苹果酸酰化对黑果枸杞花青素稳定性改善的研究

, ,,,，2，*

(1.青海大学农牧学院,青海西宁 810016;2.青海大学省部共建三江源生态与高原农牧业国家重点实验室,青海西宁 810016)

苹果酸酰化对黑果枸杞花青素稳定性改善的研究

古明辉1,陈虎1,李希羽1,高庆超1,王树林1，2，*

(1.青海大学农牧学院,青海西宁 810016;2.青海大学省部共建三江源生态与高原农牧业国家重点实验室,青海西宁 810016)

由于黑枸杞花青素的稳定性较差,在食品及药品中的应用受到限制。为了提高其稳定性,对黑枸杞花青素进行苹果酸酰基化改性。酰化后在pH3.5体系下以90 ℃水浴下酰化花青素提高保留率为指标，通过单因素实验探讨苹果酸与花青素的质量比、搅拌时间和反应温度对酰化效果的影响,采用正交实验优化酰化反应工艺条件,并用紫外可见和傅里叶红外吸收光谱法验证。研究了酰基化花青素的光、热稳定性,同时建立并验证酰基化花青素热降解动力学模型。结果表明,当黑枸杞花青素与苹果酸的质量比为1∶3.5,搅拌5 h,反应温度50 ℃时,花青素的酰化提高保留率可达26.39%,与非酰化花青素相比,光稳定性增加17%。未酰化花青素预测模型:t=(lnρ0-lnρ1)/(0.3765exp(-742.7/T));酰化花青素预测模型:t=(lnρ0-lnρ1)/(0.2640exp(-685.8/T))。在80 ℃条件下应用热降解模型分别预测未酰化和酰化黑果枸杞花青素的半衰期,其结果分别为15.09和18.32 h,测定其保留率分别为53.2%和48.7%,接近初始值的一半,热降解动力学模型有效。实验表明苹果酸酰化花青素方法切实可行,产物酰化花青素的稳定性得到提升。

酰基化,黒果枸杞花青素,苹果酸,稳定性

野生黑果枸杞(LyciumruthenicumMurr)主要分布在青海、西藏、新疆、宁夏、甘肃等省,是一种具有极大开发潜力的野生浆果资源[1-3]。随着人们对黑枸杞保健及食用价值的认可,人工种植黑枸杞的面积急剧增加,黑枸杞产量逐渐增加,急需后续深加工处理。黑果枸杞食用部位为干燥的果实,果实中含有大量花青素[4]。花青素(Anthocyanidin)属多酚类黄酮化合物,是一类在天然植物中广泛存在的天然水溶性色素。目前已知的花青素有20种左右,且大多以糖苷的结构形式存在,很少以游离形式存在[5-7]。

黑果枸杞花青素因有酚羟基具有很高的活性,是重要的天然抗氧化物质。同时,它具有吸收有害放射性物质、保护器官免受辐射损伤的作用[8-9]。花青素分子基团因天然缺电子性而具有高活性,但同时对温度和光照变化敏感,阻碍在食品药品行业中的应用。

为了使天然提取的花青素更稳定,拓展其应用范围,人们采用不同的方法对其性质进行改进,如:加鳌合剂、抗氧化剂、辅色剂、微胶囊包埋以及化学改性修饰等方法[10-12]。黑果枸杞花青素的酰基化能使有机酸与糖链相连,形成“三明治”构型,有效地提高其稳定性[13-15]。我国学者卢晓蕊等从红心萝卜中提取得到花青素,用丁二酸酐进行了酰化处理得到酰化花青素,并依据酰化前后得到的花青素红外光谱进行对比分析,讨论了酰基化的修饰位置[16];李路宁等用没食子酸对蓝莓花青素进行酰基化处理并证明其抗氧化性得到了明显提高[17]。目前,应用化学手段合成酰化黑果枸杞花青素却鲜有报道。本实验利用苹果酸对黑枸杞花青素进行酰基化改性,采用单因素和正交实验探讨影响酰基化反应的因素及其酰化反应工艺,并研究酰基化黑果枸杞花青素的稳定性,解决黑果枸杞系列产品开发中花青素不稳定的技术难题,这对进一步开发利用黑果枸杞花青素具有重要意义。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

