张敏,吴建英,吴集才
(景德镇市疾病预防控制中心,江西景德镇333000)
景德镇市490例HIV-1抗体阳性者免疫印迹带型分析
张敏,吴建英,吴集才
(景德镇市疾病预防控制中心,江西景德镇333000)
目的对景德镇市490例HIV-1抗体阳性者的免疫印迹带型进行分析。方法采用蛋白免疫印迹试验对标本进行确证检测,分析不同性别、不同年龄组的带型差异。结果gp160、gp120、p66、p55、p51、gp41、p39、p31、p24、p17全部阳性的共142例,条带gp160、gp120出现率最高为100%,p24为99.2%,gp41为95.7%,p55出现率最低为43.9%;条带gp41和p17在男女性别中的出现率差异有统计学意义(P<0.05),条带p31在不同年龄组间的出现率差异有统计学意义(P<0.05)。结论gp160、gp120、gp41、p24是判定HIV-1抗体阳性的重要条带,本市发现的HIV感染者多数在AIDS期前。
艾滋病病毒;感染者;免疫印迹带型
人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体检测是诊断人感染HIV的主要依据,免疫印迹试验(Western Blot)则是用于HIV抗体确证检测的主要方法。艾滋病病毒颗粒的结构蛋白基因包括:包膜蛋白(env)gp160、gp120、gp41,核心蛋白(gag)p55、p24、p17、p39,逆转录酶蛋白(pol)p66、p51、p31。当人感染HIV后,机体则会对上述HIV蛋白产生相应的抗体,其反应结果会在印迹试验条带中出现不同的带型组合。为了解我市HIV感染者WB带型分布情况,笔者对490例HIV-1抗体阳性者的带型进行分析,报告如下。
1.1 样本来源景德镇市疾病预防控制中心HIV确证实验室检测的490例HIV-1抗体阳性样本,样本主要来源于辖区各艾滋病筛查实验室上送的HIV抗体待确证的血清标本。
1.2 检测试剂新加坡MP生物医学亚太私人有限公司生产的人类免疫缺陷病毒HIV1+2免疫印迹试剂。
1.3 检测方法按照试剂盒说明书的要求,采用Western Blot免疫印迹技术检测。
1.4 判定标准检测条带同时符合以下2条标准即可判HIV-1抗体阳性:⑴至少有2条env带(gp160/gp120和gp41)出现,或至少1条env带和p24带同时出现;⑵符合试剂盒提供的阳性判定标准。
1.5 统计学分析采用SPSS 20.0进行数据统计,计数资料采用χ2检验分析,P<0.05为差异有统计学意义。
2.1 带型分布HIV-1抗体阳性样本条带中,gp160和gp120出现的次数最多,为100%,其次p24为99.2%,gp41为95.7%,p66为93.3%,p51为91.0%,p31为84.7%,p17为72.9%,p39为48.8%,p55为43.9%。HIV-1抗体阳性样本中10条带型gp160、gp120、p66、p55、p51、gp41、p39、p31、p24、
p17全部出现的共142例,占29.0%;出现gp160、gp120、p66、p51、gp41、p39、p31、p24、p17带型共65例,占13.3%;出现gp160、gp120、p66、p55、p51、gp41、p31、p24、p17带型共39例,占8.0%。
2.2 不同性别HIV感染者WB带型分布490例HIV-1抗体阳性样本中,男性413例,占84.3%,女性77例,占15.7%。条带gp41和p17在男女性别中的出现率差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。
2.3 不同年龄组HIV感染者WB带型分布490例HIV-1抗体阳性样本中,<20岁年龄组9例,20~39岁年龄组153例,40~59岁年龄组170例,>60岁年龄组158例。条带p31在4个年龄组间的出现率差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。
艾滋病(AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(HIV)侵入机体,导致人体免疫力低下,容易产生各种疾病的一种死亡率极高的传染病[1]。HIV抗体检测是诊断机体是否感染HIV的重要手段,免疫印迹实验则是现阶段确证HIV感染的重要检测方法。艾滋病病毒的结构基因主要有3个编码区:env、pol、gag,每个编码区又含有多个蛋白,机体一旦被感染,就会因为这些病毒蛋白的浓度、抗原性的强弱不同,对其产生的免疫应答则不同,结果导致WB条带中出现不同的带型组合,单个条带的阳性百分率也不相同[2-5]。
表1 不同性别HIV-1抗体阳性者WB带型分布
表2 不同年龄组HIV-1抗体阳性者WB带型分布
本实验室检测的490例HIV-1抗体阳性条带中,HIV包膜蛋白抗体gp160和gp120出现率均为100%,gp41为95.7%,表明包膜蛋白抗体是确证HIV感染的必要条件,与相关报道一致[6-8]。据文献报道[9],HIV感染者进入AIDS期后,由于机体内病毒大量复制导致消耗过多p24抗体,这些变化则反映在WB条带上p24带的缺失,本次数据p24条带的出现率为99.2%,表明绝大部分感染者都是被发现在AIDS期前,这可能与目前不断扩大艾滋病监测与艾滋病网络实验室建设策略相关[10]。除gp160、gp120条带出现率100%外,其它条带均有不同程度的缺失,p55出现率仅43.9%,有一半多感染者p55带缺失,gp160与p55同是前体蛋白,但两者出现率存在明显的差别,估计与他们在宿主细胞中的稳定性差异相关,gp160的糖基化能够抵抗消化酶的作用,增加了在胞浆中的稳定性,p55没有糖基化[11,12]。gp41和p17在不同性别带型中出现率有统计学差异,有报道认为可能与不同性别感染者的传播途径有关系;40~59岁年龄组p31的出现率明显高于小于20~39岁年龄组,可能与不同年龄的免疫状态和传播途径有关[13]。
本组数据显示,490例HIV-1抗体阳性条带中出现不同条带的缺失,缺失率最大的为p55带,其次为p39带,HIV抗体阳性者的p55带的缺失可能与疾病进展的速度相关,提示HIV抗体在疾病不同病程阶段可能发生变化[14,15]。因此,免疫印迹实验作为国内HIV抗体确证的金标法,其结果不仅局限于判定HIV抗体阳性与否,也有助于从人感染HIV后的免疫反应抗体在不同个体出现的不同血清学特征中发现与HIV疾病相关的信息,更好的为临床诊断和艾滋病防控工作提供依据。
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R512.91,R446.62
A
1674-1129(2017)04-0484-02
10.3969/j.issn.1674-1129.2017.04.009
2016-12-21;
2017-06-02)
张敏,女,1980年生,本科,主管技师,主要从事艾滋病检测工作。
吴建英,女,1965年生,本科,副主任技师,主要从事艾滋病检测工作。E-mail:jdzwjy@126.com