芪参还五胶囊对冠心病大鼠血脂水平的影响

陈蕊肖 王立新 王庆海

(河北省沧州中西医结合医院心内三科，河北 沧州 061001)

芪参还五胶囊对冠心病大鼠血脂水平的影响

陈蕊肖 王立新1王庆海2

(河北省沧州中西医结合医院心内三科，河北 沧州 061001)

目的观察芪参还五胶囊对冠心病大鼠血脂水平的影响，探讨其防治冠心病的相关机制。方法将60只健康雄性SD大鼠随机分为2组，正常对照组15只，造模组45只。造模组采用喂食高脂饲料联合垂体后叶注射液腹腔注射的方法制备冠心病大鼠模型，造模后造模组剩余40只大鼠随机分为模型对照组，芪参还五胶囊低、中、高剂量组，每组各10只，另设正常对照组10只。芪参还五胶囊低、中、高剂量组分别予芪参还五胶囊0.125、0.25、0.5 g/(kg·d)灌胃给药，正常对照组及模型对照组分别予0.9%氯化钠注射液10 mL/kg灌胃，均每日1次，共4周。采用全自动生化分析仪检测5组大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及脂蛋白(a)[LP(a)]水平。结果与正常对照组相比，模型对照组及芪参还五胶囊低、中、高剂量组TC、LDL-C、TG、LP(a)水平均升高(P<0.05)，HDL-C水平降低(P<0.05)。与模型对照组相比，芪参还五胶囊低、中、高剂量组TC、LDL-C、TG水平降低(P<0.05)，HDL-C水平升高(P<0.05)，LP(a)水平无明显变化(P>0.05)。与芪参还五胶囊低剂量组相比，芪参还五胶囊中、高剂量组TC、LDL-C、TG水平降低(P<0.05)，HDL-C、LP(a)水平无明显变化(P>0.05)。与芪参还五胶囊中剂量组相比，芪参还五胶囊高剂量组TG水平降低(P<0.05)，TC、LDL-C、HDL-C、LP(a)水平均无明显变化(P>0.05)。结论芪参还五胶囊可调节冠心病大鼠脂质代谢，有利于冠心病的防治。

冠心病；疾病模型，动物；动物，实验；中药疗法；降血脂药(中药)

冠心病是指冠状动脉粥样硬化和(或)冠状动脉功能性改变(痉挛)造成冠状动脉管腔狭窄或阻塞，使心肌缺血、缺氧、坏死进而引发的心脏病。冠心病是多病因性疾病，其公认的危险因素有性别、年龄、心血管病早发家族史、吸烟、高血压、血脂异常、糖尿病、肥胖、缺少体力活动等。脂质代谢异常是动脉粥样硬化最重要的危险因素，大量临床研究及动物实验证实，总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平升高以及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平降低是冠心病的主要危险因素，而包括甘油三酯(TG)、脂蛋白(a)[LP(a)]水平升高在内的其他类型血脂异常与冠心病的发生也有一定关联[1-5]。芪参还五胶囊为河北省沧州中西医结合医院院内制剂，以传统中药方剂“补阳还五汤”为基础方加减而成。临床及基础研究表明，芪参还五胶囊能够改善非痴呆型血管性认知功能障碍患者的认知功能，并能调节脂质代谢；促进周围神经修复和再生；有效抑制急性脑梗死患者病变区的炎症反应，减轻神经细胞损伤，对神经功能的恢复有促进作用[6-8]。但对于芪参还五胶囊是否具有通过调节血脂代谢而防治冠心病的作用，目前尚未清楚。本实验观察芪参还五胶囊对冠心病大鼠血脂水平的影响，进一步探讨芪参还五胶囊防治冠心病的相关机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 60只清洁级健康雄性SD大鼠，体质量(200±20)g，由斯贝福(北京)生物技术有限公司提供，动物合格证号11401500012397，许可证号：SCXK(京)2016-0002。

1.1.2 动物饲料 普通大鼠维持饲料，由北京安贞医院实验动物中心提供。高脂饲料，由北京华阜康生物科技股份有限公司调配，其中3%为胆固醇、0.5%为胆酸钠、0.2%为丙基硫氧嘧啶、5%为白糖、10%为猪油、81.3%为基础饲料。

1.1.3 实验药物 芪参还五胶囊：由黄芪、太子参、桃仁、红花、当归、赤芍、川芎、胆南星、清半夏、玄参、石决明、钩藤、麦冬、牛膝、大黄、连翘、全蝎、地龙、水蛭共19味中药组方而成。由河北省沧州中西医结合医院中药制剂室配制，冀药制字Z20050798，批号030310。垂体后叶注射液：南京新百药业有限公司，国药准字H32026638，批号160302，规格1 mL：6单位/支。

