CD147和S100P在胃癌组织中的表达及临床意义

刘京运,金世禄,刘宝珍,张建

(1.滨州医学院临床学院,山东 烟台 264003;2.滨州医学院附属滨州市人民医院消化内科;3.滨州医学院附属滨州市人民医院病理科,山东 滨州 256610)

CD147和S100P在胃癌组织中的表达及临床意义

刘京运1,金世禄2,刘宝珍2,张建3

(1.滨州医学院临床学院,山东 烟台 264003;2.滨州医学院附属滨州市人民医院消化内科;3.滨州医学院附属滨州市人民医院病理科,山东 滨州 256610)

目的：探讨CD147和S100P在胃癌组织中的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学法分别检测CD147和S100P在36例胃癌组织、35例慢性胃炎组织及35例正常胃组织中的表达情况，分析CD147、S100P表达与胃癌患者临床病理特征的关系以及两者在胃癌组织中的相关性。结果：CD147、S100P在胃癌组织中的阳性表达率分别为83.3%和50.0%，与慢性胃炎组织和正常胃组织比较差异均有统计学意义(P<0.01)，而慢性胃炎组织和正常胃组织比较无显著差异(P>0.05)。CD147、S100P在胃癌组织中的表达与肿瘤分化程度、TNM分期、侵及浆膜和淋巴结转移密切相关(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示，CD147、S100P表达在胃癌组织中呈明显负相关(r=0.708，P<0.05)。结论：胃癌组织中CD147表达升高，S100P表达降低，均与肿瘤分化程度、TNM分期、侵及浆膜和淋巴结转移密切相关，提示两者可能共同参与了胃癌的浸润和转移。

CD147;S100P;胃癌;慢性胃炎;临床病理特征

胃癌为消化道常见恶性肿瘤之一，其发病率、死亡率均较高，且近年来逐渐呈年轻化趋势[1]。其早期症状不典型，当出现明显症状时多数已处于中晚期，晚期胃癌患者5年生存率仍不足20%，预后往往较差[2]。研究[3]发现，细胞外基质(ECM)和基底膜(BM)降解在肿瘤浸润、转移过程中发挥重要作用，其中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)是降解ECM和BM的关键酶。作为MMP-9的上游调控因子，CD147可诱导其释放，且在多种肿瘤组织中高表达，已成为肿瘤治疗的一个新靶点[4]。作为一种肿瘤标志物，S100钙结合蛋白(S100P)参与了细胞异常增生、细胞恶变、肿瘤细胞浸润力增强等肿瘤发生、发展的病理过程，且与部分肿瘤分期、预后密切相关[5]。本研究通过分析CD147、S100P在不同TNM分期胃癌组织中的表达情况，以期为临床诊治提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2015年7月至2016年7月在滨州市人民医院经术后病理确诊并存档的胃癌组织标本36例，所有病例均有完整资料，排除取组织前接受放化疗或激素治疗者。其中男性24例，女性12例；年龄32～75岁，平均(57.2±8.2)岁；肿瘤部位：胃食管连接处24例，胃部12例；分化程度：低分化19例，中分化10例，高分化7例；TNM分期：I期7例，II期15例，III期8例，IV期6例。另选同期慢性胃炎组织标本和正常胃组织标本各35例。慢性胃炎组织患者男性21例，女性14例；年龄29～73岁，平均(56.8±7.9)岁。正常胃组织患者男性22例，女性13例；年龄31～74岁，平均(56.4±8.1)岁。3种组织来源患者性别、年龄比较无显著差异(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

采用免疫组织化学法分别检测CD147和S100P在胃癌组织、慢性胃炎组织及正常胃组织中的表达，方法如下：经10%甲醛固定液固定所有标本，常规石蜡包埋，连续切片，厚度4 μm；在恒温干燥箱中烘烤石蜡切片，过夜，常规脱蜡、水化后采用高压锅热修复法修复抗原；依次滴加一抗、二抗孵育，采用3，3-二氨基联苯胺(DAB)显色，苏木素复染，梯度酒精脱水，二苯甲透明，中性树脂封片。分别用已知阳性切片、磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作为阳性、阴性对照。

