基于断面色泽测定的条芩饮片分级研究

张建逵　李云静　孙智　王冰　康廷国

[摘要]通过测量30批条芩饮片断面色泽指标和黄芩苷含量，计算二者的相关性，筛选出能表征条芩内在质量的色泽指标，并以此为基础，建立一种新的条芩饮片等级划分方法。结果表明，同时满足ΔL≥-37，Δb≥45的条芩饮片，是为选装，其黄芩苷量一定≥200 mg·g-1；与上述2指标其中之一不符者，均为统货。研究表明指标ΔL和Δb能够同时表征饮片色泽和内在质量，能够准确简便并客观的划分条芩饮片等级。研究结果可为中药饮片的分级提供新的思路和参考。

[关键词]黄芩； 色泽； 饮片； 分级

[Abstract]By determination the section color and lustre indexes as well as the content of baicalin in 30 batches of Scutellariae Radix slices， calculate the correlation of these two， screen the color and lustre indexes which could represent their intrinsic quality， and establish a new grade classification method based on the results The results showed that samples met the conditions of △L≥-37， △b≥45 simultaneously were picked grade and the content of baicalin was of ≥200 mg·g-1 definitely； Samples inconsistent with any one of above conditions were general grade This research indicated that indexes of △L and △b could characterize both the color and luster of slice and intrinsic quality， so that could be used as the indexes to classify the grades of Scutellariae Radix slices accurately， easily and objectively The research results would provide new ideas and references for grade classification of traditional Chinese medicine slices.

[Key words]Scutellariae Radix； color； slice； grade classification

黃芩为我国传统、常用中药，来源于唇形科植物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi 的干燥根，具有清热燥湿、泻火解毒、止血安胎等功效。临床上常用于湿温、黄疸、泻痢、肺热咳嗽、痈肿疮毒、胎动不安等症[1]。现代药理研究表明，黄芩具有解热、抗炎、抗微生物、抗肿瘤、抗氧化等药理作用，对消化系统、心血管系统、神经系统等疾病具有一定的治疗作用。其主要有效成分为黄芩苷等黄酮类化合物[2]。目前市场上对黄芩的需求量逐年增加。

黄芩饮片的不同规格等级体现了其不同的内在质量，亦是实现药材市场按质论价、临床按效用量的重要依据。目前市售的黄芩饮片主要有条芩和枯芩2种商品规格，其中条芩多为栽培品，且大部分为统货，少部分分为选装和统货2个等级。这些分级方法没有考虑到外观性状与内在品质的相关性。缺乏相关实验数据及临床应用的支持，原有的分级标准已不适应黄芩饮片流通现状[3]。现急需将能反映药材内在质量的现代科学技术和方法与传统的中药材品质评价经验相结合，来划分条芩饮片的等级。

近年来，饮片的分级研究也是中药材方面的研究热点。特别是近5年来，国内外关于该方面的研究报道多篇，如丹参、厚朴、附子、红芪、白芍、天麻、石膏等 [410]。这些研究为中药饮片的规格等级的划分提供了思路和方法。尽管这些研究都采用了现代科学技术和方法，但由于多数未与传统的中药材质量中药材品质评价经验相结合，因此在技术操作上较为繁琐，因此并未在实际中得到广泛运用。如何运用现代科学技术建立饮片等级标准，量化并简化其操作过程，一直是饮片分级研究的难点。本研究基于条芩的色泽与其内在化学成分的相关性，来对条芩饮片进行分级，以期推进中药饮片规格等级的研究。

1材料

SC10型色差仪（深圳三恩驰科技有限公司），1100型高效液相色谱仪（美国Agilent公司），包括G1314A型VWD检测器，G1311A型四元泵。AT130 型柱温箱（大连中汇达科学仪器有限公司），KQ250 型超声清洗器（昆山超声仪器有限公司），FW100型高速万能粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司），011163型电子天平（沈阳龙腾电子有限公司），CP225D型电子天平（德国Sartorius公司）。

甲醇，色谱纯及分析纯，天津市科密欧化学试剂有限公司；乙醇和磷酸，分析纯，天津市科密欧化学试剂有限公司。水为纯净水，杭州娃哈哈集团有限公司。黄芩苷对照品，批号ZN1114LA13，上海源叶生物科技有限公司，纯度>98%。

在2014年10月—2016年10月，收集了30批次不同产地的黄芩饮片或药材（自采药材按2015年版《中国药典》一部方法加工成饮片），药材经辽宁中医药大学康廷国教授鉴定为唇形科植物黄芩S baicalensis根的干燥饮片，且均为条芩，根据相关参考文献，将片大、色黄者视为选装，余者视为统货。具体情况见表1。endprint

2方法与结果

21黄芩苷的含量测定

采用2015年版《中国药典》一部中黄芩【含量测定】项下的方法测定，色谱图见图1。

22色泽的测定[11]

测定的可选光源为D65；色彩空间为CIE，Lab；测量几何结构8°/d；侦测器为硅光电二极管；测量孔径Φ=4 mm；定位方式为光照定位和十字架定位；光源为LED蓝光激发。为减少不同仪器间产生的误差，故选定一张白纸为标准样品，测定的色度值为L=9385，a=-002，b=067。用标准样品的色度值分别与供试样品色度值作差，所得差值即為

