丹栀逍遥散对肝郁血热型子宫内膜异位患者ER、PR、C-erbB-2表达的影响

田 颖，高晓俐，杨东艳，丛 萍 （陕西省中医医院妇科，陕西西安710003）

丹栀逍遥散对肝郁血热型子宫内膜异位患者ER、PR、C-erbB-2表达的影响

田 颖，高晓俐，杨东艳，丛 萍 （陕西省中医医院妇科，陕西西安710003）

目的：探讨丹栀逍遥散治疗肝郁血热型子宫内膜异位患者，对其雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）及与 C-erbB-2基因表达的相关性研究．方法：选取2015-02／2016-09陕西省中医医院收治的63例子宫内膜异位患者作为研究对象，根据中医辨证诊断归属为肝郁血热型，将其随机分为对照组（n＝31）和观察组（n＝32），对照组患者采取常规西医达那唑胶囊治疗，观察组患者则在对照组常规西医治疗的基础上加用丹栀逍遥散进行治疗，两组患者均以治疗4个月为观察期．观察两组患者以免疫组化法检测子宫组织中ER、PR、C-erbB-2基因的表达．结果：经过4个月的治疗，观察组患者的 ER、PR 阳性表达率为 87．50%、81．25%、均高于对照组的77．42%、70．97%；而观察组的 C-erbB-2 阳性表达率（43．75%）则低于对照组，差异有统计学意义（P＜0．05）；两组患者的ER、PR、C-erbB-2阳性表达比较，差异无统计学意义（P＞0．05）；其中观察组患者①ER的阳性表达与患者年龄≤40、月经量少、疾病Ⅰ期有关；②PR阳性表达与月经量少、异位囊肿包块有关；③C-erbB-2阳性表达与月经量少、疾病Ⅲ～Ⅳ期、异位囊肿包块有关．结论：丹栀逍遥散治疗肝郁血热型子宫内膜异位患者，能够影响ER、PR及C-erbB-2的表达变化，对治疗起到积极的临床指导作用．

丹栀逍遥散；肝郁血热；子宫内膜异位；ER；PR；C-erbB-2

0 引言

子宫内膜异位症（endometriosis，EMT）在妇科疾病中较为常见［1］，其是由于子宫内膜组织在宫腔以外的位置生长而引起的疾病．有病理实验研究［2］表明，这种内膜组织不但存在内膜腺体，并且包含内膜间质，所以当激素水平变化时其组织功能也发生改变，例如引起月经量较少、尿频、尿急等临床表现．子宫内膜异位具有一定的蔓延性，其细胞组织可扩展到子宫肌地、盆腔，甚至更远的器官进行浸润和植入．根据近年来的相关报道［3］，EMT的发病率约为10%，且以30～40岁的女性居多．患者临床症状主要表现为疼痛不适、月经失调及不孕症，对于女性患者尤其是年轻女性的生活影响十分严重．在我国，每年有超过10万女性被诊断为子宫内膜癌，由于对相关检测指标的有效筛查，有近70%的患者在诊断时就已经属于癌症晚期，死亡率极高．国内外调查研究［4］显示，子宫内膜异位是子宫内膜癌的高风险因素，并与ER、PR、C-erbB-2在子宫内膜的表达水平密切相关．临床治疗常用以促性腺激素释放激素激动剂为代表的西药进行治疗，通过使异位的内膜组织萎缩而达到治疗目的，但是对患者的肝脏器官会造成严重的慢性损伤，并不利于患者长期应用．祖国医学则认为该症属于“痛经”和“不孕”的病证，应以补肝益肾、活血化瘀为治疗原则，辨明本证、分证论治．所以，在治疗子宫内膜异位症的研究中，探讨新的治疗方案并联合检测相关的激素受体与基因表达对于诊治EMT极其必要．

1 资料和方法

1．1 一般资料 选取2015-02／2016-09陕西省中医医院收治的子宫内膜异位患者63例，根据使用的药物不同，将其随机分为对照组（n＝31）和观察组（n＝32），对照组选择西药达那唑治疗，患者年龄28～57（平均37．21±4．23）岁，其中疾病分级Ⅰ期10 例，Ⅱ期9例，Ⅲ～Ⅳ期12例，月经量少者23例，月经量多者8例，异位囊肿包块17例；观察组患者则在对照组治疗基础上服用丹栀逍遥散，患者年龄31～58（平均41．74±6．52）岁，其中疾病分级Ⅰ期 14 例，Ⅱ期 8 例，Ⅲ～Ⅳ期10例，月经量少者17例，月经量多者15例，异位囊肿包块19例．两组患者的年龄、疾病分级、月经情况等基本临床资料比较，差异无统计学意义（P＞0．05），具有可比性．

