蒲黄中镁盐、钙盐快速检查方法的建立

李玉凤 林春燕 董 媛 李忠琼 张雯洁

云南省食品药品监督检验研究院，云南 昆明 650011



蒲黄中镁盐、钙盐快速检查方法的建立

李玉凤 林春燕 董 媛 李忠琼 张雯洁*

云南省食品药品监督检验研究院，云南 昆明 650011

目的：建立蒲黄中镁盐、钙盐快速检查方法。方法：镁盐的检查方法为取供试品将液，加氢氧化钠试液，不得出现明显浑浊。钙盐的检查方法为取供试品溶液，加甲基红指示液2滴，用氨试液中和，再滴加盐酸至恰呈酸性，加草酸铵试液，不得出现明显浑浊。结果：检查蒲黄134批次，其中4批样品检测结果为阳性。结论：采用化学反应方法可快速、简便地检查出蒲黄中是否掺入镁盐、钙盐。

蒲黄；镁盐；钙盐；快速检查

中药作为我国的传统药物，使用历史悠久，在疾病的预防和治疗中发挥着重要作用。但近年来少数不法分子和商家向中药材中添加其他物质，对患者的用药安全造成了隐患，对中医药的信誉造成较大影响，甚至对其发展造成一定的阻碍[1-3]。

药品快速检验技术，具有快速、准确、环保、易于推广的特点。其可排除或抑制干扰因素，突显目标成分的特性，以获得高置信度的结果。可在简易的实验室、移动实验室或监督现场使用，并在较短时间内完成，无需苛刻的试验条件[4]。其中理化鉴别技术具备检验快速、方法简便、结果准确的特点，被广泛运用于快检中[5-6]。

蒲黄为香蒲科植物水烛香蒲TyphaangustifoliaL．、东方香蒲TyphaorientalisPresl或同属植物的干燥花粉，收载于《中国药典》2015年版一部，具有止血、化瘀、通淋的功效。目前市售蒲黄的掺伪掺假现象严重，严重影响了药材及饮片质量，故对蒲黄进行非法添加检查具有必要性和重要性。在蒲黄掺伪掺假现象中，违法染色在文献中多有报道[7-8]，而增重剂是不法商家用来增加药材重量以谋取非法利益的另外一种手段，其中以蒲黄中加入镁盐、钙盐增重最为常见。其他药材增重剂的鉴别主要是凭借检验者经验或显微鉴别等方法来进行，但易受到人员和设备的限制。现笔者对蒲黄的增重鉴别方法进行研究，建立一种快捷、高效、简便的理化快检方法，并用电感耦合等离子体原子发射光谱法进行验证[9]。该快检方法可对蒲黄是否掺入钙盐、镁盐进行快速初筛，有针对性地进行抽查检验，提高靶向抽验能力[10]，为实际工作提供一定的技术支撑。

1 仪器与材料

1.1 仪器 PS1000电感耦合等离子体发射光谱仪(美国利曼-来伯斯公司)。

1.2 材料 醋酸镁(中国医药集团上海化学试剂公司，批号：F20020715)；氯化钙 (国药集团化学试剂有限公司，批号：20011160)；氢氧化钠(上海试四赫维化工有限公司，批号：1007101)；硫酸(重庆川东化工集团有限公司，批号：20150401)；盐酸(重庆川东化工集团有限公司，批号：20150901)。

2 方法与结果

2.1 阳性样品及检出限度的确定 选择2批次总灰分检查值均为35%的蒲黄样品，根据《中国药典》2010年版一部附录中的一般鉴别试验方法，筛查结果提示疑似含有大量的镁离子和钙离子，对此2批次样品及3批次正常样品(按法定标准检验符合规定)，采用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)进行验证并测定其镁离子和钙离子的含量。

2.1.1 仪器条件与试剂 电感耦合等离子体发射光谱仪频率40.68MHz，RF发生器。功率：1.0KW，冷却气：16 L/min，辅助气：0.5L/min，雾化器压力：276KPa，样品提升量：1.0mL/min。观测高度：采用Mn 10μg/mL的标准溶液257.610nm进行最佳观测位置调整。元素测定波长：钙为317.933nm，镁为285.213nm；实验用水为去离子水。试剂为盐酸(1+1)(ρ=1.19g/mL)。

2.1.2 标准溶液和工作曲线

2.1.2.1 钙标准溶液(1mL溶液含Ca 0.1mg) 用移液管移取10mL钙标准溶液(1mg/mL)，置于100mL容量瓶中，加10mL盐酸(1+1)，用水稀释至刻度，摇匀。此溶液用时现配。