黑果枸杞花青素(粗品,W≥20.0%) 青海康元药用资源开发有限公司;苹果酸(AR,W≥99.5%) 西陇化工股份有限公司;无水吡啶(AR,W≥99.5%) 上海中秦化学试剂有限公司;溴化钾(AR,W≥99.5%) 天津市北辰方正试剂厂;盐酸(36.0～38.0%)及氯化钾(AR,W≥99.5%) 上海之臻化工有限公司;氢氧化钠(AR,W≥96.0%) 天津博迪化工有限公司。

UV-2600紫外-可见光分光光度计 日本岛津公司;BIO-BAD EXAL-IBURFTS 3000型红外光谱仪 北京中西远大有限公司;RE2000A型旋转蒸发仪 郑州艾特仪器设备有限公司;101-0AB型电热鼓风干燥箱 天津泰斯特仪器有限公司;FD-1C-50型真空冷冻干燥机 上海比朗仪器有限公司;FA2004电子分析天平 上海析域仪器设备有限公司;PHS-3C型酸度计 上海雷磁仪器厂;HH-6型电热恒温水浴锅 上海比朗仪器有限公司;98-2型磁力搅拌器 上海锦赋实验仪器设备有限公司。

1.2 实验方法

1.2.1 改性黑果枸杞花青素的制备 准确称取175 mg苹果酸、5 mL吡啶和50 mg花青素粗品溶于40 mL乙醇(50%)溶液,50 ℃下磁力搅拌器搅拌反应4.5 h,反应结束后用旋转蒸发器50 ℃减压除去吡啶和乙醇,真空冷冻干燥制得酰化花青素[17]。酰化后在pH3.5体系下，以90 ℃水浴下酰化花青素提高保留率为指标说明其酰化效果。

1.2.2 黑果枸杞花青素保留率的测定

1.2.2.1 色素最大吸收波长的确定 用紫外-可见光分光光度计,在200～700 nm内对黑果枸杞色素和改性枸杞花青素进行光谱扫描,每种花青素测定3次,确定改性和未改性黑枸杞色素的最大吸收波长。

1.2.2.2 保存率的测定 采用pH示差法测定花青素的含量[18],并通过含量比计算提高保留率。

Y=ρ1/ρ0×100

式(1)

式中:Y:花青素的保留率(%);ρ1:已被处理物质的花青素含量(nmol/g);ρ0:未被处理物质的花青素含量(nmol/g)。

提高保留率(%)=Y1-Y0

式(2)

式中:Y1:酰化花青素的保留率(%);Y0:未酰化花青素的保留率(%)。

1.2.3 单因素实验

1.2.3.1 花青素与苹果酸质量比对改性效果的影响 分别取100、175、250、325 mg四组苹果酸,将苹果酸和50 mg花青素粗品、5 mL吡啶溶于40 mL乙醇(50%)溶液,50 ℃反应4.5 h,反应结束后用旋转蒸发器减压除去吡啶和乙醇,真空干燥制得酰化花青素。酰化花青素溶于80 mL蒸馏水中在90 ℃下加热3、5、7 h,用pH示差法测定花青素含量,计算保留率,并与未酰化花青素作对照计算提高保留率,确定最佳质量比。

1.2.3.2 酰化反应温度对改性效果的影响 在确定苹果酸添加量的基础上,保持吡啶、花青素粗品及乙醇(50%)量不变,分别在30、40、50、60 ℃下反应4.5 h,测定花青素含量,同上计算提高保留率值,确定最佳反应温度。

1.2.3.3 不同搅拌时间对改性效果影响 在确定苹果酸添加量及酰化反应温度的基础上,将苹果酸、5 mL吡啶和40 mg花青素粗品溶于40 mL乙醇(50%),在固定温度下分别搅拌3.5、4.5、5.5、6.5 h,测定花青素含量,同上计算提高保留率值作图,确定最佳反应时间。

1.2.4 酰化反应正交实验设计 为确定改性反应的最佳条件,在单因素实验的基础上以花青素90 ℃加热3 h的保留率为指标,选取花青素与苹果酸质量比(A)、反应温度(B)、搅拌时间(C)为实验因素,保留1列空列,设计L9(34)正交实验,实验因素水平表见表1。方案中实验重复3次,保持pH(3.5)、溶液体积(50 mL)不变。

