CIK细胞干预非小细胞肺癌的临床观察

刘 冰,武文平,韩 冰,申方臣,刘建瑞,佟 瑞

(秦皇岛市中医医院，河北 秦皇岛066000)

CIK细胞干预非小细胞肺癌的临床观察

刘 冰,武文平,韩 冰,申方臣,刘建瑞,佟 瑞*

(秦皇岛市中医医院，河北 秦皇岛066000)

目的 观察CIK细胞治疗中晚期非小细胞肺癌的临床疗效。方法 54例患者分成两组，研究组28例(化疗+CIK治疗)，对照组26例(单纯化疗)，观察两组患者治疗前后的临床疗效、毒性反应、生活质量、生存分析、免疫功能等指标，并进行统计学分析。结果 研究组有效率(RR)和疾病控制率(DCR)分别为35.7%与78.6%，高于对照组30.8%与69.2%，但差异无统计学意(P>0.05)；研究组KPS评分提高率为46.4%(13/28)，明显高于对照组23.1%(6/26)，差异有统计学意义(P<0.05)；研究组在CIK细胞治疗前后及与对照组治疗后相比，外周血CD3+、CD4+及CD4+/CD8+绝对计数明显增加，差异有统计学意(P<0.05)；CIK细胞治疗期间，患者无明显毒副反应。结论 CIK细胞治疗可改善非小细胞肺癌患者的生活质量，提高患者免疫功能，且无明显毒副反应。

非小细胞肺癌；CIK细胞；临床疗效

非小细胞肺癌( non-small cell lung cancer，NSCLC) 是我国常见恶性肿瘤之一，占肺癌总数的80%左右，大部分患者确诊时已属晚期，失去手术治疗的机会，生存率低，生存期短[1]。放疗和化疗虽仍是目前治疗中晚期非小细胞肺癌的主要手段，疗效被临床所肯定，但其毒副作用较大，对机体的免疫功能有一定的损伤[2]，影响患者的生存质量[3,4]。肿瘤的生物免疫治疗抗瘤活性高、毒副作用小，已广泛应用于临床。CIK细胞( cytokine-induced killer cells，细胞因子诱导的杀伤细胞)具有在体外可以大量扩增、对肿瘤细胞直接杀伤作用以及能调节宿主免疫功能等优势，被认为是新一代抗肿瘤过继免疫治疗的首选方案[5]。本研究选取河北省秦皇岛市中医院肿瘤科中晚期非小细胞肺癌患者28例进行CIK治疗，并与26例对照组进行疗效对比分析，旨在研究探讨CIK治疗中晚期非小细胞肺癌的临床效果。

1 资料与方法

1.1 研究对象的纳入标准

纳入标准：所有患者均经组织病理学或细胞学检查证实确诊；预计生存期≥3个月，KPS≥60分；全身状况良好，无严重的重要脏器损害，无不可控制的感染；无严重过敏体质及哺乳期和妊娠期患者；所有患者均为自愿接受CIK细胞治疗，并签署治疗知情同意书。

1.2 一般资料及分组

收集2014年3月至2015年12月我院肿瘤科符合纳入标准的中晚期非小细胞肺癌患者共54例，其中男30例，女24例，年龄39-76岁，中位年龄52.5岁。其中临床分期IIB期4例，IIIA期11例，IIIB期15例，IV期24例。组织学分型腺癌18例，鳞癌23例，混合癌8例，大细胞癌5例。所有患者均对本次研究知情同意，并根据是否接受CIK细胞治疗分为研究组28例与对照组26例。两组患者一般资料比较具有均衡性，差异无统计学意义(P>0.05)。

1.3 CIK细胞制备及治疗方法

研究组患者在化疗结束72 h后，于清晨安静状态下肝素钠抗凝管抽取外周血50-100 ml，送至我院生物治疗中心实验室进行单个核细胞(PBMC)分离、纯化后，加入细胞培养液(所用CIK培养试剂均购自北京五康生物公司)并置于37℃、5%CO2培养箱内培养扩增。至14天左右，当CIK细胞总数达到5×109个以上，检测细胞内毒素、细菌、真菌、支原体等指标均为阴性且台盼蓝染色计算细胞活率大于95%后，收集CIK细胞冻存备用。研究组患者在化疗结束72 h后开始CIK细胞回输治疗。无菌操作下，将复苏的CIK细胞用生理盐水洗涤2-3次，加入20%人血白蛋白5 ml，再重悬于200 ml生理盐水。患者每日输一次，每次细胞数量1×109左右，连续输5天为一个疗程，每次细胞发出后确保2 h内回输完毕。对照组仅接受常规化疗方案。

1.4 观察指标

1.4.1 疗效评价 所有患者均在接受2个疗程以上治疗后进行疗效评价。按照实体瘤疗效评价标准(RECIST)分为完全缓解(complete remission，CR)、部分缓解(partial remission，PR)、稳定( stable disease，SD)和进展(progressive disease，PD)。有效率(response rate，RR)=(CR+PR)/总例数×100%，疾病控制率(disease control rate，DCR)=(CR+PR+SD)/总例数×100%。

