2017年苏州市规模猪场猪伪狂犬病血清学调查

顾津僮 盛水兴 何文峰 徐嘉萍

(江苏省苏州市动物疫病预防控制中心,江苏苏州 215125)

2017年苏州市规模猪场猪伪狂犬病血清学调查

顾津僮 盛水兴 何文峰 徐嘉萍

(江苏省苏州市动物疫病预防控制中心,江苏苏州 215125)

为了解我苏州地区猪伪狂犬病的野毒感染情况,对苏州市3个市(区)的15家自繁自养规模猪场共971份猪血清样品进行了猪伪狂犬病gB抗体和gE抗体的监测与分析,结果显示:971份样品中,伪狂犬gE抗体阳性497份,gE抗体阳性率为51.15%,其中生产母猪样品394份,伪狂犬gE抗体阳性率为63.2%;公猪样品130份,伪狂犬gE抗体阳性率为46.92%。结果显示,苏州地区中存在猪伪狂犬病痛毒感染,且某些猪场猪伪狂犬病病毒的感染率较高。

猪伪狂犬病;血清学调查;净化

猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）引起的猪的急性传染病。该病在猪呈爆发性流行。引起妊娠母猪流产、死胎，公猪不育，新生仔猪的大量死亡，育肥猪呼吸困难、生长停滞等，是危害全球养猪业的重大传染病之一[1]。伪狂犬病毒在全世界广泛分布，伪狂犬病自然发生于猪、牛、绵羊、犬和猫，另外，多种野生动物、肉食动物也易感。我国将其列为二类动物疫病。2006～2007年度，猪伪狂犬病在全国大范围的传播流行，使猪病的感染流行复杂化；2011年以来，猪伪狂犬变异株在全国多地区流行，造成了严重的经济损失。

疫苗接种是预防和控制伪狂犬病的根本措施。目前我国普遍使用的是伪狂犬病病毒gE基因缺失疫苗，且使用伪狂犬病毒gE抗体ELISA检测试剂盒能够检测猪群中的伪狂犬野毒感染猪[2]。为了解我市猪伪狂犬的免疫和野毒感染情况，2017年2月至6月，对我市部分地区的18个自繁自养规模猪场进行伪狂犬病抗体监测，希望能为我市伪狂犬病的防控和净化提供科学依据。

1 材料和方法

1.1 样品来源

2017年2月-2017年6月，采自苏州市常熟市、太仓市、吴江区共18家自繁自养规模猪场的971份猪血清样品。其中有15家猪场均免疫猪伪狂犬gE基因缺失疫苗，有3家猪场未免疫猪伪狂犬疫苗。

1.2 检测试剂

美国IDEXX公司生产的伪狂犬gB抗体检测试剂盒，批号：HM634、LM951、CN405；美国IDEXX公司生产的伪狂犬gE抗体检测试剂盒，批号：KM818、AN178、CN428。

1.3 试验仪器

微量移液器、微量振荡仪、洗板机、酶标仪等。

1.4 方法步骤

采取ELISA方法检测：1取出抗原包被板，在每孔中加入50µl样品稀释液，在相应的孔中加入50µl阴性对照、阳性对照和待检样品，充分混匀，阴、阳性对照各两孔，在室温下孵育60in；2用300ul洗涤液洗板5次，在吸水材料上拍干后，每孔加入100µl酶标抗体，在室温下孵育20min；3再用300µl洗涤液洗板5次，在吸水材料上拍干后，每孔加入100µlTMD底物溶液，在室温下避光孵育15min；4每孔加入50µl终止液终止反应；5酶标仪调至650nm波长，读取对照及样品的OD值。

1.5 结果判定

S/N=样品OD值/阴性对照OD值。S/N值小于等于0.6判定为抗体阳性，S/N值大于0.7判定为抗体阴性，S/N值大于0.6同时小于等于0.7的判定为可疑。

2 结果

（1）对18个自繁自养的规模猪场伪狂犬疫苗免疫情况进行统计，15个场使用了伪狂犬疫苗，占采样场数的83.33%。疫苗免疫场共采集样品864份，其中PRV gB抗体阳性数686份，阳性率79.40%，PRV gE抗体阳性数446份，阳性率51.62%。3个未免疫场共采集样品107份，PRV gB抗体阳性数65份，阳性率60.75%；PRV gE抗体阳性数51份，阳性率47.66%。（见表1、表2）

（2）本次调查的18个猪场伪狂犬野毒感染场达100%，其中PRV gE抗体阳性率大于10%的场（高风险场）有17个，占94.44%；PRV gE抗体阳性率达到100%的场有3个，占16.66%。

表1 免疫猪场伪狂犬病gB抗体和gE抗体检测结果

（3）本次调查按照生产母猪、公猪、后备母猪、育肥猪分别进行了统计（见表3）：生产母猪样品共394份，PRV gB抗体阳性数364份，阳性率92.39%；PRV gE抗体阳性数249份，阳性率63.2%。公猪样品共130份，PRV gB抗体阳性数110份，阳性率84.62%；PRV gE抗体阳性数61份，阳性率46.92%。后备母猪样品共195份，PRV gB抗体阳性数146份，阳性率74.87%；PRV gE抗体阳性数95份，阳性率48.72%。育肥猪样品共252份，PRV gB抗体阳性数135份，阳性率77.34%；PRV gE抗体阳性数92份，阳性率36.51%。

