洋虫改善肺癌荷瘤小鼠体内炎性微环境的研究

王海龙，陈立军，刘名龙，胡香萍，梁 晶，于津生， 窦新立

（天津市滨海新区大港医院肿瘤科，天津 300270）

洋虫改善肺癌荷瘤小鼠体内炎性微环境的研究

王海龙，陈立军，刘名龙，胡香萍，梁 晶，于津生， 窦新立

（天津市滨海新区大港医院肿瘤科，天津 300270）

目的 探讨洋虫对肺癌荷瘤小鼠体内炎性微环境中IL-6、IL-8和TNF-α的调控情况。方法 选用LLC小黑鼠60只，随机分成5组：正常组、肿瘤组、治疗1组、治疗2组、预防组，每组12只。正常组不做处理，正常喂养，共14 d；肿瘤组：单纯接种Lewis肺癌，正常喂养，共14 d；治疗1组：接种Lewis肺癌细胞后，待肿瘤大小长到0.5～1.0 cm后给予常规处理的洋虫（45 mg/kg），共14 d；治疗2组：接种Lewis肺癌细胞后，待肿瘤大小长到0.5～1.0 cm后给予真空冷冻干燥法处理的洋虫（45 mg/kg），共14 d；预防组：接种Lewis肺癌细胞当天给予常规处理的洋虫（45 mg/kg），接种肿瘤后继续洋虫喂养至处死，共14 d。接种肿瘤后第7、14天各组各处死6只C57小鼠，取其血清，ELISA法检测IL-6、IL-8和TNF-α。结果 肿瘤组的肿瘤相关炎性因子IL-6、IL-8和TNF-α明显高于正常组，治疗后的肿瘤相关炎性因子IL-6、IL-8和TNF-α明显低于治疗前（P＜0.05），治疗1组和治疗2组的肿瘤相关炎性因子表达差异无统计学意义。结论 肺癌荷瘤小鼠体内促进肿瘤生长的炎性因子明显升高，中药洋虫可以降低肺癌荷瘤小鼠体内炎性因子的表达。

洋虫；肺癌；微环境；炎性因子

洋虫（martianus dermestoides chevrolat）为拟步虫科昆虫。近年的研究[1-2]发现洋虫具有抗炎、提高机体免疫功能和抗癌的作用。肺癌是一种与炎症密切相关的恶性肿瘤。炎症与癌症的关系已经明确，且被称为“癌症的第七大特征”，炎症微环境与肿瘤进展及转移密切相关。本文通过动物模型来研究中药洋虫对肺癌荷瘤小鼠机体微环境中炎性因子的调节作用。报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料 雄性C57小黑鼠60只，体质量（16±2）g，4～6周龄，购自中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心，许可证号SCXK-（军）2007-004。LLC小鼠肺癌细胞系（Lewis细胞系）购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心。

1.2 方法 将LLC小鼠肺癌细胞系接种于C57小鼠，建立皮下移植瘤模型。待肿瘤直径达到0.5～1 cm后，随机分成5组：正常组、肿瘤组、治疗1组、治疗2组、预防组，每组12只。正常组不做处理，正常喂养，共14 d；肿瘤组：单纯接种Lewis肺癌，正常喂养，共14 d；治疗1组：接种Lewis肺癌细胞后，待肿瘤大小长到0.5～1.0 cm后给予常规处理的洋虫（45 mg/kg），共14 d；治疗2组：接种Lewis肺癌细胞后，待肿瘤大小长到0.5～1.0 cm后给予真空冷冻干燥法处理的洋虫（45 mg/kg），共14 d；预防组：接种Lewis肺癌细胞当天给予常规处理的洋虫（45 mg/kg），接种后继续洋虫喂养至处死，共14 d。

1.3 评价指标 接种肿瘤后第7、14天各组各处死6只C57小鼠，取其血清，ELISA法检测IL-6、IL-8 、TNF-a。

2 结果

治疗前后各组炎性因子变化比较 ,见表1。

3 讨论

洋虫又名九龙虫，辛、甘，温，归肺、胃、大肠经，具有温中理气、活血止痛、祛风除湿等功效，有文献将其归类于活血祛瘀药。《本草纲目拾遗》卷十虫部记载洋虫功效为：“行血分，暖胃脾，和五脏，健筋骨，去湿搜风，壮阳道，治怯弱。” 《药性考》上记载洋虫：“活吞数枚，止血，(治)劳怯” 。