CD147一抗为小鼠抗人CD147单抗，S100P一抗为小鼠抗人S100P单抗，均购于北京中杉金桥生物技术有限公司。二抗试剂生物素标记的羊抗鼠IgG，以及即用型快速免疫组化MaxVisionTM试剂盒均购于福州迈新生物技术开发有限公司。以上所有操作严格按照试剂盒说明书进行。

1.3 观察指标

比较CD147和S100P在胃癌组织、慢性胃炎组织及正常胃组织中的阳性表达率，分析CD147、S100P表达与胃癌患者临床病理特征的关系以及两者在胃癌组织中的相关性。

1.4 判定标准

所有切片均由2名病理科医生在未知患者临床资料的情况下独立进行观察判断。随机选择5个不同视野进行计数，所得平均值即为染色结果，以阳性细胞比例和染色强度评分为标准进行计算。阳性细胞比例<5%、5%～25%、26%～50%、>50%分别记为0～3分；细胞染色强度未着色、中度着色、高度着色分别记为0～2分。阳性细胞比例和染色强度评分的乘积即为染色结果评分，0～1分、2～3分、3～4分、5～6分依次表示阴性(﹣)、弱阳性(+)、中等阳性(++)、强阳性(+++)。

1.5 统计学分析

采用SPSS 19.0软件处理数据。计数资料比较采用四格表资料χ2单侧检验，以例数(%)表示；采用Spearman等级相关性检验分析CD147、S100P表达在胃癌组织中相关性。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3种组织中CD147、S100P的表达

CD147主要定位于细胞膜，在癌旁正常腺体及间质细胞表达较少，而在肿瘤浸润边缘部位表达较多，见图1。S100P主要定位于胞质和胞核，见图2。

CD147在胃癌组织中的阳性表达率为83.3%，显著高于慢性胃炎组织的25.7%和正常胃组织的8.6%；S100P在胃癌组织中的阳性表达率为50.0%，显著低于慢性胃炎组织的82.6%和正常胃组织的94.3%，差异均有统计学意义(P<0.01)。CD147、S100P在慢性胃炎组织和正常胃组织中的阳性表达率比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

2.2 CD147、S100P表达与胃癌患者临床病理特征的关系

在36例不同TNM分期胃癌患者中，CD147和S100P在肿瘤组织中的表达与肿瘤分化程度、TNM分期、侵及浆膜和淋巴结转移密切相关(P<0.05)，而与性别、年龄、肿瘤部位等无关(P>0.05)。见表2。

表1 3种组织中CD147、S100P的表达

表2 CD147、S100P表达与胃癌患者临床病理特征的关系

2.3 胃癌组织中CD147和S100P表达的相关性

36例胃癌患者中，CD147表达阳性30例，其中S100P表达阳性13例，表达阴性17例。Spearman等级相关性分析结果显示，胃癌组织中CD147与S100P表达呈明显负相关(r=0.708，P<0.05)。

3 讨论

目前，临床采用根治性胃切除术联合化疗治疗胃癌虽显示出较好疗效，但术后仍有17%～51%患者会发生远处转移，6%～21%会出现局部复发，且复发患者1年内生存率非常低[6]。因此，寻求有效的分子生物学标志物对于胃癌的诊治及预后评估至关重要。

CD147既是一种分类于免疫超家族的横跨膜糖蛋白，又是一种细胞表面黏附分子，通过调控及介导肿瘤细胞之间、肿瘤细胞与基质之间的关系，来调节肿瘤细胞的各种行为，如浸润、转移与侵袭等[7-8]。研究[9-10]已证实，胃癌组织中CD147表达明显上调，其表达程度与TNM分期、浸润程度、淋巴结转移密切相关，且在胃癌中的表达与癌胚抗原(CEA)具有协同作用，可协调促进胃癌的侵袭和转移。本研究结果显示，CD147在胃癌组织中的阳性表达率高达83.3%，显著高于慢性胃炎组织的25.7%和正常胃组织的8.6%，且其表达与肿瘤分化程度、TNM分期、侵及浆膜和淋巴结转移密切相关。