2.1.2.2 镁标准溶液(1mL溶液含Mg 0.1mg) 用移液管移取10mL镁标准溶液(1mg/mL)，置于100mL容量瓶中，加10mL盐酸(1+1)，用水稀释至刻度，摇匀。此溶液用时现配。

2.1.2.3 曲线的绘制 分别移取钙标准溶液和镁标准溶液0、2、4、6、8、10mL置于一组100mL容量瓶中，加10mL盐酸(1+1)，用水稀释至刻度，摇匀。即得Ca、Mg元素浓度分别为0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0μg/mL的标准溶液。在相同测定条件下测定，以被测元素浓度为横坐标，各元素谱线强度为纵坐标绘制工作曲线。Ca元素线性相关系数为0.9999，Mg元素线性相关系数为0.9999。

2.1.3 实验方法 精密称取样品0.1g置100mL容量瓶中，加10mL盐酸(1+1)，用水稀释至刻度，摇匀，待测。随行做空白实验。

2.1.4 元素检出限 用Ca元素和Mg元素的的工作曲线数据，以空白实验6次测定结果的标准偏差的3倍做检出限，结果Ca元素的检出限为0.021μg/mL，Mg元素的检出限为0.001μg/mL。

2.1.5 精密度实验 选同一个样品，按本方法重复测定6次。6次测定结果Ca元素RSD为0.47%，Mg元素RSD为0.30%。

2.1.6 方法回收率 在2个含Ca、Mg的样品中加入一定量的Ca、Mg标准液，按2.1.3实验方法溶解后测定计算回收率得Ca的回收率为99.2%，Mg的回收率为98.7%。

2.1.7 验证结果 正常蒲黄样品镁离子含量约0.2%，钙离子含量约0.5%，而2批次疑似样品镁离子含量分别为3.75%和3.13%，钙离子含量分别为7.01%和4.94%。

结合探索性研究中非法染色检查结果，此2批次样品均检出金胺O和皂黄染色，由此证明：疑似样品含有超正常样品10倍以上的镁离子和钙离子，确定系人为加入，涉嫌掺假、非法增重、非法染色，为镁盐、钙盐的阳性样品。

表1 蒲黄样品中镁离子与钙离子的测定结果

2.1.8 检出限度确定 根据镁、钙离子的测定结果，确定其限度以正常样品的10倍计，即镁离子不得过2%，钙离子不得过5%。

2.2 对照溶液的制备 精密称取醋酸镁0.0907g，加入0.01mol/L盐酸10mL，再加水10mL，作为镁离子对照溶液A(含镁离子0.51mg/mL)；精密称取氯化钙0.09120g，加入0.01mol/L盐酸10mL，再加水10mL，作为钙离子对照溶液A(含钙离子1.24mg/mL)。

2.3 化学反应的选择及检查浓度的确定 参照《中国药典》2010年版一部附录中镁盐和钙盐的化学鉴别，综合考虑检验成本，选择以下两个化学鉴别反应。①取供试品溶液，加氢氧化钠试液，即生成白色沉淀。分离，沉淀分成两份，一份中加过量的氢氧化钠试液，沉淀不溶；另一份中加碘试液，沉淀转成红棕色(镁盐)。②取供试品溶液(1→20)，加甲基红指示液2滴，用氨试液中和，再滴加盐酸至恰呈酸性，加草酸铵试液，即生成白色沉淀；分离，沉淀不溶于醋酸，但可溶于稀盐酸(钙盐)。

参照补充检验方法(批准件编号2010002)白鲜皮(饮片)中镁盐、铝盐的检查方法，确定化学反应。①取供试品将液，加氢氧化钠试液，不得出现明显浑浊(镁盐)。②取供试品溶液，加甲基红指示液2滴，用氨试液中和，再滴加盐酸至恰呈酸性，加草酸铵试液，不得出现明显浑浊(钙盐)。

分别取镁离子对照溶液A和钙离子对照溶液A稀释至不同浓度，观察反应状态以确定稀释倍数，结果见表2。

表2 钙、镁离子检查阳性浓度确定表

由表2可知，镁离子反应的检查阳性浓度为0.25mg/mL，钙离子反应的检查阳性浓度为0.03mg/mL。

2.4 供试品溶液的制备 根据镁离子含量为2%折算，取样量1g，加溶剂80mL，镁离子含量为0.25mg/mL；钙离子含量为5%折算，取样量1g，加溶剂1600mL，钙离子含量为0.03mg/mL。