1．2 纳入标准 ①患者有月经不调、不孕病史，主诉痛经、性交时疼痛等；②妇科内诊检查压痛感明显，宫内可触球状物增多；③阴式超声可见子宫壁增厚，肌壁间回声异常，或腹腔镜检查病变部位有血管增生组织、白色突起褶皱明显；④中医诊断：舌色红伴瘀点，苔薄黄白，脉弦数；⑤入选病例研究经过陕西省中医医院伦理委员会批准［5］．

1．3 排除标准 ①近1个月内使用过激素类药物患者；②患者合并严重肝肾功能不全、精神疾病；③患者曾有阴道不规则出血及乳腺疾病．

1．4 方法

1．4．1 治疗方法 对照组采用达那唑胶囊（杭州民生药业有限责任公司生产；批准文号：国药准字H33022461；生产批号：141123、150108；规格：0．1 g／粒）进行治疗，4～8粒／d，分三次服用，连续使用3～6个月．观察组加用丹栀逍遥散，主要成分为白术、柴胡、当归、茯苓、甘草、牡丹皮、丹皮、山栀、芍药，1剂／d，分三次餐前服用，症状消失改每月经期将至时服用4剂，至少连服3个周期．

1．4．2 检测方法 采用免疫组化法进行检测，其中ER／PR／C-erbB-2检验试剂盒（鼠单抗）（LOP1010）、荧光素酶底物显色剂（LOP1102）试剂盒均采购于艾伯森北京生物科技有限公司．待测标本以10%的福尔马林试液浸泡后，用石蜡固定，以厚切片脱蜡膜，进行免疫组化和荧光染色，并记录分析结果．

1．5 结果判定 切片组织可见细胞核内有棕黄色颗粒视为ER、PR阳性表达结果；细胞浆与细胞膜显棕黄色为C-erbB-2阳性表达．其中阳性细胞表达数＜5%为阴性，处于6%～50%属于阳性表达．

1．6 统计学处理 采用SPSS20．0统计学软件对数据进行分析，其中计数资料以%表示，采用χ2检验，临床资料与阳性表达率关系以Fisher精准概率分析，P＜0．05表示差异有统计学意义．

2 结果

2．1 两组患者治疗前后ER、PR、C-erbB-2的阳性表达情况比较 经过4个月的治疗后，两组患者ER、PR、C-erbB-2阳性表达率均有所升高，其中观察组较对照度升高程度更为明显，差异有统计学意义（P＜0．05，表 1）．

表1 两组患者治疗前后ER、PR、C-erbB-2水平的阳性表达情况比较 ［n（%）］

2．2 两组患者的临床资料在ER、PR、C-erbB-2中的阳性表达情况比较 ER、PR、C-erbB-2在两组患者的相关临床资料中的阳性表达情况比较，差异无统计学意义（P＞0．05）；ER 的阳性表达与患者年龄≤40、月经量少、疾病Ⅰ期有关；PR阳性表达与月经量少、异位囊肿包块有关；C-erbB-2阳性表达与月经量少、疾病Ⅲ～Ⅳ期、异位囊肿包块有关（表2～4）．