1.1.4 主要仪器 福州华志科学仪器有限公司电子天平PTZ-224，海尔(Haier)BCD-242BF冰箱，德国Hettich MIKRO220离心机，日本日立7600-010全自动生化分析仪，德国eppendorf移液器，日本奥林巴斯BX51T-PHD-J11光学显微镜及其照相装置，常州市郝思琳医用仪器有限公司TEC-2500病理组织漂烘仪，德国莱卡RM2015石蜡切片机。

1.1.5 实验条件 本实验于北京安贞医院实验动物中心进行，室温23～27 ℃，湿度44%～51%，通风，分笼饲养(3～4只/笼)，动物饮水由北京安贞医院实验动物中心提供。

1.2 实验方法

1.2.1 分组及造模方法 先将60只健康雄性SD大鼠随机分为2个实验组，正常对照组15只，造模组45只。造模组采取喂食高脂饲料联合垂体后叶注射液腹腔注射的方法制备冠心病大鼠模型。即造模组大鼠每日喂食高脂饲料，自由饮水，共计8周，最后3 d予垂体后叶注射液30单位/(kg·d)腹腔注射。正常对照组大鼠喂食普通饲料，自由饮水。8周后，2组分别取5只大鼠，取其心脏及冠脉组织，观察正常对照组与造模组大鼠冠脉及心肌病理变化，确认造模是否成功。造模成功的标准[9]：①一般情况：小鼠体质量减轻，活动和饮食减少，反应迟钝，毛色暗淡无光泽，爪趾和口唇发绀。②冠脉及心肌病理改变：冠脉内膜损伤，内皮细胞排列紊乱，管壁脂质沉积，管腔缩窄；心肌细胞肿胀、排列紊乱，心肌间质纤维化，部分区域可见显著的局灶性坏死，细胞核萎缩。结果造模组大鼠均造模成功(给药结束后病理观察均证实)。造模后将造模组剩余40只大鼠随机分为4组，即模型对照组、芪参还五胶囊低剂量组、芪参还五胶囊中剂量组及芪参还五胶囊高剂量组，每组各10只。正常对照组5只大鼠冠脉及心肌病理正常，剩余10只进行下一步研究。

1.2.2 给药方法 芪参还五胶囊成人给药剂量为2.4 g/d，根据成人(60 kg)和大鼠按照体表面积折算的等效剂量比值换算出大鼠给药剂量为0.25 g/(kg·d)，定为中剂量给药量，按1∶2∶4比例计算出芪参还五胶囊低、中、高剂量组给药量分别为0.125、0.25、0.5 g/(kg·d)。按照以上剂量，将药物溶于0.9%氯化钠注射液10 mL/kg中按照分组分别对应灌胃给药。正常对照组及模型对照组予0.9%氯化钠注射液10 mL/kg灌胃。均每日1次，共4周。实验期间各组大鼠自由饮水，普通饲料喂养，每周定时称体质量，并依据体质量的变化调整用药剂量。

1.2.3 观察指标 各组大鼠末次灌胃后，禁食、水12 h，空腹测体质量，予水合氯醛0.3 mL/100 g腹腔推注麻醉。麻醉成功后仰卧位固定，沿腹正中线剪开皮肤，暴露腹主动脉，取血4 mL，置于分离胶试管，3 500 r/min，离心15 min，取血清以全自动生化分析仪检测TC、LDL-C、HDL-C、TG、LP(a)水平。

2 结 果

2.1 大鼠死亡情况 灌胃过程中，正常对照组及芪参还五胶囊高、低剂量组均无大鼠死亡，模型对照组及芪参还五胶囊中剂量组各死亡1只。

2.2 5组大鼠血脂水平比较 见表1。

表1 5组大鼠血脂水平比较

与正常对照组比较，*P<0.05；与模型对照组比较，△P<0.05；与芪参还五胶囊低剂量组比较，#P<0.05；与芪参还五胶囊中剂量组比较，☆P<0.05

由表1可见，与正常对照组相比，模型对照组及芪参还五胶囊低、中、高剂量组TC、LDL-C、TG、LP(a)水平均升高(P<0.05)，HDL-C水平降低(P<0.05)。与模型对照组相比，芪参还五胶囊低、中、高剂量组TC、LDL-C、TG水平降低(P<0.05)，HDL-C水平升高(P<0.05)，LP(a)水平无明显变化(P>0.05)。与芪参还五胶囊低剂量组相比，芪参还五胶囊中、高剂量组TC、LDL-C、TG水平降低(P<0.05)，HDL-C、LP(a)水平无明显变化(P>0.05)。与芪参还五胶囊中剂量组相比，芪参还五胶囊高剂量组TG水平降低(P<0.05)，TC、LDL-C、HDL-C、LP(a)水平均无明显变化(P>0.05)。

