特发性肺纤维化患者血清透明质酸、层粘连蛋白的变化及意义

陈学远++++++李雅倩++++++冯哲敏++++++何文波++++++孙一波

[摘要] 目的 探讨特发性肺纤维化（IPF）患者血清透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）的变化及意义。 方法 选择2014年6月～2016年6月在杭州师范大学附属医院呼吸科诊治的IPF患者38例为IPF组，选择同期健康非吸烟者30例为对照组。采用放射免疫法检测IPF患者及对照组血清HA、LN的水平；并与肺功能、6 min步行试验（6MWT）、呼吸困难评分等指标进行相关分析。 结果 与对照组比较，IPF组患者血清HA、LN水平显著升高（P < 0.05）。IPF患者血清HA、LN水平分别与用力肺活量（FVC）、第1秒用力呼气量（FEV1）、一氧化碳弥散量（DLCO）呈负相关（均r < 0，P < 0.05或P < 0.01）；HA、LN水平与6MWT呈负相关（r = -0.637、-0.705，P < 0.01），与mMRC评分呈正相关（r = 0.618、0.552，P < 0.05）。 结论 血清HA、LN水平可作为评价IPF病情严重程度、判断疗效的指标，值得在临床推广应用。

[关键词] 特发性肺纤维化；透明质酸；层粘连蛋白

[中图分类号] R563 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2017）06（a）-0044-03

Level and significance of serum hyaluronic acid and laminin in patients with idiopathic pulmonary fibrosis

CHEN Xueyuan LI Yaqian FENG Zhemin HE Wenbo SUN Yibo

Department of Respiratory Diseases， Affiliated Hospital of Hangzhou Normal University， Zhejiang Province， Hangzhou 310015， China

[Abstract] Objective To explore the level and significance of serum hyaluronic acid （HA） and laminin （LN） in patients with idiopathic pulmonary fibrosis （IPF）. Methods From June 2014 to June 2016 ， in Department of Respiratory Diseases， Affiliated Hospital of Hangzhou Normal University， 38 patients with IPF were selected as control group， and 30 healthy persons without smoking at same time were selected as control group. The levels of serum HA and LN in IPF patients and cotrol group were detected by radioimmunoassay. And the correlation between serum HA， LN with lung function， 6-minute walk test （6MWT） and dyspnea score was evaluated. Results Compared with the control group， the levels of serum HA and LN of patients in IPF group were significantly higher （P < 0.05）. The levels of serum HA and LN in patients with IPF were negatively correlated with FVC， FEV1 and DLCO （all r < 0， P < 0.05 or P < 0.01）； HA and LN were negatively correlated with 6MWT （r = -0.637， -0.705， P < 0.01）； the levels of serum HA and LN in IPF patients were positively correlated with mMRC score （r = 0.618， 0.552， P < 0.05）. Conclusion These data suggest that serum HA and LN may be useful biomarkers to estimate the severity and treatment effect of patients with IPF.

[Key words] Idiopathic pulmonary fibrosis； Hyaluronic acid； Laminin

特发性肺纤维化（IPF）是特发性间质性肺炎中最常见的类型[1]。IPF中位生存期约为3年，5年生存率仅20%～30%，预后很差[2-3]，是弥漫性间质性肺病领域中最具挑战性的疾病。积极寻找早期诊断、评估病情变化及其严重程度、预测生存的生物标志物是IPF研究的重要内容。本研究通过检测IPF患者血清透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）的变化，并与肺功能、6 min步行试验（6MWT）、呼吸困难评分等指标进行相关分析，探讨HA、LN的变化在IPF研究中的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2014年6月～2016年6月杭州师范大学附属医院呼吸科诊治的IPF患者38例为IPF组，其中男21例，女17例，年龄56～85岁，平均（71.4±13.5）岁。IPF病史3个月～6年，平均（12.8±0.1）个月。所有患者均诊断符合2011年3月由美国胸科学会（ATS）、歐洲呼吸学会（ERS）、日本呼吸学会（JRS）和拉丁美洲胸科学会（ALAT）联合发布的《基于循证医学证据的IPF诊治指南》[4]，并排除：IPF急性加重患者，合并有肝硬化、肾功能衰竭及其他严重心、肝、肾、血液系统疾病患者，合并有免疫系统疾病、消化性溃疡、糖尿病、严重骨质疏松及结核病患者。选择同期健康非吸烟者30例为对照组，其中男17例，女13例，年龄50～86岁，平均（69.5±17.2）岁，均无心、肺、肝、肾疾病。两组一般资料比较，差异无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。本研究经医院伦理委员会同意，所有研究对象均签署知情同意书。

