微生物分析仪法和纸片扩散法在细菌耐药表型检测中的应用价值探讨

侯新月 孟存仁

微生物分析仪法和纸片扩散法在细菌耐药表型检测中的应用价值探讨

侯新月 孟存仁

目的分析比较纸片扩散（K-B）法与微生物分析仪（Vitek）法在细菌耐药表型检测中的应用效果。方法选取肺炎克雷伯杆菌、大肠埃希菌及金黄色葡萄球菌各80株，分别应用K-B法与Vitek法进行细菌耐药表型检测。比较两种方法的检测结果。结果两种方法的超广谱β-内酰胺酶（extended-spectrum β-lactamase,ESBLs）和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（meticillin-resistantStaphylococcus aureus,MRSA）检出阳性率无统计学差异（P＞0.05），K-B法的红霉素耐药克林霉素诱导实验检测阳性率低于Vitek法检测阳性率（P＜0.05）。结论微生物分析仪法能够较快速地判断细菌的耐药表型，具有较高准确率和灵敏度。

纸片扩散法；微生物分析仪法；检测效果

作者单位：830011 乌鲁木齐，新疆维吾尔自治区第二济困医院检验科（侯新月）；8300542 乌鲁木齐，新疆医科大学第一附属医院医学检验中心（孟存仁）

细菌感染是影响人们身体健康的重要因素，随着各种抗生素药物的应用，细菌的耐药性问题也更加凸显，快速、准确地提供抗生素药敏结果，是保障临床合理应用抗生素药物的重要前提[1]。纸片扩散（K-B）法与微生物分析仪（Vitek）法是临床常用的细菌药物敏感性检测方法[2]，为了解这两种检测方法在细菌耐药表型检测中的应用效果，本文对其进行了如下探讨，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂 于2015年3月-2017年3月我院细菌室分离保存的大肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌以及金黄色葡萄球菌中各选取80株，并以将金黄色葡萄球菌ATCC29213与大肠杆菌ATCC25922作为质控菌。Vitek法：应用法国梅里埃公司所生产的VITEK 2 Compact微生物分析仪及配套检测板。常规K-B法：血培养基、M-H培养基、麦康凯培养基、药敏纸片。

1.2 方法 本研究所选菌株均分别应用K-B法和Vitek法对其细菌耐药表型进行检测。常规K-B法检测：（1）超广谱β-内酰胺酶（extended-spectrum β-lactamase,ESBLs）验证试验；（2）耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（meticillin-resistantStaphylococcus aureus,MRSA）检测；（3）红霉素耐药克林霉素诱导实验的具体方法均参照《全国临床检验操作规程》（第三版）[3]，其阳性判定标准参照相关文献[4-6]。

Vitek法：选取大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌，分别配置0.5 MCF的悬浊液，然后应用梅里埃Vitek-GN13检测板对大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌进行检测。金黄色葡萄球菌检测，配置同等浓度的金黄色葡萄球菌悬浊液后，应用梅里埃Vitek-GP67检测板进行药敏检测[7]。

1.3 观察指标 对两种检测方法的药敏实验结果进行记录，并比较这两种方法的ESBLs、MRSA以及克林霉素诱导阳性率。

1.4 统计学方法 数据应用SPSS 18.0进行分析，计数资料采用率（%）表示，组间比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同检测方法的ESBLs阳性率对比 Vitek法检测阳性率略高于K-B法，但组间差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

2.2 不同检测方法的MRSA阳性率比较 K-B法对金黄色葡萄球菌进行耐MRSA检测，阳性51株，检出率为63.75%；Vitek法检测阳性53株，检出率为67.50%。两组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

2.3 不同检测方法的克林霉素诱导阳性率比较 在克林霉素诱导实验中，K-B法的红霉素耐药克林霉素诱导实验检测阳性37株，检出率为46.25%。Vitek法检测阳性45株，检出率为56.25%。组间差异有统计学意义（P＜0.05）。