3 讨 论

近年来，我国心血管疾病的发病率和死亡率逐年增高，2013年较2009年我国冠心病死亡人数增加了90.9%[10-11]。近年来发现的冠心病新的危险因素包括超敏C反应蛋白、高同型半胱氨酸血症、高尿酸、高内脂素及心理因素等[12]。血脂代谢紊乱是冠心病主要的危险因素[13]，与冠心病的发病关系密切。王薇等[1]通过前瞻性研究发现，在急性冠心病发病人群中，11.7%归因于血清TC水平升高；TC≥7.28 mmol/L(280 mg/dL)的人群急性冠心病事件发病风险比TC<3.64 mmol/L(140 mg/dL)的人群增加1.63倍。Koba等[2]通过多元Logistic回归分析显示，小而密低密度脂蛋白胆固醇(sd-LDL-C)与严重冠心病密切相关，且这种相关性独立于LDL-C水平，对严重稳定型冠心病的预测价值高于LDL-C水平。动脉粥样硬化的形成起始于内皮损伤，而脂质代谢紊乱及其在血管内皮的沉积在动脉粥样硬化的发生和发展中具有重要的作用。在长期高脂血症的情况下，氧自由生成增多，使脂质过氧化进而促使氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)含量增多，一氧化氮(NO)合成受到抑制，内皮素-1(ET-1)分泌增加，血管内皮细胞功能受损。HDL能通过胆固醇逆向转运，把外周组织及血管壁中的胆固醇转移到肝脏，经肝脏分解代谢排出体外，使血管壁中聚积的胆固醇减少，从而抗动脉粥样硬化的发生、进展。血清TG水平与冠心病发病有一定关联，但是否为冠心病的独立危险因素尚需进一步探讨[14-16]。LP(a)水平升高使冠心病患病风险增加[17-19]。虽然LP(a)的生理功能目前尚不十分清楚，但目前一些研究表明LP(a)能够促进急性炎症的发生以及泡沫细胞的形成，这可能与其促进氧化修饰及抗纤维蛋白溶解的作用有关[20]。

本实验采用喂食高脂饲料联合腹腔注射垂体后叶注射液的方法制备冠心病大鼠模型。喂食高脂饲料使大鼠出现脂质代谢紊乱，进而出现动脉粥样硬化，然后注射垂体后叶注射液诱发心肌缺血。该制备方法接近临床上冠心病的病理生理学改变，造模成功率高，操作简单，管理方便，大鼠创伤小、病死率低，但造模时间长、缺血程度难统一是其局限性。本研究显示，与正常对照组相比，模型对照组大鼠TC、LDL-C、TG、LP(a)水平均升高(P<0.05)，HDL-C水平降低(P<0.05)。而采用芪参还五胶囊干预后，TC、LDL-C、TG水平降低(P<0.05)，HDL-C水平升高(P<0.05)，且芪参还五胶囊中、高剂量组的调脂效果优于芪参还五胶囊低剂量组(P<0.05)，芪参还五胶囊中剂量组与芪参还五胶囊高剂量组组间比较显示，TC、LDL-C、HDL-C水平无明显差异(P>0.05)，故临床上推荐以中剂量作为治疗剂量。芪参还五胶囊无明显降低LP(a)的作用。

