暖宫七味丸对实验性肝郁证大鼠的影响

2017-11-11 05:53冯驰今任常胜韩雪梅麻春杰钱占红
临床医药文献杂志(电子版) 2017年56期
关键词:胸腺肝郁脾脏

冯驰今,任常胜,韩雪梅,麻春杰,钱占红*

(内蒙古医科大学,内蒙古 呼和浩特 010110)

暖宫七味丸对实验性肝郁证大鼠的影响

冯驰今,任常胜,韩雪梅,麻春杰,钱占红*

(内蒙古医科大学,内蒙古 呼和浩特 010110)

暖宫七味丸是我国传统蒙药,蒙药名:苏格木勒-7,其主要成分为白豆蔻、天冬、手掌参、沉香、肉豆蔻、黄精、丁香,是治疗心赫依病和肾赫依病常用良方。本文所述为暖宫七味丸对肝郁性大鼠模型进行蒙药肝郁,通过既定方案在实验过程中收集整理数据,进行统计方法,探讨和分析实验结果,从实验的角度验证暖宫七味丸对实验性肝郁证大鼠的治疗作用。

暖宫七味丸;肝郁证;血液流变学

1 实验材料和方法

1.1 实验材料

健康雄性SD大鼠60只,体重(240±30)g,实验开始前,将大鼠放置动物饲养室适应性喂养10d,以不含卵清蛋白的饲料喂养,大鼠自由进食饮水。暖宫七味丸:乌兰浩特中蒙制药有限公司生产,批号:国药准字Z15021785。柴胡舒肝丸:沈阳红药制药有限公司,批号:国药准字Z21020535。地西泮注射液:天津金耀药业有限公司生产,批号:国药准字H120209570.9%生理盐注射液:山东科伦药业有限公司生产,批号D140615051。血浆白介素Ⅱ(IL-2)试剂盒,购于呼和浩特市双志商贸有限公司肝素钠注射液:上海第一生化药业有限公司,批号:国药准字号H31022051,水合氯醛,国药集团化学试剂有限公司(批号:20150203)

1.2 实验方法

1.2.1 实验动物分组及给药方法

采用随机分组的原则[1],按体重随机分为6组,每组10只。分为A正常组、B模型组、C地西泮组、D柴胡舒肝丸组、E暖宫七味丸高剂量组、F暖宫七味丸低剂量组共6组。A组给予生理盐水10 ml/kg;

B组给予生理盐水10 ml/kg;C组地西泮注射液1 mg/kg;D柴胡疏肝丸组,每丸重9 g,每次1 g溶于3 ml蒸馏水中;E高剂量组30 g/kg,用3 ml蒸馏水配制成冲剂,相当于1 g生药;F低剂量组15 g/kg,用3 ml蒸馏水配制成冲剂,相当于0.5 g生药。C组为腹腔注射,每日一次。A、B、D、E、F组均灌胃给药,每日二次。

1.2.2 肝郁证模型的建立

采用“套枷锁法”,制成类似枷锁形的模具,套在大鼠颈部。模具影响大鼠日常理毛挠痒等动作,使其“郁怒而不得发”。在不影响其正常饮食、饮水的情况下,引起大鼠情志的改变,制造出肝郁证模型。造模大鼠戴模具21天。

1.2.3 动物模型成功确认

造模大鼠戴模具21天后,发现大鼠皮毛枯黄,眼睛眯小,有眼眵,甚至目赤,粪便干少,食欲不振,消瘦,爪甲青紫,尾部有鳞片出现。而未经造模的正常组大鼠毛发光泽,饮食量多,体重增加,目光有神,无眼眵,爪甲红润。

1.2.4 实验指标的测定

1.2.4.1 一般观察及体重变化

实验期间,观察大鼠的行为、情绪、日常状态。21天给药结束后,用鼠称称量各组大鼠体重。

1.2.4.2 糖水消耗实验

分别于实验前1天,实验第7、14、21天,每次实验的前一天各组大鼠开始禁水,禁水24 h后,给予1%的蔗糖水溶液,测定大鼠在1 h内的饮水量(每只大鼠单笼饲养)[2]。蔗糖水消耗实验可反映大鼠的反应性。

1.2.4.3 免疫器官称重

每只大鼠在处死之前用鼠称称其体重,处死大鼠后,立即剥离脾脏、胸腺,用滤纸吸去附带的血液,称重并记录,计算脾脏、胸腺指数。脾脏、胸腺指数的计算:脾脏指数=脾脏重量(mg)/大鼠体重(g),胸腺指数=胸腺重量(mg)/大鼠体重(g)。

1.2.4.4 血浆白细胞介素2(IL-2)的检测

以10%水合氯醛(0.3ml/100g)腹腔注射麻醉大鼠后,采用心脏取血法,取血4~5 ml,用离心机3000 rpm离心,分离血浆,用ELISA检测试剂盒测定血浆IL-2,具体步骤按试剂盒使用说明书操作。

1.3 数据统计分析

所有数据使用软件SPSS 13.0进行统计分析,计量资料统计以±s表示,方差分析进行统计处理,设定P<0.05为差异有显著性意义,P<0.01为差异有非常显著性意义。

