毛细支气管炎患儿检测外周血CXCR3及其配体的临床意义

何冬平 严华杰 董蔚

毛细支气管炎患儿检测外周血CXCR3及其配体的临床意义

何冬平 严华杰 董蔚

目的探讨毛细支气管炎患儿检测外周血CXCR3及其配体Mig、IP-10、I-TAC的临床意义。方法选择2016年6月—2017年5月在我院儿科诊断治疗的毛细支气管炎患儿60例为研究对象，另选择同期门诊健康体检的一般资料匹配的婴幼儿30例为对照组。毛细支气管炎患儿60例根据是否有过敏因素分为过敏亚组30例与无过敏亚组30例。外周血CXCR3检测采用流式细胞术，血清Mig、IP-10、I-TAC水平检测采用ELISA方法。结果毛细支气管炎患儿无论是否有过敏，CD4+ CD183+/ CD4+、CD8+ CD183+/ CD4+均高于对照组，差异有统计学意义（P＜0．05）；过敏亚组高于无过敏亚组，差异有统计学意义（P＜0．05）。毛细支气管炎患儿无论是否有过敏，外周血清Mig、IP-10、I-TAC水平均高于对照组，差异有统计学意义（P＜0．05）；过敏亚组I-TAC水平高于无过敏亚组，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论毛细支气管炎患儿检测外周血CXCR3及其配体水平升高，尤其有过敏因素的患儿升高更明显。

毛细支气管炎；CXC亚组趋化因子受体3；配体；Mig；IP-10；I-TAC

毛细支气管炎是一种主要由呼吸道合胞病毒感染引起的婴幼儿较常见的下呼吸道感染，仅见于2岁以下的婴幼儿，特别是1～6个月的小婴儿，病变主要发生在细小支气管，因此它属于特殊类型的肺炎，以喘憋、三凹征与喘鸣为主要临床特点[1-2]。临床病理主要表现为毛细支气管上皮细胞坏死与周围淋巴细胞浸润，粘膜下充血，水肿，腺体增生，粘液分泌增多[3-4]。毛细支气管狭窄甚至堵塞，出现通气与换气功能障碍。起病急，症状严重者可发生充血性心理衰竭，呼吸衰竭，缺氧性脑病以及水电解质紊乱。CXC亚组趋化因子受体3（CXCR3）高度表达在活化的T淋巴细胞上，是Th1细胞趋化因子受体，其配体与T淋巴细胞活化、前移密切相关[5]。CXCR3及配体在自身免疫性疾病、病毒感染、肿瘤等疾病的发生及发展过程中发挥重要的作用[6]。研究分析毛细支气管炎患儿检测外周血学CXCR3及其配体的临床意义，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2016年6月—2017年5月在我院儿科诊断治疗的毛细支气管炎患儿60例为研究对象，另选择同期门诊健康体检的一般资料匹配的婴幼儿30例为对照组。毛细支气管炎患儿60例根据是否有过敏因素分为过敏亚组30例与无过敏亚组30例。对照组男18例，女12例，平均月龄（14.6±3.3）个月。过敏亚组男20例，女10例，平均月龄（15.1±3.5）个月；无过敏亚组男18例，女12例，平均月龄（14.8±3.6）个月。过敏亚组纳入标准：符合毛细支气管炎诊断，2个月～2岁，有过敏因素，如过敏体质，曾有湿疹、过敏性鼻咽、一级亲属有过敏史、曾有食物或者药物过敏史。无过敏亚组纳入标准：符合毛细支气管炎诊断[7]，2个月～2岁，无过敏因素。对照组纳入标准：健康体检者，无过敏因素，无毛细支气管炎病史。排除标准：近期有其他疾病，近1个月接受免疫药物治疗。三组性别、平均月龄比较差异无统计学意义（P＞0.05）。研究患儿家长知情同意，并签署知情同意书；研究经过医院医学伦理委员会同意。

