全自动电化学发光法测定TRAb在自身免疫性甲状腺疾病中的应用以及干扰因素分析

李红娟

(郑州人民医院 检验科 河南 郑州 450003)

全自动电化学发光法测定TRAb在自身免疫性甲状腺疾病中的应用以及干扰因素分析

李红娟

(郑州人民医院 检验科 河南 郑州 450003)

目的 探讨TRAb检测在自身免疫性甲状腺疾病(AITD)中的鉴别诊断价值及其检测的干扰因素。方法 采用全自动化学发光法检测63例自身免疫性甲状腺疾病患者[其中Graves病(GD)病45例，桥本甲状腺炎(HT)18例]、24例红斑狼疮患者、12例风湿性心脏病患者和153例正常对照者血清TRAb、TPO-Ab、TGA、TSH、FT3和FT4水平。结果 GD甲亢组血清TRAb、TPO-Ab、TGA水平高于正常对照组(P<0.01)；桥本甲减组血清TPO-Ab和TGA水平高于正常对照组(P<0.01)。红斑狼疮组、风湿性心脏病组血清TRAb水平高于正常对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；血清TSH水平与正常对照组间差异无统计学意义(P>0.05)，且TSH、FT3、FT4水平均在正常值范围内。Graves甲亢组血清TRAb阳性率为88.89%，明显高于正常对照组；红斑狼疮组和风湿性心脏病组血清TRAb阳性率分别为29.17%和25.00%，高于正常对照组的3.27%。结论 TRAb 的检测对鉴别诊断GD病和HT具有重要的临床应用价值，而红斑狼疮和风湿性心脏病患者会出现假阳性。

促甲状腺激素受体抗体；促甲状腺激素；红斑狼疮；风湿性心脏病；甲状腺球蛋白抗体；抗甲状腺过氧化物酶抗体

自身免疫性甲状腺疾病(AITD)是一种常见的器官特异性自身免疫疾病，其中Graves病(GD)及桥本甲状腺炎(HT)又是AITD 中普遍存在的两种疾病[1]。促甲状腺激素受体抗体(TRAb)是AITD患者体内产生的一种异质性多克隆抗体，根据其功能不同主要可分为两类：一类可以模拟促甲状腺激素(TSH)激活促甲状腺激素受体从而引起甲状腺功能亢进，一般指甲状腺刺激性抗体(TSAb)或甲状腺刺激性免疫球蛋白(TSI)，目前认为，TSAb是GD甲亢的致病性抗体；另一类通过占据TSH受体位点，从而阻断TSH或TSAb与受体的结合而引起甲状腺功能减退，一般指甲状腺阻断性抗体(TBAb)。TRAb活性的高低是AITD发生、发展或转化的重要原因[2]。本研究通过分析不同甲状腺疾病患者和非甲状腺疾病患者血清TRAb的水平，探讨采用全自动电化学发光法检测TRAb在不同疾病患者体内的活性状态，研究其在AITD中的诊断价值以及其他非甲状腺疾病对TRAb检测结果的干扰。

1 资料和方法

1.1 一般资料

1.1.1 正常对照组153例(其中男99例，女54例)，年龄为26～78岁，均为郑州人民医院门诊的体检者，经确认无心、脑血管疾病以及其他疾病的健康体检者。

1.1.2 GD甲亢组45例(其中男12例，女33例)，年龄为19～77岁，临床确诊为GD甲亢的患者，血清FT3、FT4升高，TSH降低。

1.1.3 桥本甲减组18例(其中男11例，女7例)，年龄为31～84岁，临床确诊为桥本甲状腺炎，其中血清TSH降低；FT3、FT4升高。

1.1.4 红斑狼疮24例(其中男14例，女10例)，年龄为16～73岁，临床确诊为红斑狼疮患者，甲状腺功能正常。

1.1.5 风湿性心脏病12例(其中男8例，女4例)，年龄为49～83岁，临床确诊为风湿性心脏病患者，甲状腺功能正常。

1.2 治疗方法 电化学发光法检测TRAb(罗氏电化学发光全自动免疫分析仪，Cobas e411)；全自动化学发光法检测TPO-Ab(雅培化学发光全自动免疫分析仪，Architect i2000)；全自动化学发光法检测TGA、TSH、FT3和FT4(贝克曼全自动化学发光免疫分析仪，DXI 800)。

2 结果

2.1 GD甲亢组、桥本甲减组患者和正常对照组血清FT3、FT4、TSH、TRAb、TPO-Ab以及TGA测定 GD甲亢组血清TRAb、TPO-Ab、TGA水平高于正常对照组(P<0.01)；桥本甲减组血清TPO-Ab和TGA水平高于正常对照组(P<0.01)。见表1。

2.2 红斑狼疮组、风湿性心脏病组和正常对照组血清FT3、FT4、TSH、TRAb测定 红斑狼疮组、风湿性心脏病组血清TRAb水平高于正常对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；血清TSH水平与正常对照组间差异无统计学意义(P>0.05)，且TSH、FT3、FT4水平均在正常值范围内。见表2。