表1 正交实验因素水平表Table 1 Table of factors and levels of orthogonal

1.2.5 改性黑果枸杞的光谱验证

1.2.5.1 紫外-可见光色谱扫描 将反应液稀释40倍在200～700 nm范围内用紫外-可见分光光度计扫描吸收色谱,根据色谱中吸收峰的差异判断改性结果。

1.2.5.2 改性黑果枸杞花青素结构红外光谱表征 准确称取2 mg未改性的和改性的黑果枸杞花青素,用KBr进行压片处理,然后用傅里叶红外光谱仪在4000～400 cm-1的范围内进行红外吸收光谱扫描。

1.2.6 优化条件下稳定性测定

1.2.6.1 酰化花青素与未酰化花青素的热稳定性比较 将已稀释的黑枸杞花青素及其酰化产物各取一份,分别溶于50 mL蒸馏水中,放入45、60、75、90 ℃的水浴锅中,加热3、5、7 h时,用pH示差法测定花青素含量,计算其提高保留率值。

1.2.6.2 酰化花青素与未酰化花青素的光稳定性比较 将已稀释的枸杞花青素及其酰化产物各取一份,分别溶于50 mL蒸馏水并密封保存,在采光良好处自然光光照。在10、15、20 d时,用pH示差法测定花青素含量,计算保留率。

1.2.7 黑果枸杞花青素的热降解动力学研究 食品中绝大多数组成成分在贮藏加工过程中都会受到各种因素的影响而降解,这些成分发生降解反应的动力学模型基本上符合零级或一级动力学反应模型[19-21]。根据Arrhenius方程[20-24]计算黑果枸杞花青素热降解反应的速率常数k及活化能Ea,推出热降解动力学模型。最后通过半衰期tl/2进行模型验证。

1.2.8 数据处理 各处理均设3次重复,并计算平均值,以SPSS 13.0进行数据统计分析。

2 结果与分析

2.1 单因素实验结果

2.1.1 不同花青素与苹果酸质量比对改性效果的影响 不同的花青素与苹果酸质量比对改性黑枸杞花青素保留率的影响见图1。

图1 不同花青素与苹果酸质量比对黑枸杞花青素保留率的影响Fig.1 Effect of different mass ratio of anthocyanins to malic acid on retention ratios of anthocyanins

由图1可看出,当花青素与苹果酸质量比由1∶2增加到1∶3.5时,改性花青素保留率提高值逐渐增加,这是因为随着苹果酸含量的增加,有更多的花青素被苹果酸改性。当继续增大花青素与苹果酸质量比时,花青素保留率提高值逐渐降低,这可能是因为过多的苹果酸对改性花青素“三明治”构型具有一定的破坏作用,不利于花青素的改性[15]。花青素与苹果酸最优质量比为1∶3.5,保留率提高20.0%左右。

2.1.2 反应温度对改性效果影响 不同反应温度对改性黑枸杞花青素保留率的影响实验结果见图2。

图2 不同反应温度对花青素保留率的影响Fig.2 Effect of different reaction temperature on retention ratios of anthocyanins

由图2可知,随着反应温度的上升,酰化花青素提高保留率先增高后降低,在50 ℃的时候达到峰值。这可能是因为升高温度有利于花青素分子中的共轭体系破坏,游离的花青素单体更利于酰化改性。但超过50 ℃时提高保留率下降,可能由于花青素极易氧化分解,使酰化效果降低,同时可能高温下分子热运动加剧,相互碰撞剧烈,不利于改性。

2.1.3 搅拌时间对改性效果的影响 搅拌时间对酰化花青素保留率的影响实验结果见图3。

图3 搅拌时间对反应影响Fig.3 Effect of different stirring time

由图3可知,在酰化反应中,随着搅拌处理时间的延长,花青素提高保留率先增高后降低,在4.5 h的时候达到峰值。这可能是因为一定的反应时间水分子通过氢键与酰基形成稳定的络合物,有利于花青素改性反应的充分进行,但是热处理时间太长氢键受到一定破坏使酰化效果降低[28-29]。

由图1～图3可知,在三个单因素的实验中均选取了90 ℃加热3、5、7 h进行稳定性实验,均为加热3 h保留率的提高值最高,因此正交实验选取90 ℃加热3 h保留率为指标,有利于优化实验结果的比较。

