小儿哮喘中淋巴细胞亚群及CD4+的表达及意义

孜维地古丽·买买提，马 芹

(新疆维吾尔自治区人民医院儿科，新疆维吾尔自治区 乌鲁木齐 830001)

小儿哮喘中淋巴细胞亚群及CD4+的表达及意义

孜维地古丽·买买提，马 芹

(新疆维吾尔自治区人民医院儿科，新疆维吾尔自治区 乌鲁木齐 830001)

目的探讨小儿哮喘中淋巴细胞亚群及CD4+细胞的表达及意义。方法选取新疆维吾尔自治区人民医院2015年12月至2016年12月收治的103例哮喘患儿为实验组，另选取同期在院健康体检儿童103例为对照组。对两组研究对象的淋巴细胞亚群，外周血Treg，外周血TH1、TH17和TH2进行比较分析。结果实验组外周血Treg占CD4+细胞比例显著高于对照组(χ2=2.021，P<0.05)，外周血TH1在两组中占CD4+细胞比例差异无统计学意义(P>0.05)，实验组外周血TH2占CD4+细胞比例显著高于对照组(χ2=7.179，P<0.05)，实验组外周血TH17占CD4+细胞比例显著高于对照组(χ2=9.664，P<0.05)，实验组CD8+、CD4+所占比例均显著低于对照组，CD4+/CD8+所占比例显著高于对照组(χ2值分别为10.253、14.145、16.327，均P<0.05)。结论淋巴细胞亚群及CD4+细胞在小儿哮喘的发病中能够作为诊断依据，对哮喘的诊断和治疗等均具有重要的临床意义。

淋巴细胞亚群；CD4+细胞；小儿哮喘；表达及意义

小儿哮喘的发病率呈逐年上升发展趋势。国外研究资料显示，0～3岁幼儿的发病率高达20.11%[1]。小儿哮喘是小儿呼吸系统中常见的疾病，哮喘的发生和发展均受到免疫系统的影响。随着人们对淋巴细胞亚群及CD4+细胞研究的深入，人们逐渐将CD4+细胞分为外周血TH1、TH17、TH2和调节性T细胞(Treg)。本文综合分析小儿哮喘中淋巴细胞亚群及CD4+细胞的表达及意义，为临床治疗哮喘患儿提供参考依据，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取新疆维吾尔自治区人民医院2015年12月至2016年12月收治的103例哮喘患儿作为实验组，另选取同期在院健康体检儿童103例作为对照组。纳入标准：①年龄3～8岁；②在本次研究前2周内未使用过糖皮质激素和丙种球蛋白；③知情参与本次研究。排除标准：①合并心肺疾病；②合并肿瘤；③合并自身免疫性疾病。

实验组中有70例男患儿(占67.96%)，33例女患儿(占32.04%)；平均年龄为(5.02±1.15)岁，平均体重为(22.02±5.18)kg。对照组中有68例男患儿(占66.02%)，35例女患儿(占33.98%)；平均年龄为(5.05±1.13)岁，平均体重为(22.05±5.13)kg。两组研究对象的平均年龄、平均体重及性别比例比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。

1.2方法

1.2.1采集标本

对哮喘患儿入院时使用肝素钠抗凝负压真空方法取清晨空腹静脉血3mL，在2小时内检测。对照组患者采用微量元素检测余血。

1.2.2检测细胞因子

对外周血Treg、外周血TH1、外周血TH17、外周血TH2细胞因子进行检测。

按照顺序分别在流式管中加入5μL丙二醇甲醚醋酸酯(PMA)、1μL离子霉素、500μL外周全血，搅拌均匀之后，置入37°C的培养箱中。再标记好抗体管和对照管，固定细胞打孔：将200μL外周血加入试管中，避光保存，在室温下离心10分钟左右后转速处理，弃上清、再加入1mL洗涤液，混匀。标记细胞膜内的免疫荧光：在试管中加入5μL CD4+抗原肽段(CD4-APC)，在抗体管中加入单克隆抗体。流式细胞仪检测：在试管中加入400μL磷酸盐缓冲液(PBS)，混匀之后，上机检测；T淋巴细胞亚群检测按照四色免洗淋巴细胞亚群的分析方法进行相应检测，该类系统则自动分析其结果。

