柚皮苷对小鼠阿司匹林性胃溃疡的保护作用

王淑英，王天祺，朱琳淼，马 楠，谢 锐，胡孟强

柚皮苷对小鼠阿司匹林性胃溃疡的保护作用

王淑英，王天祺，朱琳淼，马 楠，谢 锐，胡孟强

目的 观察柚皮苷对小鼠阿司匹林性胃溃疡的保护作用。方法 将60只Balb-c小鼠随机分为空白组、模型组、柚皮苷高剂量组、柚皮苷低剂量组、雷尼替丁组，每组12只。灌胃第5天，除空白组外，其余各组用阿司匹林（200 mg·kg-1）连续灌胃5 d造模，计算或测定各组胃指数、溃疡指数、pH值、血清中前列腺素 E2（PGE2）和环氧合酶-2（COX-2）的含量及胃组织学检查。结果 与空白组比较，模型组的胃指数、溃疡指数增大，pH减小，血清中PGE2和COX-2的浓度降低（均P＜0.05）；与模型组比较，柚皮苷可使胃指数、溃疡指数减小，pH增大，血清中PGE2和COX-2的浓度增高（均P＜0.05），且随柚皮苷剂量增大作用增强。结论 柚皮苷对小鼠阿司匹林性胃溃疡有一定的治疗作用。

柚皮苷；胃溃疡；阿司匹林；小鼠

Abstract：Objective In order to study the protective effect of naringin on gastric ulcer of mouse by aspirin. Methods The sixty Balb-c mice were randomly divided into blank control group，model group，high dose naringin group，low dose naringin group，ranitidine group，each group with twelve mice.On the fifth day，except the blank control group，the other groups were treated with aspirin（200mg·kg-1）for 5 days to make the gastric ulcer of mice.The gastric index，ulcer index，p H of gastric juice，the content of prostaglandin E2（PGE2）and cyclooxygenase 2（COX-2）in serum and the histological examination of stomach were calculated or measured in each group. Results Compared with the blank control group，the organ index and ulcer index increased.However，the pH decreased，and concentration of PGE2and COX-2 in the model group also decreased（all P＜0.05）.In the naringin groups，the organ index and ulcer index decreased，but the pH increased，and the concentration of PGE2and COX-2 in serum also increased（all P＜0.05），while the action was enhanced with the dose of naringin. Conclusion Naringin had some therapeutic effect on aspirin gastric ulcer of mouse.

Key words：naringin；gastric ulcer；aspirin；mouse

胃溃疡是消化系统常见的一种慢性疾病，而小鼠阿司匹林胃溃疡是常用的药物诱发型动物模型之一［1-2］。阿司匹林是非甾体类抗炎药，它通过降低环加氧酶的活性，使前列腺素的生成量减少。前列腺素能减弱胃酸的分泌和胃黏液的生成，导致侵袭因素增加，黏膜保护作用削弱，从而诱发胃溃疡［3］。有关文献报道，柚皮苷在镇静、抗动脉粥样硬化、降血脂、调节血糖、解痉镇痛等方面有着很好的治疗作用［4-5］。为探究柚皮苷对小鼠阿司匹林胃溃疡的作用，现研究报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 Balb-c小鼠共 60只，体质量（20±2）g，由河南科技大学动物中心提供，动物许可证号：SCXK（鄂）2010-0007。

1.1.2 药物与试剂 柚皮苷：西安沃森生物科技有限公司，药品纯度98%，批号：20161018。阿司匹林：江苏平光制药有限责任公司，每片 25 mg，批号：20170118。雷尼替丁：上海现代哈森（商丘）药业有限公司，批号：20170304。Mouse PGE2ELISA KIT：上海羽朵生物科技有限公司，批号：YD-M30446，有效期：201709。Mouse COX-2 ELISA KIT：上海羽朵生物科技有限公司，批号：YD-M22341，有效期：201709。

1.1.3 实验器材 FRESCO21离心机（上海巴玖实业有限公司），XSP-3双目生物显微镜（上海普丹光学仪器有限公司），Epoch酶标仪（美国，Moleculor Device公司），PHS-3C型pH计（上海仪电科学仪器股份有限公司），FA2204B分析天平（上海精科天美科学仪器有限公司），TEC2500病理组织漂烘仪（常州市郝思琳医用仪器有限公司），RM2235轮转式切片机（上海欧启电子科技有限公司），TEC-2800型包埋机（厦门迈凯伦精瑞仪器有限公司）。

1.2 实验方法

1.2.1 动物分组与给药 Balb-C小鼠60只，按参考文献报道分组［1-3］，随机分为空白组（生理盐水），模型组，阳性对照组（雷尼替丁50 mg·kg-1），柚皮苷低剂量组（60 mg·kg-1），柚皮苷高剂量组（240 mg·kg-1），每组 12只。

1.2.2 动物模型 小鼠连续灌胃10 d，空白组和模型组用蒸馏水灌胃。在第5天时除空白组外用阿司匹林（200 mg·kg-1）造模，连续造模 5 d［6-8］。

