分析核酸检验与酶联免疫检测血液病毒的应用及检验准确率

虢娟 邓凯航 林雪珍 赖艳娥 李尚烽

分析核酸检验与酶联免疫检测血液病毒的应用及检验准确率

虢娟 邓凯航 林雪珍 赖艳娥 李尚烽

目的分析核酸检验与酶联免疫检测血液病毒的应用及检验准确率。方法25087份无偿献血者标本, 有24383份标本做完酶联免疫检测后又进行核酸检验。比较两种检验准确率。结果24383份标本, 其中酶联免疫检测阳性130份, 准确率为0.53%, 核酸检验阳性32份, 准确率为0.13%, 两种检验方法准确率对比差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论通过核酸检验对血液病毒进行检测具有较高的准确率和灵敏度, 能大大减少误检、漏检的发生率, 值得在临床推广应用。

核酸检验；酶联免疫检测；血液病毒；检验准确率

输血是艾滋病病毒(HIV)、乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)等疾病的重要传播途径之一, 在输血之前对血液进行抗体检测或抗原检测, 是控制疾病传染的有效方式［1］。目前, 我国《血站技术操作规程》(2015版)规定血液检测HIV、HBV和HCV感染标志物应采用2次血清学检测和1次核酸检验。本次研究分析核酸检验与酶联免疫检测血液病毒的应用及准确率, 取得了良好的成果。报告如下。

1 资料与方法

1. 1一般资料 选取本站2016年1～12月25087份无偿献血者标本, 对无偿献血者检测24383份, 所有标本均经通过梅毒或转氨酶检测合格。每个标本根据每项试验的技术要求,采用相应类型的真空采血管留取, 放置在2～8℃下进行保存。5 ml EDTA-K2抗凝管的标本应当在24 h内分离血浆, 通过酶联免疫法进行检测；5 ml无菌、无DNA酶、无RNA酶的EDTA-K2分离胶真空采血管, 应当在4 h内分离血浆, 进行核酸检验。

1. 2方法 对5 ml EDTA-K2抗凝管进行室温离心, 分离血浆, 利用全自动加样仪(Tecan EVO)自动加样, 通过全自动酶联免分析仪进行检测, 记录检测结果。对5 ml的EDTAK2分离胶抗凝管标本进行20 min的离心, 现场保存温度在2～8℃, 运输2～10℃。当血液标本经过酶联免疫检测合格后, 放置在加样仪样品的条架上。WanTag核酸血液筛查系统检测原理(6混样)：采用特异性磁珠核酸纯化技术, 提取HBV、HCV、HIV-1病毒的核酸；利用实时荧光定量探针法设计特异性引物及荧光探针, 并结合竞争性内标技术检测人血清或血浆中的HBV、HCV、HIV-1病毒核酸。

1. 3统计学方法 采用SPSS12.0统计学软件对数据进行统计分析。计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

24383份标本, 其中酶联免疫检测阳性130份, 准确率为0.53%, 核酸检验阳性32份, 准确率为0.13%, 两种检验方法准确率对比差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表124383份标本两种检测方法结果对比(n, %)

3 讨论

多数传染病都可以通过血液进行传播, 其中乙型肝炎、艾滋病是传播能力较强的一类病症, 会严重影响人们的身体健康, 降低生活质量［2］。因此, 对无偿献血者进行血液检验有着重要的意义, 是降低输血可能存在的传播性风险的必要手段。过去我国大多数血站只用2次酶联免疫检测方式进行检测［3-5］。该检测方式存在一定的缺陷, 检出率较低, 常出现误检、漏检的情况, 导致血液检查有效率不高, 为血站的治疗埋下了安全隐患。