（4）据统计，公猪样品采自17个猪场，16个场被检出PRV gE抗体，公猪野毒感染场占94.12%；生产母猪样品采自17个猪场，17个场均检出PRV gE抗体，生产母猪野毒感染场达100%；后备母猪样品采自13个猪场，8个场检出PRV gE抗体，后备母猪野毒感染场占61.54%；育肥猪样品采自15个猪场，8个场检出PRVgE抗体，育肥猪野毒感染场占53.33%。

表2 未免疫猪场伪狂犬病gB抗体和gE抗体检测结果

表3 不同猪群伪狂犬gB抗体和gE抗体检测结果

3 分析与讨论

（1）本次调查显示，苏州市部分地区猪伪狂犬野毒感染很严重，感染率达51.18%，调查的18个猪场均有不同程度的野毒感染，且这18个猪场分布于3个市（区），说明伪狂犬病毒的感染在我市分布较为广泛。根据调查，这18个猪场中有2个猪场表示曾确诊过猪伪狂犬病，其他猪场均未曾确诊相关病例；但据统计这些场的平均死胎流产等繁殖障碍率为2.69%，平均仔猪早期死亡率为7.69%，说明大多数猪场呈隐形感染状态。综上调查，笔者认为本地区开展伪狂犬防控和净化措施已迫在眉睫。

（2）调查显示我市伪狂犬病免疫效果层次不齐，未免疫场占本次调查的16.67%，免疫场中多数场存在免疫程序不规范、疫苗接种形式单一、疫苗选择不科学等问题。因此，加强伪狂犬病疫苗免疫是防控伪狂犬病的首要任务：选择质量稳定的疫苗，灭活苗和弱毒苗科学使用；根据当地流行状况和疫苗厂家的推荐，指定符合各猪场切实有效的免疫程序，不要盲目、片面的免疫；加强仔猪和育肥猪的免疫，采用滴鼻+肌注的形式免疫接种。

（3）本次调查的18个猪场的野毒感染率非常高，很大程度上是因为公猪和生产母猪野毒感染非常严重引起的，公猪和生产母猪的PRV gE抗体阳性率分别达到46.92%和63.2%。由于规模养殖场一般都是采取“自繁自养”方式，若种猪感染伪狂犬病则该病将在养殖场内持续存在[3]，做好种猪PRV野毒抗体检测，及时清除带毒猪，加快培育健康优质的后备猪群，并结合进行免疫抗体的监测和评估，对伪狂犬病的控制和净化至关重要[4]。

（4）本次试验同时对伪狂犬gB抗体和gE抗体进行了检测，检测结果显示gB抗体阳性率为77.34%，但由于gE野毒抗体的阳性率也较高，因此本次伪狂犬gB抗体的检测结果并不能准确反映疫苗免疫效果的好坏，只能作为部分参考用。但笔者建议常规监测中仍应同步检测gB抗体与gE抗体，在净化工作中掌握好仔猪的母源抗体水平、野毒阴性猪的免疫抗体保护水平非常重要，免疫程序的制定也需要清楚免疫抗体的消长规律。

（5）伪狂犬病毒感染与猪场生物安全管理、区域病毒变异及猪群自身免疫水平相关[5]。良好的饲养管理水平，完善的生物安全措施，是净化伪狂犬病的必要条件。如猪场禁养犬猫，定期灭鼠、杀虫，定期对猪舍、场地、用具消毒，饲喂优质、新鲜饲料，对病死猪严格进行无害化处理等措施。

（6）《国家中长期动物疫病防治规划（2012-2020）》中已明确猪伪狂犬病的根除计划，我省也出台了多种政策来促进猪伪狂犬病的净化工作，各大科研机构对猪伪狂犬病的研究不断深入，再加上各猪场对猪伪狂犬病的净化意识逐渐提高。笔者相信伪狂犬病的形势会不断好转，很快达到净化标准。

[1]陆承平.兽医微生物学[M]. 北京：中国农业出版社，2001：411-483.

[2]杨文萍，顾真庆，孙海凤，等.伪狂犬病毒流行毒株的抗原性和血清中和特性分析[J].畜牧与兽医，2014，46（10）：11-14.

[3]王琼秋，李阿黑，苏宝昆，等.绿春县2003-2008年猪伪狂犬病血清流行病学调查[J].中国畜禽种业，2009，（3）：35-36.

[4]毕峻龙，杨培昌，肖俊，等.2009年-2003年云南省楚雄地区猪伪狂犬病血清流行病学调查和防控措施研究[J].动物医学进展，2015，36（4）：117-120.

[5]焦显芹，杜红喜，贺纪云，等.我国规模化猪场伪狂犬病野毒感染规律的调查[J].畜牧与兽医，2014，46（11）：92-96.

江苏省农业三新工程项目“生猪伪狂犬病综合净化技术”合同编号：SXGC[2016]084