何 平 徐 闯
(黑龙江八一农垦大学 动物科技学院,黑龙江大庆 163319)
黑龙江地区某牧场奶牛大肠杆菌病的病例报告
何 平 徐 闯*
(黑龙江八一农垦大学 动物科技学院,黑龙江大庆 163319)
大肠杆菌病是由大肠埃希菌引起的细菌性人畜共患病。大肠埃希菌,俗称大肠杆菌,大多数为人和温血动物肠道内的正常菌群,1885年,Escherion首次发现此菌,在很长的一段时间内一直作为正常肠道菌群的组成部分,认为是非致病菌。直到20世纪中叶,人们才认识到一些特殊血清型的大肠埃希菌对人和动物有病原性,尤其是对幼畜常引起严重的腹泻和败血症[1]。奶牛大肠杆菌病是一种常见的,造成奶牛业经济损失较为严重的奶牛疾病。
2016年4~5月,黑龙江地区某牧场部分泌乳期奶牛突然先后发病,体温无明显变化,多数在38.2℃~39.3℃之间,排酱油色稀水样或血样粪便,临床上配以大量的抗生素和葡萄糖生理盐水进行治疗,均未收到明显的治疗效果,截至5月10日已陆续死亡6头。
突然发病,精神不振,临床检查发现,消化道系统:间有腹泻,排酱油色稀水样粪便,其中有大量气泡且恶臭;呼吸系统:呼吸急促,呼吸频率明显增加;其他系统未见异常。食欲及泌乳情况基本正常,部分奶牛出现症状后1日内急性死亡。
根据解剖采样的基本原则,急性死亡的动物,先进行血液抹片镜检,确定不是炭疽,解剖采样。剖检可见,病死牛肠道后段大量出血,肠壁变薄且透明,心脏的心房及心室内壁渗血,肺充血,肺脏间质增宽,瘤胃、瓣胃壁充血,肝脏有少量点状坏死灶。
在其死亡后2h以内,采集其病料。按照无菌操作的原则,用具事先消毒,一套器械与容器只采一种病料,取病死牛的肝脏、肺脏、肠道等处病料,严格遵守生物安全操作的相关规定,避免对样品、环境的污染和对采样人员的伤害。组织样品暂时冷藏处理,然后在保温箱内加冰袋冷藏运输。样品包装好后以最快最直接的途径带回实验室,样品到达实验室后,立即处理[2]。
取心血、肠壁、肝脏、肺脏等病料,直接涂片革兰氏染色镜检,均见革兰氏阴性小杆菌。
供试品(样品)各取10g,分别加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml,用匀浆仪或其他适宜的方法,混匀,作为1:10的供试液。
称取伊红亚甲蓝琼脂培养基(EMB)37.5g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,充分溶解,121℃高压灭菌15min。待培养基冷至50℃左右,无菌操作,倾注灭菌平皿,待凝固后,备用。将供试液划线接种于平板上。将平板翻转,放入恒温培养箱中,36±1℃培养18~24h。
表1 观察结果
取病死牛肺、肝、肾、脾、空肠、回肠和结肠,用中性福尔马林固定,石蜡包埋切片H.E染色,显微镜观察[3]。肺脏:肺泡间隙增宽,有肠杆菌聚积成团,毛细血管充血。肝脏:血管内可见细菌团块。肾脏:肾小管上皮细胞肿胀变性。空肠:黏膜下层见大量淋巴细胞浸润,黏膜层充血、出血,上皮细胞坏死脱落。回肠:黏膜层可见淋巴细胞浸润,黏膜下层可见细菌团块。
经细菌学检查,可清晰地看到革兰氏阴性小杆菌,伊红亚甲蓝培养基上的菌落呈黑色中心,有绿色金属光泽,再结合临床症状、剖检变化及组织学检查,诊断为牛大肠杆菌病。
把病牛隔离开,及时清扫圈舍,严格消毒管理,确保舍内清洁卫生。加强饲养管理,不要突然更改饲喂模式,减少各种对肠胃的不良应激。可于母牛生产前及时接种多价血清大肠杆菌苗,确保母牛高抗体水平。如此,犊牛通过及时哺乳,获得高水平的母源抗体,提升抗疾病能力[4]。
