李亚蓉,冯晶,丁胜
(1.华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院 内分泌科,湖北 武汉 430000;2.武汉市第一医院 骨外科,湖北 武汉 430022)
·论 著·
葛根不同萃取部位对链脲佐菌素致2型糖尿病大鼠糖脂代谢影响的研究
李亚蓉1,冯晶2,丁胜1
(1.华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院 内分泌科,湖北 武汉 430000;2.武汉市第一医院 骨外科,湖北 武汉 430022)
葛根; 萃取物; 糖尿病; 大鼠; 糖脂代谢
1.1 药材与试剂
1.2 动物
SD大鼠80只,雄性,清洁级,体重250 g左右,由江苏大学动物实验中心提供,合格证号:SCXK(苏)2009_0002。饲养室温度及相对湿度适宜,予12 h光照和黑暗循环,自由摄食和饮水,适应性饲养7 d后用于实验。
1.3 仪器
1.4 方法
1.4.1 不同萃取部位的制备 将葛根用高速中药粉碎机粉碎,过药典3号筛,得干燥葛根粉末。将其用70%乙醇按8倍药材质量的溶剂量浸泡2 h后,85 ℃水浴回流提取2次,每次2 h,合并滤液,于45 ℃下减压浓缩为浸膏。
取上述浸膏适量,加蒸馏水调节生药浓度为1 g·ml-1,依次用3倍体积的石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯萃取各3次,分别合并萃取液,于45 ℃下减压浓缩,冷冻干燥得葛根石油醚部位、葛根二氯甲烷部位、葛根乙酸乙酯部位。将上述萃取后的剩余水溶液经HP 20大孔吸附树脂,用水洗至柱下液澄清,除去溶于水的寡糖类、无机盐、黏液成分等,再用95%乙醇洗至柱下液澄清,收集醇洗脱液于45 ℃下减压浓缩,冷冻干燥得葛根剩余部位,即葛根萃余物。
1.4.2 2型糖尿病大鼠模型建立 从适应性喂养7 d后的80只大鼠中随机选择8只大鼠作为对照组,其余作为糖尿病造模动物。正常组大鼠用正常普通饲料喂养。模型组用高糖高脂饲料(含10%猪油、20%蔗糖、1%胆酸盐、2.5%胆固醇、66.5%普通饲料)喂养,饲养1个月后禁食12 h,腹腔注射STZ溶液(30 mg·kg-1)造模;高脂高糖饲料继续饲养1周,禁食12 h,眼眶后静脉丛取血测定大鼠空腹血糖(FBG)水平,以FBG≥11.1 mmol·L-1为2型糖尿病大鼠造模成功[9]。
1.4.3 给药方式 将2型糖尿病模型大鼠随机分为模型组、盐酸二甲双胍组(0.11 g·kg-1)及葛根的乙酸乙酯部位组、二氯甲烷部位组、石油醚部位组和萃余部位组(均折合成生药1.58 g·kg-1)。灌胃给予大鼠的盐酸二甲双胍剂量由人体剂量折算后确定,灌胃给予大鼠的葛根不同萃取部位用量则按2015年版《中国药典·一部》葛根饮片用量计算。盐酸二甲双胍组及葛根不同萃取部位组的大鼠均连续给药4周。
1.4.4 一般生理状况观察 对大鼠的一般生理状况(大鼠的饮水量、进食量和活动状态等)进行观察。
1.4.5 大鼠FBG水平测定 分别于给药1、2、3、4周后禁食6 h,采用尾静脉取血检测各组大鼠FBG水平。
1.5 统计学处理
2.1 一般生理状况观察
对照组大鼠饮水和进食均比较正常,反应灵敏,皮毛有亮泽,体重增长;与对照组相比,模型组大鼠反应迟钝、皮毛枯萎,摄食量和饮水量明显增加,且排尿增多,体重下降。给药4周后,给药组大鼠情况较模型组各方面情况均有所好转,饮水进食趋于正常,反应能力明显增强,活动明显增加。
2.2 大鼠FBG水平测定结果
模型组大鼠每周的FBG水平均较对照组高,两组间差异具有统计学意义(P<0.01)。给药组与模型组比较,给药1周后,盐酸二甲双胍组、二氯甲烷部位及萃余部位组大鼠的FBG水平显著降低(P<0.01),而葛根乙酸乙酯部位和石油醚部位组则没有表现出血糖降低;在给药2~4周后,盐酸二甲双胍组、葛根二氯甲烷部位和萃余部位组大鼠的FBG水平均显著降低(P<0.01),且乙酸乙酯部位组在给药2周后的FBG水平较模型组也显著降低(P<0.01),而石油醚部位组则跟给药1周的情况一样,没有表现出血糖降低。提示葛根的萃余部位、乙酸乙酯部位和二氯甲烷部位均能明显降低糖尿病大鼠空腹血糖,且效果从弱到强为葛根乙酸乙酯部位<葛根萃余部位<葛根二氯甲烷部位。具体见表1。