2.2 酰化反应工艺的正交实验结果

酰化反应条件筛选的正交实验结果见表2。

表2 正交实验设计及结果分析Table 2 Orthogonal design and results

通过表2可以看出,影响花青素酰化的因素依次为:反应时间>反应温度>花青素与苹果酸质量比。正交实验花青素保留率提高率最高的实验组为A2B2C3(实验5)。极差分析得到的最佳工艺组合为A2B3C3,根据单因素实验结果可知温度过高,反应时间过长,酰化效果降低,实际生产中过高温度及较长反应时间会增加生产成本,增加生产操作的难度,综合考虑,选取A2B2C3为适宜的工艺组合,按此工艺条件进行酰化改性验证实验,多次重复实验得到提高保留率与正交实验结果吻合。因此适宜的酰化工艺为花青素与苹果酸比例为1∶3.5,在50 ℃搅拌5 h。

正交实验方差分析结果见表3。由表3可以看出,花青素与苹果酸比例、反应温度及时间3个因素对花青素的保留率均有显著影响(p<0.01)。

表3 正交实验结果方差分析和显著性检验Table 3 Analysis of variance and significance test for the experimental results of orthogonal design

注:**表示在0.01水平上差异显著,*表示在0.05水平上差异显著。

2.3 酰基化反应结果的光谱验证

2.3.1 黑果枸杞花青素的紫外可见光图谱 黑果枸杞花青素(A)和改性枸杞花青素(B)的紫外可见光扫描图谱见图4。

图4 黑果枸杞花青素(A)和改性枸杞花青素(B)的紫外扫描图谱Fig.4 UV-scanning illustrative plates of Lycium Ruthenicum anthocyanins(A)and modification Lycium Ruthenicum anthocyanins(B)

用紫外-可见光分光光度计在200～700 nm范围内扫描黑果枸杞花青素及改性黑果枸杞花青素溶液,观察在290～330 nm处是否出现吸收峰,如果出现吸收峰则证明花青素含有酰基[25]。由图1可见,未酰化黑果枸杞花青素在310 nm有吸收峰,酰化黑果枸杞花青素在309 nm有吸收峰,两者在290～330 nm范围均有吸收峰说明黑果枸杞花青素本身具有一定程度的酰基化,两者290～330 nm范围吸收峰位置有差别说明两种花青素分子酰基化程度有差异,改性黑枸杞花青素吸光值增高说明苹果酸改性之后花青素的酰化度更高。改性花青素在256 nm处亦有显著吸收峰,说明花青素的结构发生了变化,这说明采用苹果酸改性实现了黑枸杞花青素的酰基化。

2.3.2 黑果枸杞花青素的红外光谱 黑果枸杞花青素和改性枸杞花青素的红外光扫描图谱见图5。

图5 黑果枸杞花青素和改性黑果枸杞花青素的红外扫描图谱Fig.5 FT-IR spectrum of Lycium Ruthenicum anthocyanins and modification Lycium Ruthenicum anthocyanins

与未改性黑果枸杞花青素相比较,改性黑果枸杞花青素红外光谱图中有3个区域的吸收峰出现较明显的位置及强弱变化。第一个是在3500～3300 cm-1的范围内,未改性黑果枸杞花青素和改性黑果枸杞花青素出现缔合羟基吸收峰的波数分别为3336.44、3403.01 cm-1,改性后黑果枸花青素羟基伸缩振动吸收峰明显增强;第二个区域是1700～1600 cm-1范围内,该区域内改性黑果枸杞花青素与未改性黑果枸杞花青素峰值相比较,有明显波动增强,未改性黑果枸杞花青素和改性黑果枸杞花青素出现羰基振动峰的波数分别为1696.16、1714.11 cm-1,其在1714.11 cm-1处出现的吸收峰可能是羧酸的二缔合体。第三个区域是1278.22～1074.28 cm-1的C-O的特征振动区域,改性黑果枸杞花青素出现了5个吸收峰,而未改性黑果枸杞花青素只有4个吸收峰,其中1239.66 cm-1处的吸收峰为新增吸收峰,是由邻近C-O的偶合效应造成的,说明黑果枸杞花青素改性后引入了C-O。由此可说明黑果枸杞花青素改性后引入了苹果酸残基。关于相似峰与前人的研究报道一致[26-27]。

2.4 酰化花青素稳定性研究

2.4.1 酰化花青素热稳定性实验结果 酰化花青素的热稳定性实验结果见图6。

图6 优化条件下酰化花青素与未酰化花青素的热稳定性Fig.6 The thermal stability of acylated anthocyanin and non-acylated anthocyanin under optimized conditions

