大通牦牛布鲁氏菌病血清学调查报告

陈孝得

（青海省大通种牛场，青海大通 810102）

大通牦牛布鲁氏菌病血清学调查报告

陈孝得

（青海省大通种牛场，青海大通 810102）

大通种牛场地处祁连山东端，北靠达坂山，东南与大通县界接壤，西与海晏县连接，北与祁连县毗邻。北纬37°11′～37°32′，东经100°52′～101°54′之间。海拔2900～4800m，东西长约40km，南北宽约15km，土地总面积5.6万hm2，可利用草场面积5.1万 hm2，饲草料基地3800hm2，场部距西宁92km，场区内山间谷地重叠气候湿润，雨量充足，年平均雨量为463.2～636.1mm，全年蒸发量1054.7～1422.3mm，境内有大小河流30余条，水量充足。年均气温2.4℃，最高气温24℃，最低气温-31℃，全年无绝对无霜期、牧草生长期约120d左右。草地类型以高寒草甸和山地草甸为主，高寒草甸占46%，山地草甸占54%。为了解大通牦牛布鲁氏菌病感染情况，特进行了本次血清学调查。采用布鲁氏菌病虎红平板凝集试验结合布鲁氏菌病试管凝集试验。

1 虎红平板凝集试检测方法

1.1 材料的准备

器材与试剂：虎平板凝集抗原、载玻片、移液器、移液枪头、酒精灯、记号笔、计时器、试管架。

1.2 检测过程

该实验又称为板式孟加拉红平板凝集实验，由于所用的抗原是酸性带色的抗原，抗原与被检的血清作用时，能抑制血清中的抗体的凝集活性，检查出的抗体。因此提高了该向反应的特异性。在平板玻片上加抗原30μl被检血清30μl搅匀，酒精灯加热至37℃静止5min观察载玻片。同时做阴、阳性血清做对照。

1.3 检测结果

5min观察载玻片，如果出现了凝聚颗粒呈菌丛状，凝集间液体明显清亮，即为阳性，反之为阴性。

2 试管凝集试验

2.1 材料的准备

器材与试剂：布鲁氏菌病试管凝集抗原、对照阴阳性血清。试管架。试管、移液器、500ml烧杯、吸头、记号笔、可调加液器、0.9%氯化钠注射液、蒸馏水、恒温培养箱。

2.2 检测过程

准备好试管，取九只试管放在试管架上，进行编号，一号试管为血清对照管，二到八号为试验管，九号为抗原对照管。

将一号试管进行血清稀释，加入2.4ml的生理盐水，二号试管中不加入，三号到九号试管中各加入0.5ml的生理盐水，一号试管加入0.1ml被检测的血清。搅拌均匀后各吸入0.5ml，加入二号三号试管中，从三号试管开始做比对稀释，从八号试管中吸出0.5ml倒掉。

十倍稀释抗原，从二号试管开始，每支加入0.5ml稀释后的抗原。凝集试管检验判断透亮程度，取五只试管进行编号。取稀释后的抗原再做第二次的稀释实验。

试管编号 抗原稀释液 生理盐水 透亮度 标记1 0.00 1.00ml 100% +++++ 2 0.25 0.75ml 75% +++ 3 0.50 0.50ml 50% + 4 0.75 0.25ml 25% -5 1.00 0.00ml 0% --

根据上述的实验结果，可以看出，一号试管清亮透明，九号试管，浑浊均匀。牦牛血清凝集的一号试管中检测为阳性，九号试管中为阴性反应。

2.3 结果与讨论

2.3.1 对人类的影响

牦牛布病的感染是其繁衍疾病的主要原因之一，这样就给牦牛的养殖户造成了严重的损失，减少了养殖户的收入。牦牛布病感染一直都为养殖户关注，布病是人畜共患的传染病，而且人可以经过多种途径感染上布病。人感染上布病，可以通过三种方式进行传播。首先是通过皮肤黏膜，直接接触感染源。比如工作在畜牧一线的人员，通过与病畜的直接接触或者是病畜污染的水源，土壤等。使人通过皮肤黏膜直接接触，感染了布病。再有就是通过消化道感染。这种方式就是生吃了病畜的肉，或者是未经煮熟的肉，在接触病畜后不洗手直接拿食物吃等现象，都会造成消化道感染，导致布病的发生。第三种情况，就是通过呼吸道感染。在畜牧场工作的人员，通过空气中的飞沫和尘埃感染。受污染的飞沫和空气含有病畜的感染源。因此，会导致呼吸道感染。从而使人感染上布病。

2.3.2 检验结果的探讨

本次试验的检验结果，大通牦牛感染率为0.11%，此次试验采用了虎红平板凝集试验做初选，操作方便快捷，适用于大规模检测的筛选样本。但虎红平板凝集试验易于出现假性阳性的情况，这是由于虎红抗原敏感性特高，再是血清样本的纯洁、污染程度，保存运输及环境温度等都会导致检测结果的不真实性。试管凝集试验较准确的复合判定虎红筛选的血清样本，大大减少检测人员的工作强度。

影响结果因素还有采样血清样本的数量较少或是集中在某个区域的牦牛感染布病的情况较少，这样有关血清样本就非常单一。由于时间的关系，没有进行大范围的牦牛血清采集。在今后的工作中要进一步扩大新的血清采集范围，增加血清样本，完善检测目标，加强布病的预防工作。

2.3.3 防控治措施

首先，要制定严格的检疫报告制度。发现布病疫情后要做到及时、如实的上报。根据上级的指示进行疫情的防治工作。有关部门要密切注意疫情的动态，积极地开展调查，进行监测。其次，要深入开展宣传教育活动，通过实地宣传、媒体、印发小册子等多种形式进行布病防治的宣传工作，增强群众的自我保护意识，有效的控制牦牛布病的发生，从根源出切断传染源，这样可以提高牦牛的繁衍。提高牦牛的繁殖率，增加职工的收入。

3 结语

虎红平板凝集试验操作方便，而且还快捷，适用于大规模的筛选实验，但易于出现假阳性的情况。采用试管凝集试验，这种实验的方法特异性高，检测较准确。但操作麻烦不适应于大规模的检测，虎红检出的血清样本进行试管凝集试验复合，减少工作强度，以做出较准确的判定。

[1]张可荣，贡嘎，索朗斯珠，等.西藏部分地区牦牛布病血清学检测初报[J].中国奶牛，2011，（24）：48-49.

[2]郭昱洁，玛依拉·买买提，李飞. 霍城县2012年布病血清检测结果分析[J].新疆医学，2014，44（5）：117-118.