作为钙离子结合蛋白超家族，S100家族由21个成员组成，通过钙离子的介导与靶蛋白相结合来发挥维持细胞内钙稳态、调节蛋白质磷酸化等多种生物学功能。S100家族成员在多种肿瘤中表达异常，其中S100P可通过多种途径加速肿瘤增殖，促进血管生成和肿瘤转移[11]。例如，S100P通过影响钙离子依赖信号传导通路来改变靶蛋白的构象，从而进一步改变肿瘤细胞结构，影响肿瘤细胞的增殖、浸润与转移[12]；S100P通过与糖基化终末产物、埃兹蛋白等靶蛋白结合来参与肿瘤细胞的增殖、浸润和转移过程[13]。目前，关于S100P在胃癌组织中的表达情况仍存在一定争议。Ge等[14]研究表明，S100P在胃癌组织中表达上调，其表达程度与胃癌的TNM分期有关。贾淑芹等[15]认为，S100P在胃癌组织中表达下调，其表达与肿瘤大小、侵袭深度及转移有关。但Joghetaei等[16]通过cDNA微阵列技术对胃癌组织中基因表达谱进行检测，发现胃癌组织中未见S100P表达。本研究结果显示，S100P在胃癌组织中的阳性表达率为50.0%，显著低于慢性胃炎组织的82.6%和正常胃组织的94.3%，且其表达与肿瘤分化程度、TNM分期、侵及浆膜和淋巴结转移密切相关。通过进一步分析CD147和S100P的相关性，本研究发现胃癌组织中CD147与S100P表达呈明显负相关，表明CD147过表达可能会使S100P表达受抑，从而促进加剧胃癌浸润和转移，但具体作用机制尚需进一步研究证实。

综上所述，胃癌组织中CD147表达升高，S100P表达降低，均与肿瘤分化程度、TNM分期、侵及浆膜和淋巴结转移密切相关，提示两者可能共同参与了胃癌的浸润和转移，这些结果有待今后进一步研究证实。

[1] Ilson DH.Current progress in the adjuvant treatment of gastric cancer[J].Surg Oncol Clin N Am,2017,26(2):225-239.

[2] 赵青川,洪流.胃癌新的手术方式[J].中华普通外科杂志,2014,29(6):409-411.

[3] Kang L,Hao X,Tang Y,etal.RABEX-5 overexpression in gastric cancer is correlated with elevated MMP-9 level[J].Am J Transl Res,2016,8(5):2365-2374.

[4] Grass GD,Toole BP.How,with whom and when: an overview of CD147-mediated regulatory networks influencing matrix metalloproteinase activity[J].Biosci Rep,2015,36(1):e00283.

[5] 崔天庆,李云霞.钙结合蛋白S100P在肿瘤中的研究进展[J].医学综述,2014,20(8):1368-1370.

[6] 张乐天,鲍祖友.胃癌中CD147和基质金属蛋白酶9的表达及意义[J].医学综述,2013,19(1):163-165.

[7] Yang S,Qi F,Tang C,etal.CD147 promotes the proliferation,invasiveness,migration and angiogenesis of human lung carcinoma cells[J].Oncol Lett,2017,13(2):898-904.

[8] Kendrick AA,Schafer J,Dzieciatkowska M,etal.CD147:a small molecule transporter ancillary protein at the crossroad of multiple hallmarks of cancer and metabolic reprogramming[J].Oncotarget,2017,8(4):6742-6762.

[9] 沈建康,袁建明,蔡中瑞.CEA、CA199、CA724及HSP60在胃癌患者血清中的表达及应用价值[J].川北医学院学报,2016,31(6):848-850.