1.2 研究方法

采集空腹静脉血4 ml，2 ml抗凝后检测CXCR3表达，2 ml检测受体。外周血淋巴细胞表面CXCR3表达采用流式细胞术检测。需要试剂：鼠抗人CD4-FITC，鼠抗人CD8-FITC，鼠抗人CD183-PE，荧光标记阴性对照羊抗鼠IgG1-PE，IgG1-FITC，均有美国BD公司提供。上流式细胞仪检测，用软件分析数据。血清配体Mig、IP-10以及I-TAC检测采用ELISA方法，试剂由江苏普诺生生物科技有限公司提供。所有操作严格按照说明书进行。

1.3 分析方法

比较三组外周淋巴细胞CD4+淋巴细胞CD183+表达以及CD8+淋巴细胞CD183+表达率，比较三组血清中Mig、IP-10、I-TAC水平。

2 结果

2.1 三组外周血CD4+淋巴细胞CD183+表达以及CD8+淋巴细胞CD183+表达率

毛细支气管炎患儿无论是否有过敏，CD4+ CD183+/ CD4+、CD8+ CD183+/ CD4+均高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；过敏亚组高于无过敏亚组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 CD4+淋巴细胞CD183+表达以及CD8+淋巴细胞CD183+表达率（%）

2.2 三组患儿外周血清Mig、IP-10、I-TAC水平比较

毛细支气管炎患儿无论是否有过敏，外周血清Mig、IP-10、I-TAC水平均高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；过敏亚组I-TAC水平高于无过敏亚组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 三组患儿外周血清Mig、IP-10、I-TAC水平比较

3 讨论

支气管炎系指支气管发生炎症，小儿最常见且较严重的是毛细支气管炎，好发于冬季，可引起局部流行。毛细支气管炎的病变主要发生在肺部的细小支气管，也就是毛细支气管，所以病名为“毛细支气管炎”，通常是由普通感冒，流行性感冒等病毒性感染引起的并发症，也可能由细菌感染所致，是小儿常见的一种急性下呼吸道感染。毛细支气管炎的病原主要为呼吸道合胞病毒，可占80%或更多；其它依次为腺病毒、副流感病毒、鼻病毒、流感病毒等；少数病例可由肺炎支原体引起；感染病毒后，细小的毛细支气管充血，水肿，粘液分泌增多，加上坏死的粘膜上皮细胞脱落而堵塞管腔，导致肺气肿和肺不张[8-9]。炎症常可累及肺泡，肺泡壁和肺间质，故可以认为它是肺炎的一种特殊类型。典型的毛细支气管炎常发生在上呼吸道感染2～3 d后，出现持续性干咳和发热，体温以中、低度发热为常见，发作喘憋为其特点，病情以喘憋发生后的2～3 d较严重，喘憋发作时呼吸增快，可达每分钟60～80次以上，并伴有呼气延长和呼气性喘鸣；重症患儿表现出鼻煸和“三凹征”（即吸气时出现锁骨上窝，胸骨上窝及上腹部凹陷），脸色苍白，口周发青，或出现紫绀，患儿常烦躁不安，呻吟不止；病情更重的患儿可合并心力衰竭或呼吸衰竭，大部分病例治疗后均可缓解，极少发生死亡[10]。病理变化主要是毛细支气管上皮细胞坏死和周围淋巴细胞浸润，黏膜下充血，水肿和腺体增生，粘液分泌增多。毛细血管管腔狭窄甚至堵塞，出现通气和换气功能障碍。