表2 ER在患者临床资料中的阳性表达情况比较［n（%）］

表3 C-erbB-2在患者临床资料的阳性表达情况比较［n（%）］

表4 PR在患者临床资料的阳性表达情况研究 ［n（%）］

3 讨论

EMT在育龄女性中的发病情况较为普遍，尤其是多次人工流产、剖宫产的女性发病率较高［6-7］．其属于一种易反复发作且激素依赖性的妇科疾病．根据相关文献［7］记载，子宫内膜异位症在治疗后2年内复发率＞21%，5年内的复发率则达到50%，其中不孕症女性的发病率＞35%，这对女性患者的生活、健康影响颇为严重．临床研究［8-9］发现，引起子宫内膜异位的因素与经期疾病、多次妊娠、生殖器官异常有关，另有报道称，社会压力过大、自身免疫力低下也是导致该病的诱因．针对子宫内膜异位症的治疗，不仅可以治愈女性患者身体，而且也可以降低女性患不孕症的风险，对女性的心理健康及其家庭都有积极的意义．经过近几年医学专家们的不断努力，发现雌、孕激素受体在EMT中有重要的地位［10-11］．本研究中，患者在治疗后ER、PR水平均有提高，其中观察组阳性表达率明显高于对照组（P＜0．05）．作为生长因子受体家族基因的C-erbB-2在正位的子宫内膜中一般没有表达或者表达率低［12-13］，如果 C-erbB-2表达率超过阳性则提示患病有癌变的风险．西药在治疗子宫内膜异位时通常使用促性腺激素释放激素激动剂，长期应用此类药物可导致骨质疏松症等严重不良反应，而在中医治疗领域可以通过辩证治疗，减少副反应的伤害，采用对症治疗的中药不失为一种有效的尝试．本研究选用的丹栀逍遥散是历经百年的经典方剂，特别针对肝郁血热型患者已经证实有明确的治疗效果，对患者因肝气郁结、邪热入血所致的子宫内膜症，通过疏肝理气、行气活血缓解疼痛等不适症状，改善月经异常情况，使异位的内膜逐渐回归本位，从而使激素水平恢复正常［14-15］．本研究也对患者的临床数据进行了相关阳性表达的分析，结果显示患者的年龄、月经情况、疾病分期、异位囊肿包块等与ER、PR、C-erbB-2中的阳性表达相关．

本研究结果表明，中药制剂丹栀逍遥散对治疗肝郁血热型子宫内膜异位患者有确切的疗效，同时也证实了ER、PR与C-erbB-2的表达在该病中有重要的提示作用，因此我们建议在诊治EMT时，同时检测ER、PR与C-erbB-2水平，经过辨证确诊后可以采用中药制剂共同治疗，是具有临床应用价值的治疗方案．

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Effect of Danzhi Xiaoyao powder on the expression ofER，PR and C-erbB-2in patients with endometriosis of liver depression and blood heat type

TIAN Ying， GAO Xiao-Li， YANG Dong-Yan， CONG Ping
Department of Gynecology，Shaanxi Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine， Xi'an 710003， China

AIM： To investigate the effects of Danzhi Xiaoyao powder on the expression of estrogen receptor（ER），progesterone receptor（PR） and C-erbB-2 gene in patients with endometriosis of liver depression and blood heat type．METHODS： A total of 63 patients with endometriosis admitted into Shaanxi Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine from February 2015 to September 2016 were chosen as the research object．They were randomly divided into control group（n＝31） and observation group（n＝32） according to the syndrome differentiation of liver depression and blood heat type．The control group was treated with conventional western medicine（danazol capsules）， while patients in the observation group were treated with Danzhi Xiaoyao power on the basis of conventional Western medicine of the control group．The two groups of patients were treated and observed for 4 months．The expression of ER， PR， C-erbB-2 in the uterus were detected by immunohistochemistry．RESULTS： After 4 months of treatment，the positive rate of ER and PR in the observation group was 87．50%and 81．25%respectively， which were higher than those of the control group （77．42%and 70．97%） ．The positive expression rate of C-erbB-2 in the observation group （43．75%）was lower than that of the control group，with a statistically significant difference （P＜0．05）．There were no statistically significant difference on the positive expression of ER， PR， C-erbB-2 between the two groups of patients（P＞0．05）．In the observation group，① the positive expression of ER were related to the age of patients（under 40 years old）， menstruation quantity（little） and the stage of disease（stageⅠ）．② The PR positive expression were related with menstrustion quantity （little） and ectopic cyst mass．③The positive expression of C-erbB-2 were related with menstrustion quantity（little），the stage of disease（stageⅢ～Ⅳ） and ectopic cyst mass．CONCLUSION： Danzhi Xiaoyao powder can affect the expression of ER，PR and C-erbB-2 in patients with endometriosis of liver depression and blood heat type，and play an active clinical role in treatment．

Danzhi Xiaoyao powder； liver depression and blood heat type；endometriosis；ER；PR；C-erbB-2

R711．71

A

2095-6894（2017）11-35-04

2017-01-10；接受日期：2017-02-03

陕西省重点研发计划项目（2017SF-239）

田 颖．硕士，主治医师．研究方向：中西医结合妇科．E-mail：33160079＠ qq．com