1.2.3 观察指标 末次给药后禁食不禁水24 h，小鼠摘眼球取血，然后脱椎处死，沿腹中线打开腹腔结扎贲门、幽门后剪取胃组织，沿胃大弯剪开胃腔，用2 mL的生理盐水洗出胃液及胃容物，用pH计进行胃酸酸度测定。然后将胃溃疡面朝上平铺在载玻片上，将载玻片放在格子纸上，与格子线对齐并用高分辨率相机拍照。然后用电子天平将胃称重计算脏器指数。最后将称好的胃放入10%的甲醛中固定以便进行病理切片的制作。根据脏器指数＝脏器质量（g）／小鼠体质量（100 g），计算出小鼠胃的脏器指数。采用单盲法，根据 Guth标准计算溃疡指数和抑制率，按溃疡或糜烂面积计分：每3个点状溃疡（黏膜缺损小1 mm或出血性糜烂小点，称为点状溃疡）计1分；条状出血：以游标卡尺测量溃疡面的最大长径和垂直于最大长径的最大宽径，二者的乘积即为溃疡指数。宽为1 mm者每1 mm长计为1分，2 mm宽者每1 mm长为2分；3 mm宽者每1 mm长为3分。溃疡抑制率／% ＝（损伤模型组溃疡指数—给药组溃疡指数）／损伤模型组溃疡指数 ×100［9-13］。

1.3 统计学处理 应用 SPSS 17.0进行数据处理，所得数据均用均值 ±标准差）表示，组间比较采用方差分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 柚皮苷对小鼠胃指数的影响 与空白组比较，模型组胃指数增大（P＜0.05）；与模型组比较，雷尼替丁、柚皮苷高、低剂量组对小鼠的胃指数差异无统计学意义（P＞0.05），见表 1。

2.2 柚皮苷对小鼠胃液p H级溃疡指数的影响 与空白组比较，模型组pH减小，酸度和溃疡指数增大（均 P＜0.05）；与模型组比较，雷尼替丁、柚皮苷高低剂量组的胃液p H均升高、溃疡指数明显降低（均P＜0.05），见表 1。

2.3 柚皮苷对小鼠血清PGE2、COX-2的影响 与空白组比较，模型组血清中 PGE2、COX-2下降（均P＜0.05）；阳性对照组 PGE2、COX-2无变化；柚皮苷低剂量组的 PGE2、COX-2显著升高，且与模型组比较差异有统计学意义（均 P＜0.05）；柚皮苷高剂量组的PGE2、COX-2略有升高，与柚皮苷低剂量组比较，差异无统计学意义，见表1。

2.4 胃组织大体观和镜下观 沿胃大弯剪开，空白组胃黏膜完好；模型组胃黏膜出现严重损伤，有明显的糜烂和出血点；阳性对照组、柚皮苷高、低剂量组的胃组织损伤不明显。镜下观察可见模型组小鼠胃黏膜出现明显的损伤，胃黏膜结构破坏。阳性对照组和柚皮苷高低剂量组小鼠的胃黏膜充血减轻，未见出血点和糜烂，溃疡减轻，见图1-2。

表1 柚皮苷对小鼠阿司匹林性胃溃疡的影响（n＝12，x±s）

图1 各组小鼠胃黏膜形态

图2 各组小鼠胃组织病理学形态（HE，×100）

3 讨论

阿司匹林通过降低环加氧酶的活性，使前列腺素减少，减弱胃酸的分泌及胃黏液的生成，从而诱发胃溃疡。柚皮苷在柚皮中含量丰富，是柚皮中的有效成分。本组结果，模型组胃指数增大；pH减小，酸度增大；溃疡指数增大；胃组织充血明显，有散在出血点等显示阿司匹林通过胃酸直接破坏以及黏膜保护屏障的削弱造成胃溃疡模型［8-9］。柚皮苷组胃指数减小，胃液pH增大，溃疡指数明显降低以及胃组织学改善等，显示柚皮苷对小鼠胃溃疡有保护作用。

从血清中 PGE2的结果分析，模型组 PGE2和COX-2显著下降；柚皮苷低剂量组的PGE2和COX-2显著升高，与模型组比较有显著性差异；柚皮苷高剂量组的PGE2和COX-2升高，与柚皮苷低剂量组比较，差异无统计学意义。阳性对照组PGE2和COX-2无显著升高，说明阿司匹林导致胃溃疡的一个因素是通过减少PGE2而实现的；从阳性对照组与模型组的比较中可以看出，雷尼替丁在治疗胃溃疡的过程中可能不是通过增加PGE2的浓度而实现的；柚皮苷在低剂量时可以增加血清中PGE2的浓度，从而发挥对胃溃疡的治疗作用［14-15］。

综上所述，非甾体抗炎药阿司匹林会引发胃溃疡，它是通过降低PGE2、COX-2的含量，增加胃酸的分泌而导致胃溃疡的发生。低剂量的柚皮苷可能通过增加PGE2和COX-2，减少胃内酸度和增加胃黏膜的保护作用来发挥对胃溃疡的治疗作用，低剂量的柚皮苷对于胃溃疡的治疗作用效果显著。但高剂量的柚皮苷虽然对胃溃疡有一定的治疗作用，但没有低剂量的柚皮苷效果显著。

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Protective Effect of Naringin on Mouse Aspirin Gastric Ulcer

WANG Shu-ying，WANG Tian-qi，ZHU Lin-miao，MA Nan，XIE Rui，HU Meng-qiang
（Medical College，Henan University of Science and Technology，Luoyang 471023，China）

R285.5；R573.1

A

1672-688X（2017）03-0172-03

10.15926／j.cnki.issn1672-688x.2017.03.004

河南科技大学大学生科研训练计划项目（2016117）

2017-06-12

河南科技大学医学院，河南洛阳471023

王淑英（1965—），女，河南洛阳人，教授，从事神经药理学研究。