组 别剂量/g·kg-1FBG/mmol·L-1给药前给药1周给药2周给药3周给药4周对照组-4.37±0.554.56±0.733.78±0.613.57±0.593.61±0.62模型组-21.03±1.8820.65±2.42a21.19±1.29a19.98±2.07a21.35±2.13a盐酸二甲双胍组0.1120.47±2.059.81±2.76b7.33±0.78b5.34±0.54b4.93±0.61b石油醚部位组1.5822.71±1.9820.32±1.9221.52±2.0223.30±1.8720.64±3.32二氯甲烷部位组1.5823.97±2.529.28±1.76b9.03±1.72b8.54±0.62b7.71±0.48b乙酸乙酯部位组1.5821.14±1.9519.97±1.5618.02±2.23b18.01±3.54b17.37±3.01b萃余部位组1.5820.88±1.8415.98±3.02b13.02±2.78b10.13±3.16b10.25±2.94b
a 与对照组比较,P<0.01;b 与模型组比较,P<0.01
2.3 对糖尿病大鼠HbA1c和FINS水平的影响
组 别剂量/g·kg-1HbA1c/%FINS/mU·L-1HOMA⁃IRISI对照组—4.43±0.7213.98±1.212.24±0.51-3.92±0.31模型组—8.54±2.18a18.27±2.53a17.34±2.15a-5.97±0.44a盐酸二甲双胍组0.114.67±0.68b14.95±0.97b3.28±0.62b-4.31±0.25b石油醚部位组1.588.43±2.3218.16±1.2616.65±1.94-5.93±0.37二氯甲烷部位组1.585.59±1.34b15.54±0.78b5.33±0.83b-4.79±0.29b乙酸乙酯部位组1.587.07±1.83b18.31±1.1914.15±1.56b-5.78±0.43c萃余部位组1.586.55±0.98b16.21±1.04b7.40±1.02b-5.11±0.41b
a 与对照组比较,P<0.01;b 与模型组比较,P<0.01;c 与模型组比较,P<0.05
2.4 葛根不同萃取部位对糖尿病大鼠血脂水平的影响
a 与对照组比较,P<0.01;b 与模型组比较,P<0.01;c 与模型组比较,P<0.05;
目前市场上的化学降糖药作用强,起效快,但不良反应较多,累及器官或全身各大系统,如出现过敏性休克、低血糖性昏迷、室性早搏、全身剥脱性皮炎甚至死亡[10];而中药作用较为温和,且一般无不良反应或者不良反应较轻,这能够为糖尿病患者提供更多的治疗选择,同时为临床上使用安全有效的降血糖药物提供了广阔的开发前景。
[1] 国家药典委员会.中国药典:一部[M].北京:中国医药科技出版社,2015:333.
Effects of different extraction parts of Radix Puerarin on glucose and lipid metabolism in type 2 diabetic rats induced by STZ
(1.DepartmentofEndocrinology,theCentralHospitalofWuhan,TongjiMedicalCollege,HuazhongUniversityofScienceandTechnology,Wuhan430000,China;2.DepartmentofOrthopedics,WuhanNo. 1Hospital,Wuhan430022,China)
Puerarin; extract; diabetes mellitus; rats; glucose and lipid metabolism
武汉市卫计委科研项目(WX14B11)
R285.5; R587.1
A