1.3统计学方法

2结果

2.1两组CD4+细胞水平的比较

实验组外周血Treg占CD4+细胞比例显著高于对照组(P<0.05)，外周血TH1在两组中占CD4+细胞比例比较差异无统计学意义(P>0.05)，实验组外周血TH2占CD4+细胞比例显著高于对照组(P<0.05)，实验组外周血TH17占CD4+细胞比例显著高于对照组(P<0.05)，见表1。

表1 两组的CD4+细胞水平比较结果

2.2两组淋巴细胞亚群水平的比较

实验组CD8+、CD4+所占比例均显著低于对照组，而CD4+/CD8+所占比例高于对照组，两组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)，见表2。

表2 两组淋巴细胞亚群水平比较结果

3讨论

3.1 CD4+细胞在哮喘发生和发展过程的作用

有研究资料显示，淋巴细胞亚群及CD4+细胞在小儿免疫系统中起到相关作用，其中外周血TH1和外周血TH2免疫反应可能产生保护作用[2-3]。

哮喘本身是由多种细胞介导的慢性气道性反应炎症，CD4+细胞在哮喘的发生和发展过程中起着重要作用[4]。CD4+淋巴细胞具有免疫调节作用，能够积极参与机体的免疫平衡中，具有以下两个方面的特征：其一，免疫无能性；其二，免疫抑制性[5-6]。在人类健康个体的外周循环血液中，CD4+淋巴细胞占4.2%～10.2%。虽然CD4+淋巴细胞在体内的量比较少，但是在免疫性疾病中和过敏性疾病中发挥着重要的价值和作用[7]。

3.2 CD4+细胞及淋巴细胞亚群在哮喘患儿中的临床意义

本研究结果显示，实验组患儿外周血Treg、TH2、TH17占CD4+细胞比例均显著高于对照组(均P<0.05)。TH17细胞在病毒和真菌的病原体感染中发挥着不同的调节作用。有研究资料表明TH17与炎症早期发挥的启动作用较为显著[8]。本资料实验组TH17水平显著高于对照组，说明TH17细胞的应答对哮喘的气道高反应性起着主导作用。对于有家族过敏史的患儿而言，外周血Treg、CD4+等相比起正常人群更高。

本资料显示实验组CD8+、CD4+所占比例均显著低于对照组(均P<0.05)，实验组CD4+/CD8+所占比例显著高于对照组(P<0.05)。CD4+的主要作用是抑制细胞毒性细胞亚群，CD8+在杀死靶细胞之后能够立即溶解，发病过程中外周静脉血含量表现不够平稳。本文研究结果显示CD4+/CD8+所占比例高于对照组，提示哮喘患儿的淋巴细胞抑制作用非常显著，最终能够抑制其免疫力。哮喘患儿存在免疫学变化，CD4+/CD8+比例相比CD4+、CD8+所占比例呈现显著增高趋势。因此，在临床治疗过程中，要积极加强对免疫功能的相关治疗。

呼吸道感染是引发哮喘的重要原因之一，但是哮喘和肺炎之间的关系尚无法详细阐明。有资料显示，急性发作期哮喘患儿感染支原体阳性率达到17.9%[9]。在临床中，血常规检查能够得到更为准确的结果，人们更为重视白细胞和红细胞等检测指标，但未高度重视中性粒细胞和嗜酸性粒细胞的检测指标[10]。然而，中性粒细胞、嗜酸性粒细胞与哮喘的发生呈显著相关性。嗜酸性粒细胞与哮喘的发生有着密切的关系，对炎症疾病同样具有重要的临床意义。因此，临床上需要结合患者的具体病情来判断血常规结果，再作出综合分析与判断，以期能够为进一步的诊断和治疗提供依据。本文在研究中由于样本量较少，尚存在不足之处，因此还需要进一步深入研究。

综上所述，淋巴细胞亚群及CD4+细胞在小儿哮喘的发病中能够作为诊断依据，对哮喘的诊断和治疗均具有重要的临床意义。

[1]马倩倩,梁秋华,孙琳,等.桥本氏甲状腺炎患者外周血中CD4+ CD45RO+记忆性T细胞的表达及意义[J].中国免疫学杂志,2016,32(10):1527-1531.