1.4.2 安全性评价 对比观察CIK细胞回输过程中及回输后患者有无不良反应，如发热等。并在一个疗程完成后分别检测2组患者的血常规、肝肾功能等指标。

1.4.3 生活质量评价 应用卡氏评分(KPS)对比观察研究组(CIK治疗组)与单纯化疗组患者生活质量改善情况。

1.4.4 生存分析 对比分析研究组与对照组的无进展生存期(PFS)。PFS指从纳入研究开始到疾病出现进展或死亡时间。

1.4.5 免疫指标 应用流式细胞仪检测2组患者治疗前后的T细胞亚群改变，并对比分析。

1.5 统计学分析

2 结果

2.1 临床疗效评价

两组患者在治疗2个疗程后进行临床疗效评价，研究组有效率(RR)和疾病控制率(DCR)分别为35.7%与78.6%；对照组为30.8%与69.2%。经统计学分析，两组有效率与疾病控制率差异无统计学意义(P>0.05)，详细比较见表1。

表1 研究组与对照组临床疗效对比

2.2 安全性分析

两组患者的主要毒性反应为骨髓抑制及胃肠道反应，表现为中性粒细胞减低、食欲下降、乏力、恶心、呕吐等，研究组与对照组无明显毒性反应差异。CIK细胞治疗组的患者常见不良反应主要是发热，研究组28例患者在治疗期间出现发热3例(10.7%)，但体温均<38℃，经过对症处理后恢复正常。两组患者均在一个疗程结束后抽取静脉血检测血常规、肝肾功能，无明显异常。

2.3 生活质量评价

研究组KPS评分提高10分及以上者13例，稳定10例，下降5例，提高率为46.4%(13/28)，明显高于对照组23.1%(6/26)，差异有统计学意义(P<0.05)。同时对比治疗后两组患者的精神状态、睡眠质量、乏力、疼痛等指标改善情况，研究组改善情况均显著高于对照组，结果表明CIK细胞治疗可以提高和改善患者的生活质量。

2.4 生存分析

研究组和对照组患者中位PFS分别为6.8个月和6.2个月。研究组的PFS略长于对照组，但两组差异无统计学意义(P>0.05)

2.5 免疫指标变化

流失细胞仪检测结果显示，开始CIK细胞治疗前两组间T淋巴细胞亚群水平无显著差异(P>0.05)。研究期间，对照组进行化疗后T淋巴细胞亚群水平无明显变化(P>0.05)。研究组在CIK细胞治疗前后及与对照组治疗后相比，T细胞亚群有明显变化，表现为外周血CD3+、CD4+及CD4+/CD8+绝对计数明显增加，差异有统计学意义(P<0.05)。CD8+绝对计数无明显变化(P>0.05)，见表2。

表2 两组患者CIK治疗前后T细胞亚群变化

注：对照组仅单纯化疗，研究组为化疗+CIK治疗；与对照组相比，*P<0.05

3 讨论

非小细胞肺癌(NSCLC)以高发病率、高死亡率、低生存期[6]为特点，对患者的身体、心理和社会均造成严重打击。因NSCLC发现确诊已多为中晚期，故目前针对NSCLC患者的治疗主要是放化疗，但毒副反应严重。生物治疗是继手术、放疗、化疗后的第四种治疗模式[7]，近年来越来越受到人们的重视。CIK细胞目前被认为是新一代的抗肿瘤过继细胞免疫治疗的首选方案[8]。CIK细胞是将人体外周血单个核细胞(PBMC)在体外用IL-2、抗CD3单抗、IFN-γ等多种细胞因子诱导培养增殖后获得的异质性细胞群，同时具有T淋巴细胞抗瘤生物活性和NK细胞的非MHC限制性杀瘤特点[9,10]。CIK细胞体外培养增殖速度快、杀瘤活性高、具有提高机体抗肿瘤免疫应答、降低肿瘤负荷、防止肿瘤复发等功能。其作用机制主要是CIK细胞被抗原或细胞因子刺激后，胞内丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶(MAPK/ERK)通路和信号传导及转录激活因子(STAT)通路被激活后可分泌IL-2、IFN-γ 、TNF-α等多种细胞因子，可直接抑制肿瘤细胞增殖，并可通过调节Tregs细胞等增强机体免疫功能间接杀伤肿瘤细胞[11-13]；其次CIK细胞表面的NCR3等受体可与肿瘤细胞表面相应抗原分子结合，CIK细胞活化后胞外分泌毒性颗粒，穿透、裂解肿瘤细胞，从而发挥杀伤作用[14-16]。

本研究从两组(研究组与对照组)的近期临床疗效、安全性、生活质量及免疫指标变化等方面进行对比分析，结果显示研究组(化疗+CIK治疗)的临床有效率及疾病控制率均高于对照组；研究组的KPS评分显著高于对照组(P<0.05)，表明CIK治疗可明显改善患者的生活质量；研究组在CIK细胞治疗后T细胞亚群有明显改变，外周血CD3+、CD4+及CD4+/CD8+绝对计数明显增加，表明CIK治疗可提高改善患者的免疫功能，且治疗期间并无明显毒副作用。这与国内外相关研究报道结果相符[17,18]。

基于本次研究，对于中晚期的NSCLC患者，可采用化疗联合CIK治疗方案，改善患者的生活质量，具有良好的临床应用前景。

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河北省秦皇岛市科技局科研计划项目(201401A121)

1007-4287(2017)07-1155-03

R734.2

A

2016-06-26)

*通讯作者