表1 不同检测方法的ESBLs阳性率对比

3 讨论

随着现代医疗水平的不断进步，抗生素药物在临床治疗中的应用也更加广泛，抗生素药物的应用极大地提高了临床治疗效果，但同时也会增强细菌耐药性，导致耐药菌产生，使得抗生素药物的应用也面临困境[8]。因此，细菌耐药表型检测具有非常重要的临床意义。

K-B法是临床进行细菌药物敏感性检测的常用方法，操作简单，费用低，使用灵活，但是该检测方法耗时长，影响因素多，难以达到检测标准[9]。随着微生物检测技术的不断进步，Vitek法在细菌药物敏感性测定中的应用受到较多关注，Vitek法能够对细菌的MSRA、诱导克林霉素耐药以及ESBLs等多种耐药表型进行检测和推断，与常规K-B法相比，Vitek法能够在较短的时间内获得药敏鉴定结果，检测速度快，且具有较高准确率和特异度，能够及时为临床提供药敏检测结果，具有较高应用价值[10]。

本研究中，通过对肺炎克雷伯杆菌、大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌分别应用K-B法与Vitek法进行ESBLs、MSRA等检测发现，两种方法的检测结果略有差异，可能与K-B法影响因素较多有关，从而对检测结果造成影响。比较红霉素耐药克林霉素诱导实验检测结果发现，K-B法检测阳性率为46.25%，Vitek法阳性率为56.25%，显著高于K-B法，说明Vitek法有助于提高克林霉素诱导实验阳性检出率，且该方法检测时间短，可加强应用。

总而言之，与传统K-B法相比，细菌耐药表型检测应用Vitek法更具有优势，能够为临床提供更为准确、可靠的药敏检验结果。

1 张丽红.重症监护病房细菌感染及耐药性现状调查.中国消毒学杂志,2013,30(10): 944-946.

2 李莉.微生物分析仪法与常规纸片扩散法在细菌耐药表型检测中的比较.氨基酸和生物资源,2014,36(2): 67-69.

3 中华人民共和国卫生部医政司．全国临床检验操作规程．第3版．南京: 东南大学出版社,2006: 759-762．

4 张健.两种检测产ESBLs肺炎克雷伯菌方法的比较.泰山医学院学报,2015,36(1): 30-32.

5 张丽丽.主动监测培养对于控制院内MRSA感染的效果.中国微生态学杂志,2014,26(6): 690-692.

6 王凤玲.金黄色葡萄球菌红霉素诱导克林霉素耐药性分析.国际检验医学杂志,2013,34(1): 100-101.

7 李玉栋.微生物分析仪法与常规纸片扩散法在细菌耐药表型检测中的比较.临床医药文献,2016,3(56): 15-17.

8 张文韬.灾难性的威胁: 抗生素耐药性.世界科学,2013(5):45-46.

9 花扣珍.药敏试验-纸片扩散法影响因素的探讨.实用医技杂志,2014(4): 400-4001.

10 娄立革.全自动微生物鉴定药敏分析仪的临床应用价值分析.中国医疗器械信息,2015(2Z): 90.

Application value of microbial analyzer and disk diffusion in detection of bacterial drug resistance phenotype

Xinyue HOU1,Cunren MENG2

1Department of Clinical Laboratory,Xinjiang Uygur Autonomous Region Second Hospital,Urumqi 830011,China;2Medical Examination Center of the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University,Urumqi 830054,China

ObjectiveTo compare and analyze the effect of K-B and Vitek in the detection of bacterial drug resistance phenotype.MethodsA total of 80 strains ofKlebsiella pneumoniae,Escherichia coliandStaphylococcus aureuswere selected.Bacterial resistance phenotype was detected by K-B and Vitek respectively.ResultsThe positive rates of extended-spectrum β-lactamase (ESBLs) and meticillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)in the two methods were not statistically different (P＞0.05).The positive rate of erythromycin resistant clindamycin induced by K-B was lower than that of Vitek (P＜0.05).ConclusionThe microbial analyzer can be used to determine the drug resistance phenotype of bacteria rapidly,and has higher accuracy and sensitivity.

K-B; Microbiological analyzer; Detection effect