该样品的色度值。每批样品随机筛选出30片横断面光滑平整的饮片进行色泽测定，并取其每批结果的平均值，计算即得。

上述指标中，L为颜色的明度。不同颜色明度不同，决定于照明的光源的强度和物体表面的反射系数。L=0指示为黑色，L=100指示为白色，ΔL=L样品-L标样。a为红色到绿色之间的位置a负值指示为绿色，正值时指示为红色，Δa=a样品-a标样。b为黄色到蓝色之间的位置，b负值指示为蓝色，正值时指示为黄色，Δb=b样品-b标样。E为颜色的总色差。E=（L2+a2+b2）1/2。

23结果

各指标测定结果见表2。应用SPSS160分析软件，对表2中的数据进行相关性分析[10]，结果表明，黄芩苷与ΔL 呈极显著性相关 （P<001），r=0892；与Δb呈极显著性相关 （P<001），r=0858。因此选择色泽ΔL，Δb值作为条芩饮片等级划分的外在依据。

231聚类分析以黄芩苷含量为指标，采用系统聚类分析方法，对30个样品进行聚类分析，结果表明，所有样品可按黄芩苷的含量不同，在阈值10处聚为2类，其中S4，S8，S21，S23，S25，S26，S27，S28，S29，S30聚为选装类，其余聚为统货类。2类样品黄

性状特征选装统货

ΔL-3930～-2208-5007～-3448

Δb4367～60673196～4753

黄芩苷/mg·g-120073～232909507～16661

芩苷质量分数分别为20073～23290，9507～16661 mg·g-1，证明所测样品质量存在一定差别。从30个样品中分别提取ΔL，Δb 2个指标的取值范围，见表3。

232ΔL等级划分界限的确定从聚类分析可以看出，ΔL取值范围选装和统货存在重叠，不能通过ΔL将选装和统货分开来，可按下式计算ΔL界限。DΔL=（T1D小+T2D大）/2=（-3930-3448）/2=-3689，式中T1D小为选装ΔL界限下限，T2D大为统货ΔL界限上限。

以ΔL为-3689为等级划分界限，将30个条芩样品划分成选装和统货，获得选装11个、统货19个。采用2独立样本t检验方法，对选装和统货黄芩苷含量进行统计分析，结果表明，仅以ΔL为条芩饮片标准，所得条芩饮片选装和统货之间黄芩苷含量具有极显著差异，P<001，因此ΔL可作为条芩饮片等级划分标准。

233Δb等级划分区间的确定从聚类分析结果可以看出，Δb取值范围选装和统货存在重叠，不能通过Δb将选装和统货分开来，可按下式计算Δb界限。DΔb=（T1D小+T2D大）/2=（4367+4753）/2=4560，式中T1D小为选装Δb界限下限，T2D大为统货Δb界限上限。

以Δb为4560为等级划分界限，将30个条芩样品划分成选装和统货，获得选装11个、统货19个。采用两独立样本t检验方法，对选装和统货黄芩苷含量进行统计分析，结果表明，仅以Δb为条芩饮片标准，所得条芩饮片选装和统货之间黄芩苷含量具有极显著差异，P<001，因此Δb可作为条芩饮片等级划分标准。

234条芩饮片等级划分时各指标取值范围的确定根据上述分析结果，为方便操作，提高标准的可执行性，结合2015年版《中国药典》一部之标准，对各指标取值范围进行调整，结果见表4。

235不同等级条芩饮片的最终划分结果按表4中性状特征修正后的取值范围，将同时符合选装要求的2个连续型变量形状特征的饮片划分为选装，其余为统货。共筛选出S4，S8，S23，S25，S27，S28，S29，S30等选装8个，统货22个。采用独立样本t检验方法，对上述条芩饮片选装和统货黄芩苷含量进行统计学比较，结果表明，条芩饮片选装和统货样品黄芩苷含量存在极显著差异（P<001）。说明该等级划分法法合理，可通过饮片断面色泽反映饮片的内在质量。

3讨论

传统的中药品质评价多采用“辨状论质”的方法，即根据药材外观性状所表现出来的特点来鉴别其真伪优劣[12]。如黄芩以“色黄者为佳”[13]。本实验的结果表明，条芩饮片断面越亮，颜色越黄，其黄芩苷含量越高。这与黄芩的传统鉴别经验相符，其原因可能与黄芩苷等黄酮类化合物是黄色结晶状物质有关。

由实验结果可知，原先被认定为统货的样品，其黄芩苷含量仍然存在较大差异，重新分级后，部分含量高的样品被归为选装，使得这种差异有所减小；除原先被认定的选装样品外，另有3个原先被认定为统货的样品被划分为选装。这充分体现了本实验依据色泽指标与黄芩苷含量相关性划分等级的科学性与合理性。

目前用于检测黄芩质量的指标性成分较多，如黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、千层纸素A等[14]。但用于分级的指标性成分应该能代表样品的内在质量，最好是法定质量标准中所选的指标，黄芩苷为2015年版《中国药典》一部中规定检测的指标，基于此，条芩的等级划分选择了黄芩苷作为指标成分。此外，此外，用于分级等级的样品，其前提条件是合格样品，本实验所用样品均按照2015年版《中国药典》一部中之规定进行了检测，均符合相关要求。

目前市售的黄芩饮片主要有条芩和枯芩2种商品规格，枯芩断面中间呈暗棕色或棕黑色，枯朽状或已成空洞，不易测其色泽，且枯芩一般不分等级，因此本实验未对其分级进行研究。endprint

邓哲等建立了基于质量常数的黄芩饮片等级评价方法[15]，与之相比，本实验建立的方法更易操作，又避免了复杂的计算，更易于推广，还为黄芩药材质量评价提供了新的量化指标，可供其他中药饮片等级的划分提供参考。

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[责任编辑孔晶晶]endprint