为了保证取样的均匀性，将取样量定为2g，确定蒲黄中镁盐、钙盐检查方法。取本品2g，加稀盐酸溶液40mL，搅拌，滤过，取续滤液5mL，加水至20mL，混匀，作为供试品溶液。

2.5 快检方法与结果 ①取供试品溶液2mL，加氢氧化钠试液1.5mL，稍放置，不得出现明显浑浊。②取供试品溶液2mL，加水至40mL，混匀，取2mL，加甲基红指示液1滴，滴加氨试液至溶液由红色变为黄色，加草酸铵试液10滴，不得出现明显浑浊。对所有134批次蒲黄样品进行检查，结果共有4批次样品呈阳性反应，不符合规定。

3 讨论

在溶剂的选择中，取3份2g的同一样品，分别加入1mol/L盐酸溶液、稀盐酸，6mol/L盐酸溶液40mL溶解，滤过，加水稀释后分别进行钙、镁的反应，结果稀盐酸沉淀反应较明显，稀盐酸溶液配制也较为简单，因此选择稀盐酸溶液来制备供试品溶液。

实验设定的限度为样品中镁离子含量超过2%，钙离子含量超过5%可检出。也就是说限定了阳离子，所以根据掺伪物中阴离子的不同，能够检出的掺伪比例也会有变化。以最为常见的掺伪物碳酸钙和硫酸镁为例，碳酸钙掺伪比例为12.5%可检出，而硫酸镁掺伪比例为10%时可检出(根据质量分数计算可得)。

中药材增重既影响中药饮片计量的准确使用，又影响中药的临床疗效。且使用工业无机盐进行增重，可能危害人民群众的身体健康，应予以严厉打击。

[1]符江,荆文光,章军,等.中药中非法添加问题研究现状与分析[J].中草药.2014，45(3)：437.

[2] 李争.掺杂、掺伪的中药饮片鉴别方法探讨[J].北方药学, 2016，13(4):135.

[3] 魏引平,徐虹.从药材种植、饮片加工、质量标准三个重点环节谈中药质量管理[J].中国药事, 2015，29(1):36.

[4] 王震红,杨永刚,丛佳.浅谈快检技术在食品药品检验中的应用[J].中国药事，2012(11)：1222.

[5] 薛玉梅,黄丽丹,王鼎.六味地黄丸系列中成药快检方法研究[J].药物分析杂志，2009，29(2):282.

[6] 薛玉梅,黄丽丹,王鼎,等.杞菊地黄丸快检方法研究[J].安徽中医学院学报， 2008，27(5):46.

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[8] 胡青,孙健,张甦,等.中药中48种非法染色色素的TLC法检测[J].中国医药工业杂志，2015，46(7):695.

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[10]戚健良，陈劲松.充分利用快检技术加速药品靶向抽验[J].中国药师， 2004，9(7)：740.

The Rapid Identification Of The Magnesium Salt and Calcium Salt In Pollen Typhae

LI Yufeng LIN Chunyan DONG Yuan LI Zhongqiong ZHANG Wenjie*

Yunnan Institute for Food and Drug Control, Kunming 650011，CHINA

Objective To establish a rapid specific method for the identification of magnesium salt and calcium salt in pollen Typhae and carried out methodology validation.Methods Check method of magnesium salt for the sample liquid, adding sodium hydroxide solution, there shall be no obvious turbidity.Check method of calcium salt for the testsolution, plus 2 drops of methyl red indicator solution, using ammonia solution and adding hydrochloric acid to it is acidic, with ammonium oxalate solution, no obvious turbidity.Results 134 samples of Typhae pollen with magnesium salt and calcium salt check, 4 samples of Typhae pollen in which the test result is positive.Conclusion This study provided a new reference for the rapid detecting of magnesium salt and calcium salt added into pollen typhae.

Pollen Typhae; Magnesium Salt；Calcium Salt; Rapid Identification

李玉凤(1980-)，女，汉族，本科，研究方向为药品质量标准研究。E-mail:762726853@qq.com

张雯洁(1965-)，女，汉族，本科，主任药师，研究方向为中药、民族药质量标准研究。 E-mail: zwj0871@126.com

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1007-8517(2017)13-0019-03

2017-05-25 编辑：穆丽华)