长链非编码RNA H19与消化系统恶性肿瘤患者预后关系的Meta分析

成洪杰，关宇昕，张 辉，崔培林

首都医科大学附属北京天坛医院消化内科，北京100050

长链非编码RNA H19与消化系统恶性肿瘤患者预后关系的Meta分析

成洪杰，关宇昕，张 辉，崔培林

首都医科大学附属北京天坛医院消化内科，北京100050

目的 探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA，lncRNA)H19与消化系统恶性肿瘤患者预后之间的关系。方法 检索PubMed、Embase、Web of Science、the Cochrane Library、万方、维普及CNKI数据库，收集2001年1月-2016年9月发表的所有研究lncRNA H19表达与消化系统恶性肿瘤患者预后相关性的中英文文献。采用Stata 12.0软件进行数据分析，通过合并纳入研究的风险比(HR)及其95%CI评价H19表达与消化系统恶性肿瘤患者预后的关系。结果 共8篇文献符合纳入标准，总计801例患者。研究结果表明，H19高表达与预后不良相关，患者总生存期(OS)和无病生存期(DFS)的HR值和95%CI分别为1.23(95%CI:1.05～1.45)和1.31(95%CI:1.05～1.64)(P＜0.05)。结论 lncRNA H19高表达是消化系统恶性肿瘤患者预后不良的危险因素。

消化系统恶性肿瘤;预后;长链非编码RNA H19;Meta分析

长链非编码RNA(long noncoding RNA，lncRNA)是一类转录长度超过200 bp的不具有蛋白质编码功能的RNA 分子总称［1］。近年来研究［2］证实，lncRNA可通过参与调节细胞增殖、侵袭和转移等过程影响肿瘤的发生、发展和预后。H19基因是lncRNA中研究较多且与肿瘤关系密切的基因，有证据［3-10］表明，H19在多种肿瘤组织中存在高表达的现象，其中与肝癌、胃癌、胆囊癌、结直肠癌等消化系统恶性肿瘤关系较为密切。最近，有研究［11-12］表明，H19可以通过调节肿瘤新生血管形成、上皮-间充质转分化、G1/S期染色体迁移、肿瘤转移等过程促进肿瘤的发生、发展，表明H19可能与恶性肿瘤的预后相关。因此，为探讨lncRNA H19与消化系统恶性肿瘤患者预后之间的关系，我们进行了这项Meta分析。

1 资料与方法

1.1 文献检索

1.1.1 检索策略:检索 PubMed、Embase、Web of Science、the Cochrane Library、万方、维普及 CNKI数据库于2001年1月-2016年9月发表的所有研究lncRNA H19表达与消化系统恶性肿瘤患者预后相关性的中英文文献。英文检索词为“long noncoding RNA H19”、“H19”、“cancer or carcinoma”、“prognosis or prognostic”、“survival”、“outcome”、“recurrence”，中文检索词为“H19”、“癌”和“预后”。文献检索由2名研究人员采用自由词与主题词相结合的方式独立进行检索。检索策略遵循Cochrane系统评价手册。

1.1.2 文献纳入与排除标准:纳入标准:(1)对消化系统恶性肿瘤的研究(包括食管、胃、小肠、结直肠、肝脏、胆囊、胆管、胰腺部位);(2)明确指出H19定量检测方法，并明确阐述H19高表达或低表达的界定标准;(3)有关H19表达与总生存期(OS)、无病生存期(DFS)的相关研究;(4)能直接或间接获取HR及95%CI的研究;(5)能获取研究人群、研究地区、随访时间等详细资料。排除标准:(1)非消化系统肿瘤;(2)综述、报告类及未完整发表的研究;(3)重复发表、重复收录或资料雷同的研究;(4)数据不完整且无法通过计算得到所需数据。

1.2 资料提取 由2名研究者按照独立、有分歧经商讨再做决定的原则提取数据。纳入研究需要提取的数据主要包括:第一作者姓名、文献发表的时间、被研究者的国籍、肿瘤类型、样本量、H19检测方法、H19高表达或低表达水平的分界标准、观察终点和指标、随访时间、生存分析类型、风险比(HR)及其95%CI。

