百令胶囊对尿毒症腹膜透析患者腹透液中转化生长因子-β1、纤维连接蛋白表达的影响

姚素花，麦李明，石俊婷

百令胶囊对尿毒症腹膜透析患者腹透液中转化生长因子-β1、纤维连接蛋白表达的影响

姚素花，麦李明，石俊婷

目的研究百令胶囊对尿毒症腹膜透析患者腹透液中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)、纤维连接蛋白(fibronectin，FN)水平的影响。方法 将腹膜透析患者60例随机分为对照组和试验组(各30例)，均应用1.5%腹膜透析液、6 000 mL/d，试验组加用百令胶囊5粒、3/d、口服，观察1、3、6个月后2组腹透液中TGF-β1、FN水平的变化。结果 对照组TGF-β1、FN水平随透析时间延长逐渐升高；试验组TGF-β1、FN水平无明显变化，与对照组比较明显降低(P＜0.05)。结论 百令胶囊可以降低腹透液中TGF-β1、FN水平，能起到抑制腹膜纤维化的作用。

百令胶囊；腹膜透析；转化生长因子-β1；纤维连接蛋白；腹膜纤维化

腹膜透析是目前终末期肾脏病患者较为有效、经济的替代疗法之一，而腹膜纤维化是导致腹膜透析患者技术存活率偏低的主要原因[1]。其中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)过度表达、纤维连接蛋白(fibronectin，FN)的表达增多都是导致腹膜纤维化的可能机制。研究表明，冬虫夏草可通过抑制纤维细胞的增殖，减少细胞基质合成作用，延缓纤维化的发生，具有良好的抗纤维化作用[2]。百令胶囊为人工冬虫夏草，是由蝙蝠蛾多毛孢真菌经深层液体培养而成的发酵虫草菌丝体制剂，含虫草酸、虫草素、虫草多糖及多种维生素、微量元素、19种氨基酸多种化合物，作用效果与天然虫草类似[3]。作者以规律腹膜透析患者中TGF-β1及FN作为腹膜纤维化的标志，探讨百令胶囊在腹膜纤维化中的防治作用及可能机制。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选取2014年1月—2015年6月在中国石油天然气集团公司中心医院新行腹膜透析患者60例，年龄29～78岁。入选标准:①符合尿毒症诊断标准[内生肌酐清除率(endogenous creatinine clearancerate，Ccr)＜15 mL/min]，并行规律腹膜透析(1.5%腹膜透析液2 000 mL、3/d)；②之前未服用过血管紧张素转化酶抑制剂和(或)血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂类降压药物。入选者随机分成试验组和对照组(各30例)，均是应用1.5%腹膜透析液，6 000 mL/d[广州百特医疗用品有限公司、规格1.5%葡萄糖(含乳酸盐)每袋2 000 mL、批号G1038055]，其中试验组加用虫草制剂(百令胶囊)5粒、3/d、餐后口服(杭州中美华东制药有限公司、规格每粒0.5 g、批号140111)，对照组未服用任何虫草制剂。退出标准:①并发腹膜透析腹膜炎；②加用血管紧张素转化酶抑制剂和(或)血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂类降压药物。观察过程中共退出研究8例，其中试验组5例、对照组3例。对照组共纳入27例，男性11例、女性 16例，年龄(60.19±11.77)岁，血肌酐(786.42±146.54)μmol/L。 试验组纳入25例，男性11例、女性 14例，年龄(61.96±9.44)岁，血肌酐(777.26±161.25)μmol/L。2组一般资料差异无统计学意义(P＞0.05)，透析1个月后检测透析充分性均提示透析充分(表1)，具有可比性。

表1 透析1个月时2组透析充分性

1.2 方法 研究对象均在腹膜透析1个月时取24 h腹透液、24 h尿量测定透析充分性。于入选时及腹膜透析1、3、6个月后取腹透液样本置－20℃冰箱内冻存待测，统一用酶联免疫吸附测定方法检测腹透液中 TGF-β1、FN 水平。