随着基础研究的深入，洋虫的药用价值主要有：1）增强机体免疫功能和抗炎作用。洋虫醚提取物可以显著恢复环磷酰胺对小鼠血清溶血素生成的抑制作用；洋虫醚提取物可提高正常小鼠的迟发性超敏反应；洋虫的醚提液腹腔注射能明显抑制巴豆油引起的小白鼠耳廓炎症（P＜0.01），而且剂量越高效果越好[3-5]。2）抗癌作用。洋虫可拮抗环磷酰胺对小鼠造血器官和免疫器官的损伤作用，并对环磷酰胺的治疗效果有一定的减毒增效作用[6]；洋虫提取液能清除致癌物质亚硝酸钠、阻断体外二甲基亚硝胺合成和明显降低血清谷丙转氨酶含量[7]。3）抗衰老作用。洋虫能明显防止肝细胞中丙二醛含量的升高和超氧化物歧化酶活性的降低[8]。同时也有动物实验研究[9]表明洋虫可以延缓雌性大鼠生殖系统等衰老，提高卵巢指数和子宫指数，增加卵巢中初级卵泡、次级卵泡、成熟卵泡数量。4）改善血液循环，洋虫水提液能显著降低大鼠全血粘度，揭示了洋虫自身活血化瘀的作用机理[10]。

表1 5组治疗前后炎性因子变化比较(x±s，n = 12) %

炎症与肺癌的发生、发展及预后密切相关[11-13]。肿瘤微环境是肿瘤赖以发生发展的土壤和基础，肿瘤微环境中有对肿瘤具有促进作用的炎性因子IL-6、IL-8和TNF-α。中药具有扶正祛邪，通过多种作用机制抑制肺癌细胞生长的作用[14-16]。已有研究[17-18]发现洋虫可以降低炎性因子IL-6和TNF-α，与笔者研究结果相符。本研究发现肺癌组的小鼠体内炎性因子IL-6、IL-8和TNF-α的表达要明显高于正常小鼠组；洋虫治疗组的炎性因子表达水平明显低于肿瘤组，说明洋虫可以降低肿瘤微环境中炎性因子的表达，其具体机制有待于大样本的深入研究。

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Study on Martianus dermestoides Chevrolat improving the infammatory microenvironment of mice bearing lung cancer

WANG Hailong, CHEN Lijun, LIU Minglong, HU Xiangping, LIANG Jing, YU Jinsheng, DOU Xinli
( Department of Oncology, Dagang Hospital of Binhai New Area, Tianjin 300270, China)

Objective To investigate the changes of inflammatory microenvironment in which IL-6, IL-8 and TNF-α for mice fed with Martianus dermestoides Chevrolat. Methods 60 male LLC mice were randomly divided into fve groups: normal group, tumor group, treatment 1 group, treatment 2 group and prevention group. Each group were 12 rats. The mice was treated with Lewis lung cancer except normal group being not treated. When tumor diameter reach 0.5-1.0cm, treatment 1 group and treatment 2 group were fed with Martianus dermestoides Chevrolat. The pretreatment group was fed with Martianus dermestoides Chevrolat when treated with Lewis lung cancer. we detected the serum IL-6, IL-8 and TNF-α using ELISA method. Results Tumor associated infammatory factors IL-6, IL-8, and TNF-α in the tumor group was signifcantly higher than the normal group, and signifcantly lower after treatment, the difference was statistically significant (P＜0.05). Conclusion Inflammatory factors promote lung cancer growth signifcantly. Martianus dermestoides Chevrolat can regulate infammatory microenvironment.

Martianus dermestoides Chevrolat; lung cancer; microenvironment; infammatory factor

R282.74

A

2095-6258(2017)04-0533-03

2019-11-04）

10.13463/j.cnki.cczyy.2017.04.006

天津市卫生计生委中医中西医结合课题“中药洋虫调控肺癌小鼠肿瘤微环境的研究”（13176）。

王海龙（1976-），男，博士，副主任医师，主要从事中西医结合肿瘤综合治疗研究。