1.3 文献质量评价 纳入的原始研究均为观察性队列研究，由2名研究者分别按照Newcastle-Ottawa Scale(NOS)文献质量评价量表［13］从研究人群的选择、可比性和研究结果测量三个方面独立地对纳入的研究进行质量评价，总得分为9分，≥7分为高质量研究。

1.4 统计学方法 采用Stata 12.0统计软件进行分析，对于原文献未直接给出HR及95%CI而仅给出K-M生存曲线的，采用Engauge Digitizer 4.1软件提取生存率进而获取 HR及95%CI［14］。H19表达与消化系统恶性肿瘤预后的相关性用HR及95%CI的效应量评价，对各项研究的HR及95%CI进行Meta分析合并，绘制森林图。对纳入的各项研究进行齐性检验，计算I2统计量评估各研究间的异质性。若研究间存在异质性，进一步进行亚组分析。对纳入的研究进行敏感性分析，并绘制漏斗图(Begg’s funnel plot)描述发表偏倚。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 纳入文献基本情况 初始检索共得到232篇文献，去除重复文献并阅读标题排除217篇，剩余15篇，其中7篇不符合纳入标准被排除，最终有8篇文献纳入研究，其中包括肝癌3篇、胃癌3篇、胆囊癌1篇、结直肠癌1篇，均为队列研究，主要研究肿瘤组织中H19表达与总生存期(OS)、无病生存期(DFS)的关系。研究对象来自中国、韩国、日本3个国家，共801例患者，随访时间24～120个月。8篇文献中NOS评分≥7分4篇，＜7分4篇。8篇文献中有4篇可直接获取HR和95%CI，4篇则通过K-M生存曲线获得(见表1)。

表1 纳入研究的基本资料Tab 1 Basic data in the included studies

2.2 H19高表达与患者预后相关性 研究结果表明，H19高表达与预后不良相关，患者OS和DFS的HR值和95%CI分别为1.23(95%CI:1.05 ～1.45)和 1.31(95%CI:1.05 ～1.64)(P ＜0.05)(见图 1)。异质性检验:I2=70.7%，P ＜0.05，提示研究间存在一定异质性。为进一步探讨异质性来源，按照研究对象样本量大小、国籍和文献质量分为亚组进行分析(见表2)。样本量亚组中，样本量≥100的研究组内异质性较高(I2=70.7%，P ＜0.05);样本量 ＜100的研究组内不存在异质性(I2=27.5%，P＞0.05);样本量≥100和＜100的亚组均显示H19高表达提示不良预后。国籍亚组中，中国亚组与非中国亚组组内比较，异质性较小，提示国籍不同可能是研究间异质性来源。文献质量亚组中，文献质量≥7的亚组组内异质性较高，大于总合并I2值;文献质量＜7的亚组组内异质性较低。

2.3 敏感性分析 每次剔除一个研究，结果并没有明显的改变，说明此Meta分析结果相对稳定(见图2)。

2.4 发表偏倚 Begg’s秩相关检验显示，不存在显著性发表偏倚(P＞0.05，见图3)。

图1 纳入研究森林图Fig1 Forest plots of included studies

表2 纳入研究亚组分析Tab 2 Subgroup analysis for the included studies

图2 H19表达与OS的敏感性分析Fig 2 Sensitivity analysis of the pooled HR of H19 expression and OS

图3 H19表达与OS漏斗图Fig 3 Begg’s funnel plot of H19 expression and OS

3 讨论

研究证实，lncRNA在多种肿瘤中存在异常表达的现象。H19基因位于人类染色体11p15.5，全长约2.3 kb，包含5个外显子和4个内含子，是不编码蛋白质的母源性印迹基因［15］。H19基因是第1个被发现的非编码印记基因，以前一直被认为是一种抑癌基因［16-17］。近年来，研究［18］表明，H19 在许多类型的肿瘤中呈高表达，且具有一定的致癌特性。已经有许多研究［3-10］表明，H19在胃癌、肝癌、胆囊癌和结直肠癌等消化系统恶性肿瘤组织中呈高表达。最近，研究发现，H19可以通过调节肿瘤新生血管形成、上皮-间充质转分化、G1/S期染色体迁移、肿瘤转移等过程促进肿瘤的发生、发展，表明H19可能与恶性肿瘤的预后有关。本研究结果显示，H19高表达者在胃癌、肝癌、胆囊癌、结直肠癌等消化系统恶性肿瘤中预后不良，患者OS和DFS明显缩短。H19高表达可作为一个提示预后不良的独立危险因素。

