荷叶总酚提取工艺研究

潘 熠

（四川大学华西药学院6班，四川 成都 610041）

荷叶总酚提取工艺研究

潘 熠

（四川大学华西药学院6班，四川 成都 610041）

目的建立荷叶总酚最佳提取工艺。方法 首先建立荷叶中总酚含量测定方法，然后采用L9（34）正交试验法，以提取溶剂、提取时间、提取次数及溶剂倍量为考察因素，每个因素考察三个水平，以荷叶中总酚提取率为评价指标，优化荷叶总酚提取方法。结果 谷荷叶总酚最佳提取工艺为：8倍量50%乙醇提取3次，每次1小时。结论 建立的提取工艺简便易行，稳定可靠，可为其进一步开发利用提供参考依据。

荷叶；总酚；正交试验；提取工艺

荷叶为睡莲科植物莲Nelumbo nucifera Gaertn.的干燥叶，具有清暑化湿，升发清阳，凉血止血，用于暑热烦渴，署湿泄泻，脾虚泄泻，便血崩漏。荷叶碳收涩化淤止血，用于产后出血和晕血。荷叶主要含生物碱、黄酮类、挥发油类等成分，其中生物碱类、黄酮类为其主要化学成分[1]。目前对荷叶的研究主要集中在生物碱类、黄酮类成分，而对其酚酸类物质研究还较少，研究表明，酚类成分具有显著的抗氧化活性，抑制高血压，抗肿瘤，还可改善血脂水平，降低脂肪酶活性[2-3]，本文对荷叶酚类成分最佳提取工艺进行研究，为其进一步开发利用提供参考依据。

1 仪器与试药

TU-1810 型紫外-可见分光光度计（北京普析通用仪器有限公司）；Sartorius-BT25S型1/100000电子分析天平；KQ-500DE型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

槲皮素（批号：YA0806YB13，纯度≥98%），购自上海源叶生物科技有限公司；

甲醇（AR，购自北京化学试剂公司）；三氯化铁（AR，天津市申泰化学试剂有限公司）；铁氰化钾（AR，广东汕头市西陇化工厂）；盐酸（AR，北京化工厂）；其余试剂均为分析纯。荷叶饮片购自北京同仁堂，经鉴定为睡莲科植物莲nelumbo nucifera Gaertn.的干燥叶。

2 方法与结果

2.1 荷叶总酚含量测定方法研究

2.1.1 供试品溶液的制备

取荷叶提取物适量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入100 mL70%甲醇，密塞，称定重量，超声（功率500W，频率40KHz）处理1 h，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，精密量取续滤液400 μL置10 mL棕色量瓶中，加70%甲醇至刻度，摇匀，即得。

2.1.2 对照品溶液的制备

取槲皮素对照品适量，精密称定，加70%甲醇制成每1 mL含12.6 μg的溶液，即得。

2.1.3 测定方法

精密量取供试品溶液0.6 mL，置25 mL棕色量瓶中，加70%甲醇至5 mL，加入0.3%十二烷基硫酸钠溶液2.6 mL，摇匀，加入新配制的0.6%三氯化铁-0.9%铁氰化钾（1:1）混合液2.0 mL，在暗处放置7min，用0.1%的盐酸稀释至25 mL，摇匀后于暗处静置40min，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法（《中国药典》四部通则0401）在780nm的波长处测定吸光度[4]。

2.2 正交试验设计

2.2.1 因素水平设计

结合实际生产并查阅相关文献，采用L9（34）正交实验设计，以总酚转移率为考察指标，考察提取次数、提取溶剂、提取次数及溶剂倍量，因素水平设计见表1。

表1 正交实验设计因素水平表（n）

2.2.2 样品制备

称取荷叶饮片适量，共9组，每组平行2份，共18份样品，按照正交设计表进行加热回流提取，浓缩干燥，称定重量，计算出膏率。

2.2.3 转移率测定实验结果分析

由表3分析可知，当以总酚为考察指标时，因素M水平2最佳，因素N水平3最佳，因素P水平3最佳，因素Q水平2最佳，结合实际生产，考虑节约成本，优选最佳提取工艺为M2N3P2Q2，即10倍量50%乙醇提取3次，每次1小时。

2.3 荷叶总酚提取工艺验证

2.3.1 荷叶总酚提取工艺流程

荷叶饮片

↓十倍量50%乙醇提取3次，每次一小时。

50%乙醇提取液

↓60℃减压浓缩，干燥。提取物

2.3.2 样品制备及含量测定

以最佳提取工艺制备三批提取物样品，计算出膏率，按照所建立的含量测定方法，测定提取总酚含量，结果见表2。

表2 提取工艺验证结果（n，%）

3 讨 论

荷叶总酚最佳提取工艺为：8倍量50%乙醇提取3次，每次1小时。三批验证结果表明建立的提取工艺简便易行，稳定可靠，可为其进一步开发利用提供参考依据。

[1] 刘慧娟,郑云展,陈燕霞,等.微波真空干制加工对荷叶茶酚类物质含量及其抗氧化活性的影响[J].食品科学技术学报,2016,34(3):40-45.

[2] 蔡为荣,周慧超.荷叶多酚提取优化及其清除DPPH·自由基的研究[J].食品工业科技,2009(12):186-189.

[3] 陈 曦,戚 进.荷叶中黄酮和生物碱的研究进展[J].中国实验方剂学杂志,2015(18):211-214.

[4] 潘 婷,黄亚婷,韩珂卿,等.基于药物体系质量评价模式的柴胡质量表征关联分析研究[J].世界中医药,2015(4):577-582.

R285

B

ISSN.2095-8242.2017.041.7936.02

本文编辑：王雨辰