[2]程琳,钱龙,谭悦,等.芳香烃受体在类风湿关节炎患者外周血CD4+ CD25+ T细胞的表达及意义[J].中华疾病控制杂志,2016,20(4):379-382.

[3]Zhao T H, Liu Z, Yu A L,etal.Effects of intraoperative administration of dexmedetomidine on the percentage of T-lymphocyte subsets and natural killer cells in patients with colorectal cancer[J].Open J Anesthesiol,2013,3(2):104-108.

[4]李文良,高亮.CD4+ T细胞及淋巴细胞亚群在小儿哮喘与肺炎中的水平及临床意义[J].中国妇幼健康研究,2016,27(7):861-863.

[5]高志刚,袁永红,詹建华.沙丁胺醇气雾剂联合硫酸镁对小儿哮喘IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ及T淋巴细胞亚群的影响[J].中国生化药物杂志,2015,35(8):110-112,115.

[6]Liu B, Li J, Han Y P,etal.Dynamic analysis of lymphocyte subsets of peripheral blood in patients with acute self-limited hepatitis B[J].Health,2010,2(7):736-741.

[7]王栋,孙艳.雾化吸入布地奈德治疗小儿哮喘100例疗效及免疫功能对比观察[J].陕西医学杂志,2016,45(5):530-531.

[8]张欢,张秀琴.普米克令舒联合孟鲁司特治疗小儿哮喘的有效性及其对肺功能、T淋巴细胞亚群的影响[J].药物评价研究,2017,40(3):377-380.

[9]Zhang N W, Guo S N, LiI H R,etal.Effects of Sijunzi decoction on small intestinal T lymphocyte subsets differentiation in reserpine induced spleen deficiency rats[J].J Anim Vet Adv,2012,11(9):1290-1298.

[10]Song J Y, Du G S, Xiao L,etal.Individualized immunosuppressive protocol of liver transplant recipient should be made based on splenic function status[J].Chin Med J (Engl),2016,129(11):1340-1346.

[专业责任编辑：侯 伟]

ExpressionandsignificanceoflymphocytesubsetsandCD4+cellsinchildrenwithasthma

Ziweidiguli·MAIMAITI, MA Qin

(DepartmentofPediatrics,XinjiangUygurAutonomousRegionPeople’sHospital,XinjiangUygurAutonomousRegionUrumqi830001,China)

ObjectiveTo investigate the expression and significance of lymphocyte subsets and CD4+ T cells in children with asthma.MethodsTotally 103 children with asthma were enrolled in experimental group from Xinjiang Uygur Autonomous Region People’s Hospital from December 2015 to December 2016, and 103 healthy subjects taking health examination in the same period were selected as control group. The lymphocyte subsets, peripheral blood Treg, peripheral blood TH1, TH17 and TH2 were analyzed and compared between two groups.ResultsThe proportion of Treg in CD4+T cells in the experimental group was significantly higher than that in the control group (χ2=2.021,P<0.05). There was no significant difference in the proportion of peripheral blood TH1 between two groups (P>0.05). The proportion of peripheral blood TH2 in CD4+T cells in the experimental group was significantly higher than that in the control group (χ2=7.179,P<0.05). In the experimental group the proportion of peripheral blood TH17 in CD4+T cells was significantly higher than that in the control group (χ2=9.664，P<0.05). The proportion of CD8+ and CD4+cells was remarkably lower in the experimental group, while the proportion of CD4+/CD8+ was significantly higher (χ2value was 10.253, 14.145 and 16.327, respectively, allP<0.05).ConclusionLymphocyte subsets and CD4 + T cells can be used as diagnostic criteria in the diagnosis of childhood asthma pathogenesis, and it has important clinical significance in the diagnosis and treatment of asthma.

lymphocyte subsets; CD4+ T cells; pediatric asthma; expression and significance

R725.6

A

1673-5293(2017)10-1221-03

2017-06-15

孜维地古丽·买买提(1973—)，女，副主任医师，主要从事儿科临床工作。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.10.019