖溶液中,至体积为粗糖溶液的1/3,放在恒温培养振荡器中低温振荡15min。重复操作直到茚三酮试剂反应呈阴性,之后再低温冷冻离心机中以8000r/min,4℃离心15min,去除杂蛋白,取上层清液。
1.3.4乙醇沉淀。在去除多糖后的溶液中加入无水乙醇直到乙醇含量为75%~80%,之后放入冰箱中储藏12h,之后在低温冷冻离心机中以10000r/min,4℃离心15min,收集沉淀。
1.3.5产品的干燥。将沉淀在60℃恒温鼓风干燥4h,得到块状多糖,在研钵中研碎,获得多糖制品。
2试验结果
在料液比为1:20情况下,浸提温度为80%,浸提时间为1.5h,碱浓度为0.2mol/L下,绿豆皮中多糖产率为6.22%,绿豆仁中多糖产率为4.61%。
3结论
通过试验得出在水煮法提取多糖的试验中,在料液比1:20,80℃提取1.5h,碱浓度为0.2mol/L的情况下,分别提取绿豆皮和绿豆仁中的多糖,实验结果显示绿豆皮中的多糖产率为6.22%,绿豆仁中多糖的产率为4.61%。由此证明绿豆皮中的多糖含量大于绿豆仁中的多糖含量,绿豆中的主要多糖在绿豆皮中,而绿豆仁中的多糖含量较少。但是此条件是否为提取的最佳条件尚有待验证。