盐酸小檗碱/蒙脱石复合散的初步药效学研究

孙 萌*，周长征

（1.济南护理职业学院，山东 济南 250102；2.山东中医药大学，山东 济南 250355）

・药物研究・

盐酸小檗碱/蒙脱石复合散的初步药效学研究

孙 萌1*，周长征2

（1.济南护理职业学院，山东 济南 250102；2.山东中医药大学，山东 济南 250355）

目的 对盐酸小檗碱/蒙脱石复合散进行初步药效学研究。方法 以大肠杆菌为菌种，稀释涂布平板法进行体外抑菌实验。结果 不同浓度盐酸小檗碱/蒙脱石复合散均对大肠杆菌有抑制作用。结论 复合散对大肠杆菌具有显著作用。

盐酸小檗碱/蒙脱石复合散；大肠杆菌；体外抑菌

1 实验仪器与试剂

1.1 试剂

营养肉汤（上海盛思生化科技有限公司）；琼脂（杭州天和微生物试剂有限公司）；盐酸小檗碱（纯度98%，陕西森弗高科实业有限公司）；医用蒙脱石（济南康众医药科技有限公司）；复合散（自制）；大肠杆菌（菌号：ATCC25922，山东省医学科学院）

1.2 仪器

超净工作台（上海申顺生物科技有限公司）；恒温培养箱（上海精密仪器厂）；恒温水浴锅（上海精宏实验设备有限公司）；恒温培养摇床（KYC-100C，南京密码科技有限公司）

2 实验方法与结果

2.1 试剂配制

营养肉汤培养基的制备：取肉汤18 g溶解于1000 mL蒸馏水中，再经121℃高压灭菌，冷却备用。

营养琼脂培养基的制备：取琼脂38 g溶解于1000 mL蒸馏水中，再经121℃高压灭菌，冷却备用。

2.2 大肠杆菌繁殖体悬液的制备[1-2]

以保存中心的菌种为第0代，后接种培养的菌种为第1代，培养第2代菌种，在此基础上培养第3代，以第3代菌种进行抑菌实验。

（1）冻干菌种的复苏

吸取营养肉汤培养基加入菌种管，使菌种均匀分散。

（2）菌种的接种传代

取（1）项中菌种接种到试管内，在37℃恒温箱中培养24 h，得第1代菌种，依次培养得第3代菌种。

（3）菌悬液的制备

测定第3代菌种的粗浓度，调整菌浓度为1.5×108 cfu/mL，用琼脂液稀释成1×104 cfu/mL菌悬液，振荡孵育24 h，在4℃下备用。

2.3 稀释涂布平板

（1）涂布操作方法

吸取0.1 mL菌液于琼脂平板上涂布，每个稀释度重复涂布三次。

（2）菌落计数

涂布的菌种在37 ℃下培养24 h后统计菌落数。

（3）对照菌悬液

取10支无菌试管，编号为1～10号，前9支中均加入0.9 mL琼脂培养液，在1号中加0.1 mL菌液，从1号中吸0.1 mL菌液加入第2管，依次稀释至第9管，得稀释度为10-1～10-9的菌液。取10-7菌液涂布平板，重复三次，在37℃下培养24 h，统计菌落数，得到1 mL菌液的菌落数为250×108个。

（4）抗菌药液抑菌效果

分别取盐酸小檗碱和复合散，配成8 mg/mL的溶液，为贮存液，然后稀释成4 mg/mL、2 mg/mL、1 mg/mL、0.5 mg/mL、0.25 mg/mL、0.125 mg/mL、0.0625 mg/mL不同浓度。按对照菌液方法稀释，取稀释度为10-7的菌液涂布，在37℃下培养24 h，见表1。

表1 不同浓度药液对大肠杆菌抑菌效果（n，%）

3 实验结果与讨论

当根据结果可知，当复合散浓度由1 mg/mL增到2 mg/mL时，对大肠杆菌的抑菌率由65.6%增加至72.4%，趋于平稳，可为最佳得抑菌浓度，盐酸小檗碱/蒙脱石复合散对大肠杆菌具有显著作用。

[1] 夏金兰,王 春,刘新星.抗菌剂及其抗菌机理.中南大学学报(自然科学版),2004,35(1):31-38.

[2] 林秀芸.十六角蒙脱石与制霉菌素治疗小儿霉菌性肠炎的比较[J].新药与临床,1995,4(5):279.

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B

ISSN.2095-8242.2017.056.11050.01

本文编辑：赵小龙

孙萌