我们针对符合纳入研究标准的8个研究进行Meta分析，结果表明，H19高表达与预后不良相关。我们依据样本量、研究对象国籍、文献质量等因素进行亚组分析，各亚组分析也证实了上述结论。异质性来源分析发现，不同国籍各亚组合并的I2值均较小，提示纳入研究者国籍不同可能是合并研究异质性来源的主要原因。本研究论文发表偏倚评价的Begg’s漏斗图图形显示基本对称分布，Begg’s秩相关检验不存在显著性发表偏倚。

本研究尚存在一些不足之处:(1)在纳入研究的8篇文献中，其中4篇未能直接获得HR值及95%CI，我们均通过K-M生存曲线间接获得，这可能导致研究结果不精确;(2)不同研究对H19高表达的界定标准不一致，这可能是一个造成研究合并异质性的因素;(3)本研究纳入了一些小样本和不同地域的研究，这可能会影响研究结果的可信度，同时也使研究结果适用人群受到一定程度的限制;(4)由于研究文献的限制，本研究只纳入了英文文献，未纳入中文文献，可能会存在一定的偏倚;(5)本研究只纳入了一部分消化系统的肿瘤，食管癌、胰腺癌等肿瘤因受到文献限制未涉及，这可能会高估H19在预测肿瘤预后中的价值。因此，我们期待更多的研究来进一步探讨H19在不同类型肿瘤中的预后价值。

综上所述，本研究提示，消化系统恶性肿瘤组织中H19表达上调与患者的不良预后有很大相关性。H19可作为一种新的预测因子用于消化系统肿瘤预后的判断，对消化系统肿瘤的治疗具有指导价值，有望成为肿瘤药物治疗的新靶点，但尚需进一步前瞻性研究证实。

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(责任编辑:马 军)

《胃肠病学和肝病学杂志》2016年审稿专家名单

王 帅 柏 愚 陈 煜 方秀才 房殿春 郭明洲 李瑜元 令狐恩强 罗和生 聂青和

田德安 吴云林 姚登福 张建中 张振书 郑素军 李文晰 王炳元 王全楚 李 健

王豪勋 马 军 陈香宇 肖 冰 吴 巍 吕农华 陈旻湖 黄 锦 李 岩 张绪清

钱家鸣 杨盛力 袁 媛

Association between long noncoding RNA H19 and the prognosis of patients with digestive cancers:a Meta-analysis

CHENG Hongjie，GUAN Yuxin，ZHANG Hui，CUI Peilin
Department of Gastroenterology，Beijing Tiantan Hospital，Capital Medical University，Beijing 100050，China

ObjectiveTo investigate the association between long noncoding RNA(lncRNA)H19 and the prognosis of patients with digestive cancers.MethodsThe PubMed，Embase，Web of Science，the Cochrane Library，WanFang Data，VIP，and CNKI were searched to collect all articles revelant to the association between lncRNA H19 and the prognosis of patients with digestive cancers.The articles were published from Jan.2001 to Sep.2016.Hazard ratios(HR)with corresponding 95%CI were calculated and merged to evaluate the link between H19 and clinical prognosis by Stata 12.0 software.ResultsEight eligible studies with a total of 801 patients were matched to our inclusion criteria.The result showed that overexpression of H19 could predict poor overall survival(OS)and disease-free survival(DFS)in patients with cancers of digestive system，with HR of 1.23(95%CI:1.05-1.45)，and 1.31(95%CI:1.05-1.64)，respectively(P ＜0.05).ConclusionLncRNA H19 can be served as a risk factor，which predicts a poor prognosis in patients with digestive cancers.

Digestive cancers;Prognosis;Long noncoding RNA H19;Meta-analysis

R735

A

1006-5709(2017)08-0886-04

2016-10-18

10.3969/j.issn.1006-5709.2017.08.012

北京市自然科学基金资助项目(7132084)

成洪杰，硕士研究生，研究方向:消化系统疾病的基础和临床研究。E-mail:bzyxychj@163.com

崔培林，主任医师，教授，研究方向:消化系统疾病的基础和临床研究。E-mail:cuipl@aliyun.com