CXCR3是G蛋白偶联的穿膜受体，基因定位在染色体Xq13，在体内多脏器病变是指细胞以及炎性细胞例如血管内皮细胞、活化淋巴细胞、树突状细胞、巨噬细胞等均有表达[11-12]。静止期T淋巴细胞、B淋巴细胞以及粒细胞上不表达或者基本不表达。Th1细胞可特征性表达CXCR3，其是活化Th1细胞的标志之一。CXCR3配体是ELR-CXC趋化因子，单核巨噬细胞、人成纤维细胞、淋巴细胞、肝实质细胞、内皮细胞、HL60细胞等可经IFN-γ诱导表达IFN-γ诱导性单核细胞因子（Mig），IFN-γ诱导性蛋白10（IP-10），IFN-γ诱导性T细胞α化学趋化因子（I-TAC）[13]。与T淋巴细胞活化、迁徙、浸润关系密切相关，并与CXCR3具有高选择性。CXCR3与其配体具有趋化功能，CD4+Th1细胞与效应CD8+T淋巴细胞表达CXCR3，活化Th1细胞受趋化因子Mig、IP-10、I-TAC的作用达到病变组织，分泌IFN-γ极化Th1细胞，并参与抗病毒、吞噬细胞活化过程，并诱导人成纤维细胞、单核巨噬细胞、内皮细胞、淋巴细胞、肝实质细胞等分泌相关趋化因子，招募更多的T淋巴细胞参与病变组织的免疫反应过程中[14-15]。CXCR3与其配体还参与不同免疫细胞的免疫功能，抑制血管的生成，参与损伤后的修复过程等。在病毒感染过程中，外周血干戈细胞以及组织内IP-10表达水平增高。CXCR3在活化的T淋巴细胞表面表达，提示CXCR3及配体可能参与了T淋巴细胞介导的抗感染免疫过程中。有研究显示，在乙肝患者炎症局部NK细胞、Th1细胞浸润，与CXCR3趋化的相关的靶细胞一致。CXCR3及其配体还参与自身免疫性疾病，具有抗肿瘤作用，参与移植免疫等。在本次研究中，毛细支气管炎患儿无论是否存在过敏因素，CXCR3与其配体表达水平均高于对照组，提示其参与了毛细支气管炎的发生发展过程。而有过敏因素的患儿CXCR3表达以及其配体I-TAC表达水平更高，提示其可能受过敏因素的影响。

综上所述，毛细支气管炎患儿检测外周血CXCR3及其配体水平升高，尤其有过敏因素的患儿升高更明显。

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Clinical Significance of Detecting CXCR3 and Its Ligand in Peripheral Blood of Children With Bronchiolitis

HE Dongping YAN Huajie DONG Wei Pediatrics Department, Nanxiang Hospital of Jiading District, Shanghai 201802, china

ObjectiveTo discuss the clinical significance of detecting CXCR3 and its ligand in peripheral blood of children with bronchiolitis.Methods60 cases with bronchiolitis from June 2016 to May 2017 were selected as objects, and 30 cases of matched infants were selected as control group. 60 cases with bronchiolitis were divided into 30 cases in allergic group and 30 cases in no allergic group according to whether with allergic factors. Peripheral blood CXCR3 was detected by flow cytometry, and serum Mig, IP-10 and I-TAC levels were detected by ELISA.ResultsChildren with bronchiolitis, whether or not they had allergies, CD4+ CD183+/ CD4+ 、CD8+ CD183+ / CD4+ were higher than those in the control group(P ＜ 0.05); The allergic group was significantly higher than the no allergic subgroup, which showed significant difference(P＜ 0.05). Children with bronchiolitis, whether or not they had allergies,peripheral serum Mig, IP-10, I-TAC were higher than those in the control group(P ＜ 0.05); I-TAC in the allergic group was significantly higher than the no allergic subgroup, which showed significant difference(P ＜ 0.05).ConclusionThe levels of CXCR3 and its ligands in peripheral blood of children with capillary bronchitis are significantly increased, especially in children with allergic factors.

bronchiolitis; CXCR3; ligand; Mig; IP-10; I-TAC

R563

A

1674-9316（2017）22-0038-03

10．3969/j．issn．1674-9316．2017．22．018

上海市嘉定区南翔医院儿科，上海 201802