1.3 统计学处理 应用SPSS 17.0软件，计量资料以均数±标准差(±s)表示，组间比较采用t检验；计数资料用率来表示，组间比较采用χ2检验；TGF-β1与FN之间的关系采用Pearson相关分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 TGF-β1、FN 水平 透析 1、3、6 个月后，对照组腹透液中TGF-β1、FN水平均逐渐升高，而试验组TGF-β1、FN水平无明显变化，2组比较差异有统计学意义(P＜0.05，表 2)。

2.2 FN与TGF-β1相关性 患者FN与TGF-β1呈正相关(r＝0.499，P＜0.05)。

表 2 TGF-β1、FN 水平(ng/mL)

3 讨论

腹膜透析因其操作简单、对血流动力学影响小、有效保护残余肾功能等优点，是目前终末期患者长期肾脏替代治疗的主要方法之一[4]；而腹膜纤维化是导致腹膜功能丧失的主要原因之一[5]。目前，国内的腹膜透析液因其生物不相容性，长期应用可导致腹膜间皮细胞受损后分泌大量的致纤维化因子，是腹膜纤维化的诱因[6]。因此，如何减少致纤维化因子表达，延缓腹膜纤维化极为重要。本研究主要通过观察百令胶囊对长期规律腹膜透析患者腹透液中TGF-β1、FN的表达变化，从而了解其对腹膜纤维化的防治作用。

本研究发现，长期应用非生理性腹膜透析液可使腹透液的TGF-β1、FN表达水平升高，且FN与TGF-β1呈正相关。长期应用非生理性腹膜透析液可增加腹膜细胞外基质(extracellular matrixc，ECM)中的TGF-β1表达水平，刺激ECM成分FN合成增加，减少降解，并产生大量纤维溶解抑制因子，使得纤维素在腹膜大量沉积，最终导致腹膜纤维化[7-11]。

冬虫夏草是我国名贵的中药，含有虫草素及其衍生物、虫草酸、多糖、核苷等多种化合物，其中虫草多糖约占菌丝体总量的3%～5%，是含量最高的药理活性物质，具有广泛的生理生化性质，其主要药理作用表现为抑制成纤维细胞的增殖生长及合成ECM，具有多种药效，其中对肝、肺、肾等器官的抗纤维化作用尤为明显，近年来被广泛研究[12-14]。然而，目前国内仅有动物实验研究其对腹膜透析中抗腹膜纤维化的作用[15]。本研究发现对长期腹膜透析患者应用百令胶囊干预1、3、6个月时，其腹透液中TGF-β1、FN表达水平均无明显升高，与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)，提示百令胶囊具有抑制腹膜纤维化形成的作用。

冬虫夏草抗纤维化的作用机制尚不明确。有研究报道，冬虫夏草抗肝纤维化可能与抑制脂质过氧化反应、减少细胞因子及生长因子表达有关[12]。通过抑制TGF-β1表达，调整Ⅰ型/Ⅱ型细胞因子平衡起到抗肺纤维化作用[13]。抑制TGF-β1表达，减少细胞增殖及ECM聚集，减轻炎症反应可能是其发挥抗肾间质纤维化的重要机制[14]。而其抗腹膜纤维化研究鲜见报道。本研究发现，抗腹膜纤维化可能与百令胶囊下调腹膜透析患者中TGF-β1表达、抑制FN合成、减少ECM的沉积有关。

本研究通过应用百令胶囊对长期腹膜透析患者的干预降低腹透液中TGF-β1的表达水平、抑制FN合成、减少ECM的沉积，改善腹膜组织中毛细血管的形成和腹膜渗透性，从而起到抑制腹膜纤维化的作用。目前，临床上对尿毒症已无残余肾功能的患者，应用虫草制剂保肾意义不大；但通过本研究发现，对于规律腹膜透析患者继续应用虫草制剂可延缓腹膜纤维化进展，为临床治疗提供一定的参考。但本研究样本量较少，观察时间相对较短，后续研究需增加样本量，延长观察时间，有待更为广泛、全面的研究予以证实。

[1]黄琳，庞捷，李锦山，等.百令胶囊联合尿毒康合剂对腹膜透析患者残余肾功能及微炎症状态的影响[J].陕西中医，2016，37(11):1477-1479.

[2]郑宏香，何劲松.常用中药在防治腹膜透析相关性腹膜纤维化中的重要作用[J].中国中西医结合肾病杂志，2010，11(4):372-373.

