Bcl-2及Ki-67蛋白在不同类型子宫平滑肌肿瘤中的表达情况

徐伟莉



Bcl-2及Ki-67蛋白在不同类型子宫平滑肌肿瘤中的表达情况

徐伟莉

目的 探讨Bcl-2及Ki-67蛋白在不同类型子宫平滑肌肿瘤中的表达情况。方法 将子宫平滑肌肿瘤患者92例，按照良恶性的不同分为良性平滑肌瘤组(49例)、富于细胞型平滑肌瘤(32例)以及典型子宫平滑肌肉瘤(11例)。将标本制成石蜡切片，采用免疫组织化学SP法检测标本中Bcl-2蛋白及Ki-67蛋白的表达情况。结果 患者平均年龄良性平滑肌瘤组最小，子宫平滑肌肉瘤组最高，组间比较均有统计学差异(P<0.05)。良性平滑肌瘤组Bcl-2阳性率最高，Ki-67阳性率最低；子宫平滑肌肉瘤组Bcl-2阳性率最低，Ki-67阳性率最高，组间比较均具有统计学差异(P<0.05)。Bcl-2在不同复发情况、肿瘤数量及肿瘤大小的患者中差异无统计学意义(P>0.05)，但Ki-67在复发、多发及肿瘤体积较大患者中阳性率较高，差异有统计学意义(P<0.05)。Bcl-2蛋白与Ki-67蛋白表达存在显著负相关(γ=-0.564，P=0.000)。结论 Bcl-2及Ki-67蛋白在不同类型子宫平滑肌肿瘤中表达情况各异，二者呈负相关性，可联合用于子宫平滑肌肿瘤的辅助鉴别诊断。

良性子宫平滑肌瘤；富于细胞型平滑肌瘤；子宫平滑肌肉瘤；Bcl-2；Ki-67

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:1085～1087)

子宫平滑肌肿瘤是1种较为常见的妇科疾病，病理类型多样，良恶性各不相同[1]。良性肿瘤以子宫平滑肌瘤最为常见，交界性肿瘤以富于细胞型平滑肌瘤最为常见，恶性则以子宫平滑肌肉瘤最为常见[2]。针对不同病理类型的子宫平滑肌肿瘤治疗方法也有所不同，因此准确的鉴别诊断对于患者治疗方案的制定及预后具有十分重要的意义[3]。免疫组化方法是病理科最为常用的技术手段，参考他人研究，本文选取了Bcl-2及Ki-67蛋白进行免疫组化检测[4]，并进行了对比分析，以期对临床辅助诊断提供理论支持。

1 材料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析2006年3月至2016年12月于我科检查的不同种类子宫平滑肌瘤患者92例。患者收集标准如下：①所有患者均经明确的病理学及影像学诊断确诊为子宫平滑肌瘤；②收集组织标本前未经过化疗、放疗等其他治疗方法；③患者临床资料完整。92例患者按照良恶性的不同分为良性平滑肌瘤组(49例)、富于细胞型平滑肌瘤组(32例)以及典型子宫平滑肌肉瘤组(11例)。

1.2 检测方法

所有标本均使用石蜡包埋制作石蜡切片，分别进行HE染色及免疫组织化学染色。免疫组化检测方法选择SP法，选择鼠抗人Bcl-2及鼠抗人Ki-67单克隆抗体，免疫组化SP通用型试剂盒，DAB酶底物显色液。所有试剂均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。具体操作步骤严格按照说明书进行。

1.3 结果判定

由2位高年资主治医师进行双盲阅片，意见不统一时参考第3位高年资主治医师阅片结果。使用高倍显微镜进行观察，随机选取5个视野，计数阳性染色细胞百分数，Bcl-2为分布在细胞质的棕色颗粒，Ki-67为分布在细胞核的棕色颗粒。按照阳性细胞所占细胞数量的百分比，以0～4分计分：染色细胞<5%计0分；染色细胞≥5%～25%计1分；染色细胞>25%～50%计2分；染色细胞>50%计3分；染色细胞>75%计4分。按照染色强度的不同，以0～3分计分：不显色计0分；染色为浅黄色计1分；染色为棕黄色计2分；染色为深棕色计3分。最终结果是将细胞数量与细胞染色程度得分相加，总分0～1分为阴性(-)；总分2～3分为弱阳性(+)；总分4～5分为中度阳性(++)；总分6～7分为重度阳性(+++)。