表1 各组血清FT3、 FT4、TSH、TRAb、TPO-Ab以及TGA测定结果

注：a表示与正常对照组比较，P<0.01。

表2 各组血清FT3、FT4、TSH以及TRAb测定结果

注：b表示与正常对照组比较，P<0.05。

2.3 Graves甲亢组、桥本甲减组、红斑狼疮组、风湿性心脏病组与正常对照组血清TRAb测定 Graves甲亢组血清TRAb阳性率为88.89%，明显高于正常对照组；红斑狼疮组和风湿性心脏病组血清TRAb阳性率分别为29.17%和25.00%，高于正常对照组的3.27%。见表3。

表3 各组血清TRAb测定结果及阳性率

3 讨论

GD及HT是最常见的AITD，这些疾病的患者外周血中可能存在着1种或者几种主要针对甲状腺的自身抗体，分析这些自身抗体对自身免疫性甲状腺疾病的诊断有重要意义[3]。TRAb是其中的一种多克隆抗体，由不同的B淋巴细胞分泌，依据抗体功能，主要可分为TSAb和TBAb两大类抗体，TSAb等刺激型抗体是GD甲亢发生、发展的主要原因，该种抗体可与甲状腺滤泡细胞膜上的TSH受体结合，模拟TSH的作用激活受体蛋白，通过腺苷酸环化酶和磷脂酶转换生成的磷酸肌醇，使cAMP的生成增加，从而导致甲状腺激素合成和分泌增多，血中甲状腺激素水平增高，却又不受甲状腺激素的负反馈调节；而TBAb等阻断性抗体在甲状腺功能减退症的发病机理中起重要作用[4]，是部分自身免疫甲状腺炎发生甲减的致病性抗体。资料表明，在未经治疗的GD中TRAb阳性率可达到95%以上，对GD的诊断具有较强的特异性。TPO-Ab在GD中的阳性率为70%～80%，而几乎所有的HT或产后甲状腺炎患者体内均可检出TPO-Ab。AITD患者体内的TGA通常与TPO-Ab同时存在，TGA和TPO-Ab联合检测比单独检测TPO-Ab具有更高的临床诊断价值[5]。

在GD患者中，TRAb、TPO-Ab和TGA水平与正常对照组比较，差异有统计学意义(P<0.01)，而TRAb的阳性率为88.89%，可以看出TRAb在GD的诊断中优于其他两个指标。而在桥本甲状腺炎患者中，TPO-Ab和TGA水平与正常对照组比较，差异有统计学意义(P<0.01)，是辅助诊断桥本甲状腺炎的最佳指标。

本次研究同时对多种常见疾病的TRAb水平进行了分析，发现红斑狼疮和风湿性心脏病是影响TRAb诊断AITD特异性的两个干扰因素。经过对24例红斑狼疮患者和12例风湿性心脏病患者的TSH、FT3、FT4和TRAb结果进行分析，可以看出其TSH、FT3和FT4水平均处于正常范围，而TRAb结果与正常对照组相比，差异有统计学意义(P<0.05)，并且TRAb在红斑狼疮和风湿性心脏病患者中的阳性率也分别达到了29.17%和25.00%，高于正常对照组的3.27%。

TRAb的检测方法可分为生物分析法和受体分析法两种，其中生物分析法通常仅用于研究工作，能够区分TSAb和TBAb，但其对操作者的技术要求高，不易广泛应用。受体分析法是目前临床诊断中应用最广泛的检测方法，虽然这种方法不能区分TSAb和TBAb，但由于甲亢和甲减从临床特点上来看是很明显的，因此在方法学上对于刺激性和抑制性型抗体的区分常常不是必要的。化学发光免疫分析(CLIA)是化学发光与免疫反应相结合以检测抗原或抗体的方法，其灵敏度、精密度和准确度均优于传统的放射受体分析法(RRA)和酶联免疫受体分析(ELISA)。全自动电化学发光法测定血清TRAb水平有助于GD的辅助诊断，但在红斑狼疮和风湿性心脏病患者中TRAb水平也可能升高。

[1] SmithTJ. Pathogenesis of Graves’ orbitopathy: a 2010 update[J]. J Endocrinol Invest, 2010, 33(6):414-421.

[2] Matthews D C, Syed A A. The role of TSH receptor antibodies in the management of Graves' disease[J]. Eur J Intern Med, 2011, 22 (3):213-216.

[3] 杨蓉,潘秀军. TGA,TPOAb,TRAb和TSH在自身免疫性甲状腺病中的临床应用[J]. 放射免疫学杂志, 2012,25(5): 541-544.

[4] 朱利国, 浦洪波, 武红玉, 等.促甲状腺激素,甲状腺过氧化物酶抗体和促甲状腺激素受体抗体检测在甲状腺疾病中的应用价值[J]. 标记免疫分析与临床, 17(4): 241-243.

[5] 张颖珍, 赵明辉, 潘学继.Graves病早期检测TSH受体抗体的临床意义[J].标记免疫分析与临床, 2004, 11(2):123.

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10.3969/j.issn.1004-437X.2017.11.013

2016-11-20)