奶牛急性经过的大肠杆菌病,诊治较为困难,康复难度较大。常规治疗措施,及时分离患牛大肠杆菌血清型,根据血清型做药敏试验,选择有较强抑制作用的抗生素,可起延缓治疗的效果。选择治疗药物的同时,适当选择敏感药物,避免耐药性的产生。
治疗的主要目的应为:
(1)控制细菌感染。
(2)恢复血容量/补液。
(3)纠正电解质不平衡[5]。
常见有疗效的药物有庆大霉素、磺胺甲基嘧啶、链霉素、诺氟沙星等。具体用量,可借鉴如下:庆大霉素临床治疗用量为1~1.5mg/kg,肌肉注射2次/日;磺胺甲基嘧啶临床治疗用量为0.08~0.2g/kg,口服治疗2次/日;链霉素治疗用量10mg/kg,肌肉注射2次/日;诺氟沙星临床治疗用量为10mg/kg,肌肉注射2次/日。
在上述药物治疗的同时,可配合调整肠胃机能、恢复血容量,加快疾病康复。可用将葡萄糖(含量67.53%)、氯化钠(含量4.34%)、甘氨酸(含量10.3%)、枸橼酸(含量0.81%)、枸橼酸钾(含量0.21%)、磷酸二氢钾(含量6.8%)混合调配,取混合药物64g,加入2000ml的水,待停乳2d,可口服治疗,每天2次,每次1000ml[4]。
纠正脱水,对水和电解质的累积丢失应在2~3 h,最长6 h内补足。依据脱水的不同程度内服口服补液盐,轻度脱水15~30 ml/ kg,中度脱水30~50 ml/kg,重度脱水50~80 ml/kg,分3~4次服完[6]。
本次疫病的暴发,可能是因为当时牛场刚调完群,加上环境气候突变,导致牛群应激因素增加、抵抗力降低所致。疫病暴发后,要注意隔离病牛,重视场地和用具的消毒,并及时做实验室诊断,做到及时有效的治疗。临床诊治,注意与牛沙门氏菌病、牛梭菌性肠炎的区别诊断[7]。比较而言,牛沙门氏菌各日龄阶段均有易感性,以发热、下痢为主要特征,粪便带血,恶臭;胃肠黏膜和浆膜上有出血斑;剖检病变主要集中肝脏、肾脏、脾脏等实质性器官;病原体为沙门氏菌[8]。而大肠杆菌病剖检病变主要集中肠胃处。牛梭菌性肠炎由魏氏梭菌引起,典型症状为急性出血性肠炎,剖检集中肠、肾脏处。与大肠杆菌鉴别,魏氏梭菌菌体表现为两端为钝圆,有荚膜[9],染色镜检,鉴别比较容易。
[1]Kaikainen V,Ikaheimo R,Katila M L,et al.P-fimbriation of Escherichia coil strains from patients with urosepsis demon-strated by a commericial agglutination test[J].Clin Microbiol,1991,(29):221.
[2]岳孝瑞.动物疫病监测样品采集运送保存应注意的问题[J].当代畜牧,2012,(5):32-33.
[3]苏卫,覃金胜.奶牛大肠杆菌病的诊断[J].云南畜牧兽医,1990,(2):35-36.
[4]杜玉品.奶牛大肠杆菌的疫病防控[J].兽医导刊,2015(4):127-127.
[5]Bywater R J. Pathogenesis and treatment of Escherichia coli infections in calves[J].Journal of the South African Veterinary Association,1976,47(3):193.
[6]陈伟,余红燕.犊牛大肠杆菌病的诊治[J].中国牛业科学,2016,42(6):157.
[7]王立军,苑小明,常玉君.犊牛大肠杆菌病的诊疗方法[J].养殖技术顾问,2009,(2):106.
∶何平(1992-),男,硕士研究生,动物营养代谢病。
∶徐闯(1979-),男,教授,博士,动物营养代谢病。