1.4 统计学方法

采用SPSS version 18.0对本研究数据进行运算处理，本文所得数据均为计数数据，以百分比形式表示，采用卡方检验进行比较，等级资料采用秩和检验进行比较。2种蛋白在组织中表达的相关性比较采用Spearman相关性分析。假设检验水准为α=0.05，即P<0.05时差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组患者一般资料比较

良性平滑肌瘤组患者年龄24～71岁，平均年龄(41.1±5.4)岁；富于细胞型平滑肌瘤组患者年龄分布25～76岁，平均年龄(45.2±5.1)岁；子宫平滑肌肉瘤组患者年龄24～77岁，平均年龄(49.8±5.7)岁。良性平滑肌瘤组患者平均年龄最小，子宫平滑肌肉瘤组最高，组间比较均有统计学差异(P<0.05)。

2.2 3组患者Bcl-2及Ki-67表达情况分析

良性平滑肌瘤组Bcl-2阳性率为83.67%、富于细胞型平滑肌瘤组为62.50%、子宫平滑肌肉瘤组为54.54%，组间差异比较，有统计学意义(Z=6.495，P=0.039)。良性平滑肌瘤组Ki-67阳性率为40.82%，富于细胞型平滑肌瘤组为90.63%，子宫平滑肌肉瘤组为100%，组间比较均具有统计学差异(Z=27.835，P=0.000)。良性平滑肌瘤组Bcl-2阳性率最高，Ki-67阳性率最低；子宫平滑肌肉瘤组Bcl-2阳性率最低，Ki-67阳性率最高。见表1。

表1 3组患者Bcl-2及Ki-67表达情况分析(例，%)

2.3 病理特征与Bcl-2及Ki-67蛋白表达情况分析

对不同复发情况、肿瘤数量以及肿瘤大小的患者Bcl-2及Ki-67蛋白表达情况进行分析，结果显示，Bcl-2在不同复发情况、肿瘤数量及肿瘤大小的患者中差异不显著(P>0.05)，但Ki-67在复发、多发及肿瘤体积较大患者中阳性率明显较高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.4 Bcl-2与Ki-67蛋白表达相关性分析

对92例子宫平滑肌肿瘤患者Bcl-2与Ki-67蛋白表达进行相关性分析，结果显示，Bcl-2蛋白与Ki-67蛋白表达存在显著负相关(γ=-0.564，P=0.000)。

3 讨论

子宫平滑肌瘤为良性肿瘤，数量较多，预后较好；富于细胞型平滑肌瘤为子宫交界性肿瘤，生长迅速，较易恶变，因此应当在条件允许时及早切除并加强随访；子宫平滑肌肉瘤发病率较低，但其恶性程度较高，侵袭性明显，预后较差[5]。不同类型子宫平滑肌肿瘤单从临床特征或影像学检查方面鉴别较为困难，因此有必要依赖于病理学检查[6]。随着肿瘤发生机制的研究，在不同类型子宫平滑肌肿瘤鉴别诊断中使用免疫组化方法愈加常见[7]。

表2 病理特征与Bcl-2及Ki-67蛋白表达情况分析(例，%)

Bcl-2蛋白存在于线粒体内，是Bcl-2原癌基因的编码产物，与t(14；18)染色体易位有关，具有重要的抗凋亡作用[8]。研究报道显示，Bcl-2基因在体内或体外表达增加可降低细胞对生长因子的需求，抑制多种原因所致的细胞凋亡过程，最终延长细胞寿命[9]。本研究结果显示，不同类型子宫平滑肌肿瘤中Bcl-2阳性表达率存在显著差别，在良性子宫平滑肌瘤中Bcl-2阳性率最高，而在子宫平滑肌肉瘤中阳性率最低，这与文献报道相符[10]。此结果提示，Bcl-2在良性组织中存在过度表达，而当细胞逐渐发生癌变，Bcl-2对细胞凋亡的抑制将逐渐降低，Bcl-2阳性率降低。