血液病毒感染患者在临床上大多无明显症状, 短期内也不会发病, 同时部分患者的抗体浓度较低, 无法进行有效的检测, 因此酶联免疫检测的适用性不强。若有误检、漏检患者的血液进入到其他患者体内, 会直接导致血液污染, 甚至出现交叉感染的情况。血液病毒指的是HIV、HBV、HCV等,这些病毒会在人体中潜伏较长的时间, 有些患者甚至不知道已经被感染。一旦这些患者进行献血, 会大大增加血液病毒的传播性, 这也是目前血液病毒传播的主要途径之一［6-9］。酶联免疫检测主要是对患者血液的病毒抗原进行检测, 若患者存在血液病毒, 分析仪在对样本分析后, 波长会出现一定的变化, 一般临床医师会根据变化的具体数值, 对患者的情况进行判断。但血液病毒会在人体中潜伏, 只有当潜伏到一定时间后再能被检测, 这段时间也被称作窗口期。对于窗口期的血液病毒, 该检测方法无法进行有效的检测, 例如HIV在人体内的潜伏时间格外长, 一旦出现误检、漏检, 会严重影响到其他患者的生存质量, 为疾病的传播埋下了隐患。另一方面, 酶联免疫检测还会受到气温的影响。HBV感染一般和季节、温度有关, 冬季气温较低, 人体内部乙型肝炎表面抗原(HBsAg)活性较低, 表达能力较差, 因此在检测时不能仅对HBsAg进行筛查, 需要给予一定的重视。

核酸检验采用病毒核酸扩增技术, 直接让病毒扩增到阳性汇集孔, 对各类血液病毒的灵敏性均较高, 即使血液病毒存在于窗口期, 也能进行有效的检测, 漏检、误检率较低,阳性检出率较高。随着医学技术的不断发展, 核酸检测在我国也有了广泛的应用, 尤其是在血站血液检测中, 优势明显。但从整体上来看, 我国核酸检验技术起步较晚, 技术水平和国外相比还有一定差距, 从临床时间来看, 有必要将其作为血液筛查的主要手段, 重视其发展与应用［10］。

本次研究中, 分别通过核酸检验与酶联免疫法进行检测。结果显示, 酶联免疫法检测准确率低于核酸检验, 差异有统计学意义(P＜0.05)。

综上所述, 通过核酸检验对血液病毒进行检测具有较高的准确率和灵敏度, 能大大减少误检、漏检的发生率, 值得在临床推广应用。

［1］ 钟万芬, 唐小勇. HBsAg 和抗-HCV 酶联免疫检测与血液病毒核酸筛查技术之间的相关性分析.肝脏, 2015, 20(11):876-878.

［2］ 刘俊才.核酸检验与酶联免疫检测血液病毒的应用及检验准确率对比研究.中国保健营养, 2016, 26(18):56.

［3］ 夏丽娜.乙型肝炎病毒的液相杂交技术在聚合酶链反应酶联免疫检测的应用探讨.现代预防医学, 2012, 39(17):4525-4527.

［4］ 吕蓉, 王伦善, 盛琪琪, 等.无偿献血者HIV-1抗体蛋白印迹确认与核酸检测结果分析.临床输血与检验, 2012, 14(4):308-311.

［5］ 郑显良, 吴娇婵, 赵静, 等.血液病毒核酸检测在集中化检测实验室的应用.检验医学与临床, 2013, 10(18):2458-2459.

［6］ 刘德春, 孙波, 徐群, 等. 核酸检测技术与酶联免疫检测技术在血液筛检中的初步应用比较. 中国输血杂志, 2007, 20(1):43-45.

［7］ 赵俊鹏, 田喜凤, 贾幼珍, 等. 血液病毒核酸检测与酶联免疫检测比较研究. 中国病原生物学杂志, 2011(10):732-735.

［8］ 曾劲峰, 李活, 许晓绚, 等. 核酸检测阳性标本与酶联免疫吸附试验分析研究. 国际检验医学杂志, 2010, 31(6):557-558.

［9］李玉泉. 核酸检测与酶联免疫检测血液病毒的比较分析. 中国卫生产业, 2016, 13(31):45-47.

［10］ 郭振秀, 李凌云. 采用核酸检验与酶联免疫检测血液病毒的应用及准确率对比分析. 世界最新医学信息文摘(连续型电子期刊), 2016, 16(12):8-9.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.13.028

2017-04-06］

511518 清远市中心血站