中医学认为，冠心病属于中医学胸痹、心痛等范畴，其基本病理变化为本虚标实，本虚主要为气血亏虚，标实主要为痰浊血瘀。芪参还五胶囊以“补阳还五汤”为基础方加太子参、胆南星、清半夏、玄参、石决明、钩藤、麦冬、牛膝、大黄、连翘、全蝎、水蛭而成，具有益气活血、化瘀通络、熄风化痰、清热养阴之效，主要用于冠心病、脑梗死、高脂血症等证属气虚血瘀、痰热蕴结者，证见胸闷、胸痛、憋气、头晕、头痛、半身不遂、气短乏力等。其中黄芪、太子参为君药，意在使气推血行，化瘀通络；当归补血活血，通经活络，为臣药；桃仁、红花、赤芍、川芎、牛膝协同当归以活血祛瘀；胆南星、清半夏、石决明、钩藤熄风化痰；玄参、麦冬、大黄、连翘合用可清热养阴；全蝎、地龙、水蛭活血通络，善行专走，通行全身，以助药力，为佐药。现代药理研究表明，黄芪具有强心、改善心肌代谢的作用，亦可以扩张冠脉血管，增加心肌供血；缓解高游离脂肪酸对血管内皮功能的损伤，保护血管内皮细胞；调节小鼠血脂代谢，增强机体抗脂质过氧化的作用[21-22]。太子参含有皂甙、多糖、环肽、氨基酸、磷脂、微量元素等多种活性物质，能够降低血脂、血糖，且具有清除氧自由基、保护细胞内膜、改善心肌代谢等作用[23]。当归、川芎、赤芍、桃仁、红花均具有扩张冠脉、抗凝、抗血小板聚集及降低心肌耗氧量的作用[24]。牛膝总皂苷对心肌缺血大鼠具有扩张血管、抗血小板聚集、抑制脂质过氧化反应、保护血管内皮的作用[25]。地龙含有蚓激酶、蚓胶原酶、地龙纤维蛋白溶解酶、地龙溶栓酶、游离氨基酸等活性成分，全蝎的活性成分包括蝎毒、三甲胺、核苷类等，水蛭含有水蛭素、肝素、组织胺、氨基酸、吻蛭素等成分，全蝎、地龙、水蛭三种药物均具有抗凝、抗血小板聚集、溶栓的作用[26-28]。

综上所述，芪参还五胶囊具有通过调节血脂代谢防治冠心病的作用。但由于冠心病是多病因性疾病，芪参还五胶囊的组成药物较多，作用机制复杂，对于其防治冠心病的作用机制还需进一步研究。

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EffectofQishen-huanwucapsuleonserumlipidlevelinratswithcoronaryheartdisease

CHENRuixiao*,WANGLixin,WANGQinghai.*

ThirdDepartmentofCardiology,CangzhouHospitalofIntegrativeChineseandWesternMedicineinHebeiprovince,Hebei,Cangzhou061001

ObjectiveTo observe the effects of Qishen-huanwu capsule on the level of serum lipid in rats with coronary heart disease (CHD), and explore its mechanism of prevention and treatment of CHD.Methods60 healthy male Sprague-Dawley rats were randomly divided into two groups, 15 rats in the normal control group and 45 ratsin the model group.The model group was treated by high fat diet and intraperitoneal injection of Pituitrin to establish the rat model of CHD, and then the model rats were randomly divided into model control group, the low, middle and high dose of Qishen-huanwu capsule groups,10 rats in each group，another 10 rats were selected as the normal control group.The low, middle, and high dose of Qishen-huanwu capsule group were respectively given Qishen-huanwu capsule by 0.125 g/(kg·d), 0.25 g/(kg·d) and 0.5 g/(kg·d). The normal control group and model control group were given 0.9% sodium chloride injection gavage by 10 mL/kg, once a day for 4 weeks. The levels of total cholesterol (TC), triglyceride (TG), low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C), high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C) and Lipoprotein alpha [LP(a)] were detected by the automatic biochemical analyzer.ResultsCompared with the normal control group, the levels of TC, LDL-C, TG and LP(a) increased in the model control group, the low, middle, and high dose of Qishen-huanwu capsule group (P<0.05), and the level of HDL-C reduced (P<0.05). Compared with the model control group, the levels of TC, LDL-C and TG decreased in the low, middle, and high dose of Qishen-huanwu capsule group (P<0.05), and the level of HDL-C increased (P<0.05), the LP(a) had no obvious changes (P>0.05). Compared with the low dose of Qishen-huanwu capsule group, the levels of TC, LDL-C and TG decreased in the middle and high dose of Qishen-huanwu capsule group (P<0.05), and the levels of HDL-C and LP(a) had no obvious changes (P>0.05). Compared with the middle dose of Qishen-huanwu capsule group, the level of TG reduced (P<0.05), the levels of TC, LDL-C, HDL-C and LP(a) had no obvious changes (P<0.05).ConclusionQishen- huanwu capsule can regulate lipid metabolism of rats, and it is conducive to the prevention and treatment of CHD.

Coronary heart disease; Disease models; Animal; Experiment; Traditional Chinese medicine therapy; Hypolipidemic drugs (traditional Chinese medicine)

10.3969/j.issn.1002-2619.2017.12.022

R541.4；R285.5；R972.6

A

1002-2619(2017)12-1857-05

1 河北省沧州中西医结合医院政务部，河北 沧州 061001

2 河北省沧州中西医结合医院科教部，河北 沧州 061001

陈蕊肖(1990—)，女，医师，硕士。从事心内科临床诊疗工作。研究方向：心血管病。

2017-09-04)

曹志娟)