由图6可以看出,随着温度的上升酰化黑果枸杞花青素提高保留率逐渐增加,温度越高提高效果越明显。在pH3.5体系下,酰化的花青素溶液经过45、60、75、90 ℃热降解花青素的保留率分别平均提高4.5%、8.3%、14.1%、24.5%。以上结果表明,以苹果酸改性黑果枸杞花青素可以有效的提高花青素的热稳定性。

2.4.2 优化条件下酰化花青素与未酰化花青素的光稳定性比较 酰化花青素与未酰化花青素的光稳定性比较结果如图7所示。

图7 优化条件下酰化花青素与未酰化花青素的光稳定性Fig.7 The light stability of acylated anthocyanin and non-acylated anthocyanin under optimized conditions

由图7可以看出,在相同的光照条件下,酰化黑果枸杞花青素溶液样品的花青素保留率明显高于未酰化对照样品。在pH3.5体系下,与未酰化花青素相比,在室外自然光照射下经过10、15、20 d的照射,酰化花青素溶液中花青素的保留率分别提高15.21%、17.37%、17.30%。以上结果表明,以苹果酸改性黑果枸杞花青素可以有效的提高花青素的光稳定性。

2.5 黑果枸杞花青素热降解动力学

2.5.1 反应级数(n)确定 以花青素含量保留率对数的负值-ln(ρt/ρ0)为纵坐标(ρ0为开始加热时黑果枸杞花青素的含量,ρt为经过时间t后黑果枸杞花青素的含量)对加热时间t作图。为了排除因传热引起的误差,分别以45、60、75、90 ℃ 条件下花青素水浴3.0 h的含量为起始值,结果如图8、图9所示。分别进行线性回归,得回归方程和决定系数,可知-ln(ρt/ρ0)和t成明显线性关系,未改性黑果枸杞花青素在45、60、75、90 ℃条件下决定系数R2分别为0.9680、0.998、0.9600和0.9911;酰化黑果枸杞花青素在45、60、75、90 ℃条件下决定系数R2分别为0.9716、0.9875、0.9975和0.9873。由公式lnρ1=-k×t+lnρ0可知其反应级数均为1,即黑果枸杞花青素的热降解符合一级反应模型。

图8 未酰化花青素不同温度下加热时间对-ln(ρt/ρ0)的拟合方程Fig.8 Fitting equation of heating time on-ln(ρt/ρ0) at different temperatures of non-acylated anthocyanins

图9 酰化花青素不同温度下加热时间对-ln(ρt/ρ0)的拟合方程Fig.9 Fitting equation of heating time on-ln(ρt/ρ0)at different temperatures of acylated anthocyanins

2.5.2 黑果枸杞花青素热降解动力学参数的确定 由公式lnρ1=-k×t+lnρ0及图8、图9可知,其所得直线的斜率即为该温度时的热降解反应常数k。由公式k=k0exp(-Ea/RT)可得,根据不同温度时的k值,以lnk对1/T作线性回归。由直线的斜率-Ea/R和截距lnk0,即可求出活化能Ea和方程常数k0,具体参数如表4、表5所示。

表4 未酰化花青素热降解动力学参数Table 4 Kinetic parameters of non-acylated anthocyanin thermal degradation

表5 酰化黑果枸杞花青素热降解动力学参数Table 5 Kinetic parameters of acylated anthocyanin thermal degradation

2.5.3 黑果枸杞花青素热处理过程中含量变化的预测模型 根据黑果枸杞花青素在加热过程中含量的变化,由公式lnρ1=-kt+lnρ0、k=k0exp(-Ea/RT)可得:

lnρ1-lnρ0=-k×t=-k0exp(-Ea/RT)×t

式(1)

则:t=(lnρ0-lnρ1)/(k0×exp(-Ea/RT))

式(2)

将未酰化黑果枸杞花青素活化能Ea=6.17 kJ/mol、反应常数k0=3.765×10-1;酰化黑果枸杞花青素活化能Ea=5.70 kJ/mol、反应常数k0=2.640×10-1、R=8.314 J/(mol·K)带入可得:

未酰化花青素热降解的预测模型:t=(lnρ0-lnρ1)/(0.3765exp(-742.7/T))