1.2方法

1.2.1 所有研究对象均行胸部HRCT检查，IPF患者经临床-影像确诊。本研究中所有IPF患者均未行外科肺活检。

1.2.2 所有研究对象均于清晨空腹抽取外周静脉血5 mL，分离血清，留标本置于-80℃冰箱保存待测。采用放射免疫法测定血清HA、LN浓度，试剂盒由上海海军医学研究所生物技术中心提供。

1.2.3 所有研究对象均采用德国耶格肺功能仪（Master Screen PFT）进行肺功能检测，观察用力肺活量（FVC）、第一秒用力呼气量（FEV1）、一氧化碳弥散量（DLCO）等指标。

1.2.4 所有IPF患者均行6MWT测定。试验过程中若患者出现明显的症状，如头晕、气促等，应立即停止试验。

1.2.5 采用改良英国医学研究学会呼吸困难指数（mMRC）评估IPF患者的呼吸困难程度。mMRC评分分为0～4级。0级：仅在费力运动时出现呼吸困难；1级：平地快步行走或步行爬小坡时出现气短；2级：由于气短，平地行走时比同龄人慢或需停下来休息；3级：平地行走100 m左右或数分钟后需停下来喘气；4级：因严重呼吸困难以至于不能离开家，或在穿衣服/脱衣服时出现呼吸困难。

1.3 统计学方法

采用统计软件SPSS 16.0对数据进行分析，正态分布的计量资料以均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用t检验；计数资料以率表示，采用χ2检验。以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 IPF患者血清HA、LN水平

IPF患者血清HA、LN水平均显著高于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。

2.2 IPF患者血清HA、LN水平与肺功能的相关性分析

IPF患者肺功能检测结果：FVC为（65.2±17.4）%、FEV1为（61.8±15.5）%、DLCO为（57.3±19.1）%。线性相关分析显示血清HA、LN水平分别与FVC、FEV1、DLCO呈负相关（均r < 0，P < 0.05或P < 0.01）。

2.3 IPF患者血清HA、LN水平与6MWT的相关性

38例IPF患者中共有35例完成6MWT，6MWT平均值为（235.7±102.5）m。线性相关分析显示血清HA、LN水平均与6MWT呈负相关（r = -0.637、-0.705，P < 0.01）。

2.4 IPF患者血清HA、LN水平与mMRC呼吸困难评分的相关性

IPF患者的mMRC评分为（2.45±1.29）分。线性相关分析显示血清HA、LN水平均与mMRC评分呈正相关（r = 0.618、0.552，P < 0.05）。

3 讨论

IPF的诊断主要依赖于临床症状、肺功能检测、高分辨率CT和组织病理学等。临床-放射-病理（CRP）多学科诊断模式有助于提高IPF诊断的准确性[4-5]。King等[6]通过研究，建立起一套临床-影像-生理学评分系统来评价IPF患者的病情及生存预测。但由于该评分系统的复杂性及IPF病情本身的复杂性，限制了其在临床的广泛应用。

积极开展生物标志物的研究，是近年来IPF研究的热点内容之一。研究发现，血清和BALF生物学标志物，如Ⅱ型肺泡细胞表面抗原6（KL-6）、表面活性蛋白A（SP-A）、表面活性蛋白D（SP-D）、趋化因子配体18（CCL18）、基质金属蛋白酶（MMP）水平对评估病情及判断预后有一定意义[7-18]。近年来，随着对肺纤维化研究的逐步深入，HA、LN在肺纤维化研究中的价值日益引起重视。

HA是一种大分子黏性糖胺聚糖，是目前研究较多的细胞外基质（ECM）成分之一。在IPF早期，肺内存在的大量的炎症、免疫效应细胞间相互作用，刺激成纤维细胞产生HA。研究发现，IPF患者BALF中HA浓度高于正常对照组[19]。动物实验中也有类似的发现。LN是一种基底膜特有的大分子非胶原糖蛋白。LN能够诱导细胞黏着、生长和分化等，能吸引、黏附肺上皮细胞、成纤维细胞和炎细胞，并刺激、促进成纤维细胞和上皮细胞合成胶原，这就决定了LN在肺纤维化中的多重作用[20]。

本研究发现，IPF患者血清HA、LN浓度升高，显著高于对照组（P < 0.05）。IPF患者血清HA、LN水平与VC、FEV1、DLCO呈负相關，与6MWT呈负相关，而与呼吸困难的严重程度显著正相关。这提示血清HA、LN水平可作为评价IPF病情严重程度、判断疗效的指标。而血清HA、LN的测定，具有简便易行、无创等优点，值得在临床，尤其是基层医院推广应用。

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（收稿日期：2017-02-21 本文編辑：苏 畅）