血清CEA、miR-1、let-7联合检测在肺癌诊断中的应用价值

叶火林，高淑平，毕向军，孙成晖，刘汉起，谭艳玲，陈桂茹

(阳春市人民医检验科1、肿瘤科2，广东 阳春 529600)

血清CEA、miR-1、let-7联合检测在肺癌诊断中的应用价值

叶火林1，高淑平1，毕向军2，孙成晖2，刘汉起1，谭艳玲1，陈桂茹1

(阳春市人民医检验科1、肿瘤科2，广东 阳春 529600)

目的探讨血清癌胚抗原(CEA)、血清miR-1、let-7联合检测在肺癌诊断中的应用价值。方法选取阳春市人民医检2015年8月至2016年12月期间收治的62例肺癌患者为研究对象，选择同期健康体检者50例纳入对照组，检测血清CEA水平，同时采用定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测血清miR-1、let-7水平。结果肺癌组血清CEA水平为(25.18±9.85)ng/mL，明显高于对照组的(3.86±1.54)ng/mL，血清miR-1、let-7相对表达量分别为(0.286±0.112)、(0.368±0.158)，明显低于对照组的(0.975±0.398)、(1.296±0.547)，差异均有统计学意义(P＜0.05)。结论血清CEA联合miR-1、let-7的检测有利于肺癌的早期诊断。

癌胚抗原；肺癌；微小核糖核酸；肿瘤标志物

肺癌是严重危害我国居民健康和生命的最常见恶性肿瘤，其病死率远高于其他恶性肿瘤，并且其发病率和死亡率近年来在我国也呈现出上升趋势[1]。目前临床已广泛开展血清癌胚抗原(CEA)等肿瘤标志物的检测以期望对肺癌进行早期发现、诊疗，但是单一血清肿瘤标志物检测最大的不足在于灵敏度及特异性不强，特别是在肿瘤的早期检出率不高[2]。微小RNA(miRNA)是一类内源性、非编码的单链小分子RNA，近年来研究证明其在恶性肿瘤发生、发展过程中具有重要作用[3]。本研究旨在探讨血清CEA联合血清miR-1、let-7检测在肺癌诊断中的应用价值，以期望为临床上肺癌的早期诊断提供更充分的依据，为肺癌的治疗研究提供新的诊疗策略。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取阳春市人民医院2015年8月至2016年12月期间收治的62例肺癌患者为研究对象，其中男性36例，女性26例，年龄36～77岁，平均(62.8±11.3)岁；均经术后病理确诊为肺癌，鳞癌30例、腺癌16例、腺鳞癌10例、小细胞肺癌6例。排除合并急慢性感染、其他恶性肿瘤、血液系统疾病、自身免疫性疾病、肝肾功能不全以及合并远处转移的患者。选择同期健康体检者50例纳入对照组，体检结果均正常且无肿瘤病史，其中男性30例，女性20例，平均年龄(61.0±12.8)岁。两组受检者的年龄、性别比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 研究方法两组受检者均于入组次日抽取空腹静脉血3 mL，在24 h内以3 000 r/min离心，10 min后分离上清液并保存于-80℃条件下待测。血清CEA在Luminex200多功能流式点阵仪上采用流式荧光发光法进行检测，血清miR-1、let-7采用定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)法进行测定。

1.3 统计学方法应用SPSS19.0统计学软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差(x-±s)表示，两样本均数的比较采用t检验，计数资料采用χ2检验，均以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

肺癌组血清CEA水平明显高于对照组，血清miR-1、let-7相对表达量明显低于对照组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 两组受检者血清CEA、miR-1、let-7水平的比较(±s)

表1 两组受检者血清CEA、miR-1、let-7水平的比较(±s)

组别 例数CEA(ng/mL)miR-1let-7肺癌组对照组t值P值64 50 25.18±9.85 3.86±1.54 15.147＜0.05 0.286±0.112 0.975±0.398 13.219＜0.05 0.368±0.158 1.296±0.547 12.914＜0.05

3 讨论

肺癌的发病率和死亡率在我国一直居于所有恶性肿瘤的首位，调查显示我国肺癌发病率、死亡率占所有恶性肿瘤的19.59%、24.89%[4]。肺癌早期缺乏特异性的临床表现，多数患者经影像学和病理诊断时已经发生了扩散或远处转移。虽然很多学者针对肺癌临床和机制的研究已经进行了深入研究，但肺癌患者的预后仍然不尽人意，肺癌的五年生存率仅为11%[5]。因此，寻找可靠的肺癌肿瘤标志物对其进行早期诊断、早期治疗对改善患者的预后具有重要的临床意义。CEA是传统的肺癌血清学标志物，其在胚胎期表达，但是不表达于正常成年人。研究表明血清CEA升高程度与癌细胞数量、肿瘤复发或转移均有相关性，是目前肺癌早期诊断中应用最广泛的血清肿瘤标志物[6]。单一的肿瘤标志物检测可能会造成部分患者漏诊，联合检测则可明显提高早期肿瘤的检出率[7]。

目前在肿瘤发生发展的分子机制的研究中，蛋白质编码基因已经成为各研究的重点。miRNA是一类大小约22 nt的单链小分子RNA，可参与到多种生物学过程包括肺癌的发生、发展[8]。miRNA在肿瘤发生时存在突变、表达上调或降低等现象。最近的研究显示，miRNA表达差异有助于恶性肿瘤早期诊断和疗效预测，是一种新型的肿瘤标志物，结合传统肿瘤标志物与相关miRNA的检测有助于发现早期肿瘤，提高肿瘤诊断的正确性和特异性。研究发现，miR-21、miR-486、miR-375和miR-200b在痰液标本及手术切除肺癌组织中的共表达作为预测肺腺癌的生物标记物，敏感度与特异度分别达到了80.6%和91.7%[9]。miR-1、let-7均被众多研究证实可在肿瘤中起到“抑癌基因”的作用。刘旭斌等[10]研究指出肝细胞癌患者血清let-7表达水平较正常对照组降低；2011年日本学者发现，在肺癌患者样本中let-7表达异常，这也为其诊断和治疗提供了新基础[11]；Mohd等[12]研究发现miR-1是治疗肺癌的一个潜在靶点。本研究发现肺癌组血清CEA水平明显高于对照组，血清miR-1、let-7相对表达量明显低于对照组，说明血清CEA是诊断肺癌的可靠血清标志物，进一步联合血清miR-1、let-7的检测有利于肺癌的早期诊断。

综上所述，血清miR-1、let-7在肺癌患者明显降低，血清CEA联合miR-1、let-7的检测有利于肺癌的早期诊断。

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R734.2

B

1003—6350（2017）23—3938—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.23.053

广东省阳春市科技计划项目(编号：社【2016】45)

叶火林。E-mail：13829868868@139.com

2017-04-13)