酰化花青素热降解的预测模型:t=(lnρ0-lnρ1)/(0.2640×exp(-685.8/T))

2.5.4 动力学模型的验证 在80 ℃条件下应用热降解动力学模型分别预测未酰化黑果枸杞花青素和酰化黑果枸杞花青素的半衰期,结果为15.09、18.32 h。分别将定量的未酰化黑果枸杞花青素溶液和酰化黑果枸杞花青素溶液在80 ℃水浴加热,在第15 h和第18.5 h测定其花青素保留率为53.2%、48.7%,接近初始值的一半,表明热降解动力学模型和真实观测结果符合较好,即热降解动力学模型有效。

3 结论

以苹果酸为酰化剂,吡啶为催化剂,在酸性条件下酰化黑果枸杞花青素。采用正交实验,确定酰化黑果枸杞花青素的最佳工艺是花青素与苹果酸质量比为1∶3.5,50 ℃搅拌5 h。相同的加热及光照降解条件下,与非酰化黑果枸杞花青素相比,光稳定性增加17%。在pH3.5体系下,酰化的花青素溶液经过45、60、75、90 ℃热降解花青素的提高保留率分别为4.5%、8.3%、14.1%、24.5%。未酰化花青素和酰化花青素热降解的预测模型分别为:t=(lnρ0-lnρ1)/(0.3765×exp(-742.7/T));t=(lnρ0-lnρ1)/(0.2640×exp(-685.8/T))。本研究提供了一种黑果枸杞花青素改性方法,可以显著地提高其稳定性,不仅为黑果枸杞产品产业化提供共性技术,也为富含难溶性或敏感性生物活性物质的高端产品研究开发提供新思路及方法,在食品工业中具有较好的应用前景。

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StudyofimprovementonstabilityofanthocyaninmodifiedbymalicacidacylationfromLyciumruthenicum

GUMing-hui1,CHENHu1,LIXi-yu1,GAOQing-chao1,WANGShu-lin1,2,*

(1.Agriculture and Animal Husbandry College of Qinghai University,Xining 810016,China;2.State Key Laboratory of Plateau Ecology and Agriculture,Qinghai University,Xining 810016,China)

Due to the poor stability of natural anthocyanins fromlyciumruthenicum,its application in the food and medical industry is limited. In order to improve its stability,the anthocyanins oflyciumruthenicum were modified by malic acid. In the pH3.5 system,improving retention rate of acylated anthocyanin under 90 ℃ water bath was as the effect of indicators. The single factor experiment designs were used in order to investigate the effect of mass ratio of malic acid to anthocyanins,the stirring time and reaction temperature on acylation. The orthogonal experiment was used to optimize the acylation reaction conditions,and the results of acylation were proved by FT-IR spectrum and ultraviolet absorption spectroscopy. The photochemical and thermal stability of acylated anthocyanins were studied. Finally,the kinetic model of thermal degradation about the anthocyanin was constructed and verified. The optimization reaction conditions were gotten as follows. It is showed that the ratio of malic acid to anthocyanins was 1∶3.5,and stirring time was 5 h under 50 ℃. The retention rate oflyciumruthenicum anthocyanin was increased by 26.39%. The light stability of acylated anthocyanins was increased by 17% comparing to anthocyanins. Prediction model of thermal degradation is t=(lnρ0-lnρ1)/(0.3765exp(-742.7/T))for anthocyanins. Prediction model of thermal degradation of acylated anthocyanin is t=(lnρ0-lnρ1)/(0.2640exp(-685.8/T)). The half-lives of anthocyanin and acylated anthocyanin were 15.09 and 18.32 h,respectively,predicted by thermal degradation kinetics model at 80 ℃. The retention rates of anthocyanins were 53.2% and 48.7%,respectively,close to the half of prediction value predicted thermal degradation kinetics model. Experiments show that acylation by malic acid is practicable for improving stability of anthocyanin fromlyciumruthenicum.

acylation;lyciumruthenicum anthocyanins;malic acid;stability

2017-05-02

古明辉(1994-)，男，本科，研究方向：功能性食品，E-mail：904469878@qq.com。

*通讯作者:王树林(1970-)，男，博士，教授，研究方向：青藏高原特色食品资源开发,E-mail：wangsl1970@163.com。

TS255.1

A

1002-0306(2017)23-0058-07

10.13386/j.issn1002-0306.2017.23.013