2 结 果

2.1 一般观察及体重变化

模型组大鼠造模21天后,与正常组组大鼠相比,模型组大鼠毛发枯黄,眼睛眯小,目赤,倦怠食少,体重明显减轻(P<0.05)。与模型组相比较,柴胡舒肝丸组可明显缓解大鼠上述症状,体重增加,具有非常明显统计学差异(P<0.01)。地西泮组、暖宫七味丸高、低剂量组同样可以增加大鼠体重,具有统计学差异(P<0.05),但暖宫七味丸高剂量组效果优于低剂量组、地西泮组,与柴胡舒肝丸组疗效相当。

2.2 对糖水消耗的影响

第1天模型组与正常组相比较,模型组大鼠糖水消耗量明显降低,有非常明显的统计学差异(P<0.01),其他给药组与模型组比较,不具有统计差异(P>0.05),说明第1天各给药组大鼠糖水消耗量无明显改变。第7天、14天、21天模型组与正常组相比,糖水消耗量明显降低,模型组大鼠对奖赏的反应性降低(P<0.01)。地西泮组、柴胡舒肝丸组、暖宫七味丸高、低剂量组与模型组相比较,均具有非常显著的统计学差异(P<0.01),且随着7天、14天、21天的时间推移,各组大鼠糖水消耗量明显升高。

2.3 对免疫指标的影响

与正常组相比较,模型组大鼠胸腺指数、脾脏指数、以及IL-2均有不同程度降低。与模型组相比,地西泮组胸腺指数、脾脏指数均无明显改善,不具有统计学差异(P>0.05),对IL-2指标具有更明显改善作用(P<0.01)。柴胡疏肝丸组与模型组比较,胸腺指数、IL-2指标有明显改善(P<0.01),但对脾脏指数无明显改善,不具有统计学差异(P>0.05)。暖宫七味丸高、低剂量组均可明显改善大鼠的胸腺、脾脏指数、以及IL-2指标(P<0.01),且高剂量组效果优于低剂量组。

2.4 对血液流变学的影响

与正常组相比,模型组大鼠血浆粘度、红细胞压积、红细胞聚集指数明显增高,表明模型组大鼠血液流变学已经产生血瘀证改变。与模型组相比,地西泮组、柴胡疏肝丸组、暖宫七味丸高、低剂量组均可不同程度改善血液流变学各项指标,其中以柴胡疏肝丸组效果最为明显,血浆粘度、红细胞压积、红细胞聚集指数均有降低(P<0.01),具有非常明显的统计学差异。此外,暖宫七味丸高剂量组同样可明显改善大鼠的血浆粘度、红细胞压积(P<0.01),对红细胞聚集指数也有明显改善(P<0.05),效果与柴胡疏肝丸组最为相近。(见表1)

表1 肝郁证大鼠模型血液流变学( ±s,n=10)

表1 肝郁证大鼠模型血液流变学( ±s,n=10)

注:各组与模型组比较“*”代表P<0.05;“**”代表P<0.01

组别血浆粘度红细胞压积(L/L)红细胞聚集指数正常组1.50±0.139**47.56±4.22**7.40±0.43*模型组1.75±0.17755.42±3.688.31±0.72地西泮组1.53±0.133**49.59±3.53*7.45±0.83*柴胡疏肝丸1.48±0.132**45.64±3.00**7.33±0.38**暖宫七味丸高1.52±0.144**47.92±3.69**7.45±0.72*暖宫七味丸低1.58±0.107*49.82±4.08*7.54±0.57*

3 作用机制探讨

在本实验中,模型组大鼠由于受到模具的限制,身体不能正常活动,产生肝郁证状态,故IL-2指标明显下降,反应大鼠免疫机能的降低。而暖宫七味丸可显著改善IL-2的指标,与正常组大鼠指标相近,维持IL-2的正常水平,表明暖宫七味丸可提高机体的免疫能力,从而达到抗抑郁的目的[3]。胸腺与脾脏是机体内重要的两个免疫器官, 其功能与免疫密切相关, 胸腺指数与脾脏指数是反映机体免疫功能的重要指标,其指数的变化可以反映机体免疫功能的正常与否。在本实验结果中可以看出,模型组大鼠脾脏和胸腺的重量明显减轻,揭示了肝郁证大鼠免疫功能的下降。而暖宫七味丸可明显对抗上述改变,暖宫七味丸高、低剂量组均可增加肝郁证大鼠的脾脏和胸腺指数,从而说明暖宫七味丸可拮抗免疫器官重量的减轻,维持免疫机能的稳定。

[1] 苏秀兰.医学科研方法[M].北京:人民卫生出版社,2013,73.

[2] 严亨秀,任 昉,顾 健.柴胡疏肝散对实验性肝郁证大鼠的影响[J].中药药理与临床,2006,22(6):5-6.

[3] 李 聪,谢 鸣,赵荣华,等.肝郁-脾虚-肝郁脾虚不同证候模型大鼠血液流变学变及疏肝健脾方的作用[J].广州中医药大学学报,2014,31(2):234-238.

R749.4

A

ISSN.2095-8242.2017.056.11080.02

内蒙古科技厅应用计划项目(编号:kjt2sf15);内蒙古自然科学基金(编号:2016MS0818)

钱占红(1969-),女,山东省冠县人,硕士研究生,教授,研究方向:中蒙医经方理论、临床及实验研究

本文编辑:吴 卫

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