[10]高文华,付勇,周萍,等.CD147、CEA在胃癌组织中的表达及预后价值[J].现代肿瘤医学,2016,24(17):2750-2754.

[11]Bresnick AR,Weber DJ,Zimmer DB.S100 proteins in cancer[J].Nat Rev Cancer,2015,15(2):96-109.

[12]Hamada S,Satoh K,Hirota M,etal.Calcium-binding protein S100P is a novel diagnostic marker of cholangiocarcinoma[J].Cancer Sci,2011,102(1):150-156.

[13]张齐,胡浩霖,石欣,等.S100PshRNA慢病毒载体的构建及其对胃癌MGC-803细胞生物学行为的影响[J].东南大学学报(医学版),2015,34(1):65-70.

[14]Ge F,Wang C,Wang W,etal.S100P predicts prognosis and drug resistance in gastric cancer[J].Int J Biol Markers,2013,28(4):e387-e392.

[15]杜雯文,王爱鱼,宁宝森.Caveolae蛋白与胃癌发生发展的表现遗传学关系[J].川北医学院学报,2013,28(6):596-599.

[16]Joghetaei N,Akhyari P,Rauch BH,etal.Extracellular matrix metalloproteinase inducer (CD147) and membrane type 1-matrix metalloproteinase are expressed on tissue macrophages in calcific aortic stenosis and induce transmigration in an artificial valve model[J].J Thorac Cardiovasc Surg,2011,142(1):191-198.

(学术编辑：贺国斌)

本刊网址：http：//www.nsmc.edu.cn

作者投稿系统：http：//noth.cbpt.cnki.net

邮箱：xuebao@nsmc.edu.cn

Expression of CD147 and S100P in gastric cancer tissues and its clinical significance

LIU Jing-yun1,JIN Shi-lu2,LIU Bao-zhen2,ZHANG Jian3

(1.SchoolofClinicalMedicine,BinzhouMedicalUniversity,Yantai264003;2.DepartmentofGastroenterology,BinzhouPeople’sHospitalAffiliatedtoBinzhouMedicalUniversity,Binzhou256610;3.DepartmentofPathology,BinzhouPeople’sHospitalAffiliatedtoBinzhouMedicalUniversity,Binzhou256610,Shandong,China)

Objective：To explore the expression of CD147 and S100P in gastric cancer tissues and its clinical significance.Methods：Immunohistochemical method was used to detect the expression of CD147 and S100P in tissues from 36 patients with gastric cancer,35 with chronic gastritis and 35 with normal stomach,respectively,so as to analyze the relationship between the expression of CD147 and S100P with the clinical pathological characteristics of patients with gastric cancer as well as their relevance in gastric cancer tissues.Results:The positive expression rates of CD147 and S100P were 83.3% and 50.0% in gastric cancer tissues,and there were significant differences when compared with the rates in tissues of chronic gastritis and normal stomach (P<0.01).However,there was insignificant difference in the rates between tissues of chronic gastritis and normal stomach (P>0.05).The expression of CD147 and S100P in gastric cancer tissues were closely related with tumor differentiation degree,TNM stages, and presence of invasion to serosa and lymph node metastasis (P<0.05).Spearman correlation analysis results showed that CD147 and S100P had significantly negative association in gastric cancer tissues (r=0.708,P<0.05).Conclusion:CD147 expression increases while S100P expression decreases in gastric cancer tissues,which has close association with tumor differentiation degree,TNM stages,and presence of invasion to serosa and lymph node metastasis,indicating that both CD147 and S100P have participated in the infiltration and metastasis of gastric cancer.

CD147;S100P;Gastric cancer;Chronic gastritis;Clinical pathological characteristics

10.3969/j.issn.1005-3697.2017.04.029

2017-01-15

刘京运(1990-)，男，硕士研究生。E-mail:1367323868@qq.com

金世禄，E-mail:jinshiluluck@163.com

时间：2017-8-15 11∶26 网络出版地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/51.1254.R.20170815.1126.058.html

1005-3697(2017)-04-0583-04

R735.2

A