[3]郑瑜倩，程巧鸳，祝明，等.HPLC同时测定百令胶囊中5种核苷类成分的含量[J].中国实验方剂学杂志，2015，21(5):61-64.

[4]郭春艳，刘虹.腹膜透析腹膜结构和功能保护的新策略[J].中国血液净化，2014，13(2):113-118.

[5]陈续红，刘虹.腹膜透析腹膜失功的防治[J].中华血液净化，2015，14(9):512-514.

[6]McIntyre NJ，Chesterton LJ，John SG，et al.Tissue advanced glycation end product concentration in dialysis patiens[J].J Am Soc Nephrol，2010，5(1):51-55.

[7]Margetts PJ，Oh KH，Kolb M.Transforming growth factorbeta:importance in long-term peritoneal membrane changes[J].Perit Dial Int，2005，25(Suppl 3):S15-S17.

[8]熊重祥，刘娜，严海东.腹膜纤维化治疗的最新进展[J].中国中西医结合肾病杂志，2014，15(3):276-279.

[9]张德鱼，赵建荣.腹膜透析相关性腹膜纤维化及防治[J].内蒙古医学杂志，2010，42(12):1474-1476.

[10]姚晓彤，高延霞.腹膜透析相关性腹膜纤维化的机制及干预[J].中国中西医结合肾病杂志，2015，16(8):741-743.

[11]邹庚艺，曹雪莹，周建辉，等.腹膜透析相关腹膜纤维化的防治进展[J].中华肾病研究电子杂志，2016，5(1):42-44.

[12]傅缨，熊耀斌，资晓飞，等.发酵虫草菌粉抗大鼠肝纤维化作用及机理研究[J].江西医药，2014，49(5):383-385.

[13]张颖茁，杨晓彤，杨庆尧，等.虫草对肺部疾病治疗的研究进展[J].现代生物医学进展，2014，14(34):6786-6788，6793.

[14]江慧星，孔薇.虫草制剂抗肾纤维化作用研究进展[J].上海中医药大学学报，2014，28(3):108-111.

[15]王立瑞，黄海东，蒋更如，等.虫草菌液对高糖作用下大鼠腹膜间皮细胞转化生长因子β1和纤维连接蛋白表达的影响[J].中国中西医结合肾病杂志，2011，12(6):493-496.

The influence of Bailing capsule on the expression of transforming growth factor-β1 and fibronectin in the peritoneal dialysissolution in uremia peritoneal dialysis patients

YAO Suhua， MAI Liming， SHI Junting
(Department of Nephrology， China National Petroleum Corporation Central Hospital，Langfang Hebei 065000，China)

ObjectiveTo investigate the influence of Bailing capsule on the expression of transforming growth factor-β1(TGF-β1)and fibronectin(FN)in peritoneal dialysis solution in uremia peritoneal dialysis patients.Methods Sixty patients treated with peritoneal dialysis were divided into two groups randomly(30 cases in control group and 30 cases in experimental group)，all patients were treated with peritoneal dialysis by 1.5%peritoneal dialysis solution(6 000 mL everyday)， and patients in experimental group taken five Bailing capsules each time， three times a day.We observed the changes of the expression of TGF-β1 and FN in the peritoneal dialysis solution in 1， 3 and 6 months.Results The expression of TGF-β1， FN in peritoneal dialysis solution in control group increased gradually as dialysis time went on.In experimental group，the expression of TGF-β1， FN in peritoneal dialysis solution was no obvious changes， but lower than control group(P＜0.05).Conclusion Bailing capsule can decrease the expression of TGF-β1， FN in the peritoneal dialysis solution，and may inhibit peritoneal fibrosis.

Bailing capsule； Peritoneal dialysis； Transforming growth factor-β1(TGF-β1)；Fibronectin(FN)；Peritoneal fibrosis

R692.5

B

2095-3097(2017)05-0266-03

10.3969/j.issn.2095-3097.2017.05.003

河北省廊坊市科技支撑项目(2014013005)

065000河北廊坊，中国石油天然气集团公司中心医院肾内科(姚素花，麦李明，石俊婷)

2017-03-21 本文编辑:张在文)