Ki-67蛋白在细胞周期不同阶段均可表达，与细胞增殖关系密切的抗核抗原，也是目前最为常用的核增殖标志基因，其半衰期较短，一旦脱离细胞周期后即可迅速降解，因此成为检测肿瘤细胞增殖活性最可靠的指标之一[11]。本研究结果显示，不同类型子宫平滑肌肿瘤中Ki-67阳性表达率存在显著差别，在良性子宫平滑肌瘤中Ki-67阳性率最低，而在子宫平滑肌肉瘤中阳性率最高。该结果证实，恶性程度越高，Ki-67表达越多。

此外，本研究还对不同复发情况、肿瘤数量以及肿瘤大小患者中2种蛋白的表达进行了考察。研究结果显示，复发、多发及肿瘤体积较大的患者，Ki-67阳性表达率明显较高，与我们的预期相符，也可提示复发、多发或肿瘤体积较大的患者可能恶性程度更高；而Bcl-2表达与不同病理特征关系较弱，我们认为该结果可能提示Bcl-2鉴别诊断敏感性相对弱于Ki-67，但该结果尚需后续研究进行验证。

综上所述，Bcl-2及Ki-67蛋白在不同类型子宫平滑肌肿瘤中表达情况各异，二者呈负相关性，可联合用于子宫平滑肌肿瘤的辅助鉴别诊断。

[1] 牛多山,杨 杰,姚 丰,等.不能确定恶性潜能的子宫平滑肌肿瘤2例临床病理分析〔J〕.临床与实验病理学杂志,2014,30(12):1412-1413.

[2] 谢春燕,谢 刚,王安群,等.子宫平滑肌肿瘤临床病理特征分析〔J〕.实用癌症杂志,2015,30(11):1717-1719.

[3] 刘明阁,于庆凯.临床病理分析在子宫平滑肌肿瘤诊断中的应用〔J〕.河南医学研究,2014,23(1):36-38.

[4] 宋亭亭,李美蓉,王雅玲.Bcl-2与S100A6在不同子宫平滑肌肿瘤中的表达及意义〔J〕.中国现代医生,2014,52(14):42-44.

[5] 苏 展.子宫腺肌病与子宫肌瘤的临床鉴别分析〔J〕.实用医技杂志,2015,29(9):976-977.

[6] 鲍天辉,王岳君,韩 彪,等.子宫恶性潜能未定性平滑肌肿瘤98例临床病理特征〔J〕.临床与实验病理学杂志,2016,32(5):533-538.

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[10] 何智伟.Bcl-2、ki-67、p16、p53及ER在子宫平滑肌肉瘤中表达的META分析及其临床意义〔D〕.吉林大学,2015.

[11] 王 晶,耿海燕,苗雨春.免疫荧光双标记法在子宫平滑肌肿瘤中的应用〔J〕.实用医技杂志,2014,21(7):776-777.

(编辑：甘 艳)

Expression of Bcl-2 and Ki-67 Protein in Different Smooth Muscle Tumors

XUWeili.TheSecondPeople’sHospitalofXinxiang,Xinxiang,453002

Objective To investigate the expression of Bcl-2 and Ki-67 protein in different smooth muscle tumors.Methods 92 cases of smooth muscle tumors were divided to the benign leiomyoma(n=49),cell type leiomyoma (n=32) and typical leiomyosarcoma(n=11) according into the benign and malignancy.The specimen were made into paraffin sections,the expression of Bcl-2 and Ki-67 protein were detected by immunohistochemistry SP methods.Results The age of benign leiomyoma were lowest,while the uterine leiomyosarcoma was highest,P<0.05.The Bcl-2 positive rate in benign leiomyoma was highest,the Ki-67 positive rate was lowest.The Bcl-2 positive rate in uterine leiomyosarcoma was lowest,the Ki-67 positive rate was highest,P<0.05.The Bcl-2 in different quantity relapse,tumor and tumor size had no significant difference(P<0.05).While Ki-67 in recurrence,multiple and bigger tumor volume was higher,P<0.05.The Bcl-2 and Ki-67 protein expression had negative correlation(γ=-0.564，P=0.000).Conclusion Bcl-2 and Ki-67 protein in different smooth muscle tumors have different expression,and they have negative relation,could be used as auxiliary differential diagnosis for leiomyoma of uterus.

Benign leiomyoma;Cell type leiomyoma;Leiomyosarcoma of uterus;Bcl-2；Ki-67

453002 河南省新乡市第二人民医院

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.07.013

R737.33

A

1001-5930(2017)07-1085-03

2017-01-17

2017-04-25)