TIP30在三阴性乳腺癌中的表达及临床病理意义*

梁忠锃，张远起，黄胜超，李亚东，李建文

(广东医科大学附属医院，广东 湛江 524001)

乳腺癌位居女性恶性肿瘤首位，其中三阴性乳腺癌是一种特殊的乳腺癌亚型，约占全部乳腺癌的10%～20.8%[1-2]，三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer，TN-BC)是指雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和人表皮生长因子受体2(Her-2)均为阴性的乳腺癌，常表现为分化程度低、组织学分级高，复发率高、总存活期短。它作为一类高危乳腺癌，总体预后差，易复发和转移，因缺乏常用分子靶点预后差于其他亚型[3]，是目前乳腺癌治疗领域的难点和热点。TIP30作为新近发现的抑癌基因,目前国内外对其与三阴性乳腺癌的研究尚未见报道。本文采用免疫组化SP法检测三阴性乳腺癌、非三阴性乳腺癌及正常乳腺组织标本中TIP30的表达，并探讨TIP30在三阴性乳腺癌中的临床病理学意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集广东医科大学附属医院2015—2016年病理资料完整的乳腺癌手术标本93例，所有病例均经HE切片复读确认,术前均未行放、化疗及其他特殊治疗。其中三阴性乳腺癌40例，非三阴性乳腺癌53例。另收集乳腺良性病变旁正常乳腺组织28例。回顾分析TNBC临床病理学指标,包括肿瘤大小、有无淋巴结转移等,根据美国癌症联合会(AJCC),进行临床分期,患者年龄27～81岁,平均年龄47岁。

1.2 主要试剂

鼠抗人 TIP30 单克隆抗体购自广州吉赛生物科技有限公司。

1.3 免疫组化

标本经4%甲醛溶液固定>6 h，脱水、石蜡包埋，采用免疫组化二步法检测各标本中TIP30蛋白的表达。判断标准：染色结果根据相关文献[4]制定，采用IP(Intensity+Percentages)评分:(1)染色强度。细胞无染色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分;(2)阳性细胞数。染色细胞数<10%为0分，染色细胞数10%～30%为1分，染色细胞数31%～60%为2分，染色细胞数>60%为3分。(1)、(2)两项乘积，得分>2分为阳性，≤2分为阴性。因此，TIP30蛋白在乳腺癌组织中的表达强弱以积分量化表示有:0分、1分、2分、3分、4分、6分、9分。

1.4 统计学方法

采用SPSS16.0软件进行统计分析,计数资料以例数百分比(%)表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 TIP30蛋白在乳腺组织中的表达情况

TIP30蛋白主要表达于胞膜与胞质，在TNBC组及NTNBC组中TIP30蛋白染色阳性率分别为32.5%、56.6%，而在正常乳腺组织中阳性率为89.2%。TIP30蛋白在TNBC组中阳性表达与在NTNBC组中阳性表达比较差异有显著性，差异有统计学意义(P<0.01)；TIP30蛋白在TNBC组阳性表达与在正常乳腺组织中阳性表达比较差异有显著性，差异有统计学意义(P<0.01)；TIP30蛋白在正常乳腺组织阳性表达与在NTNBC组中阳性表达比较差异有显著性，差异有统计学意义(P<0.01)。表明TIP30蛋白在乳腺癌组织中低表达，而在TNBC组中尤为显著。 见表1。

表1 TIP30蛋白在乳腺组织中的表达情况

2.2 TIP30表达与TNBC临床病理参数的关系

TIP30蛋白在TNBC中的阳性表达与肿瘤大小、腋窝淋巴结转移有关，差异有统计学意义(P<0.05)，肿瘤直径大于2 cm较小于2 cm、腋窝淋巴结有转移较无转移TNBC组织中TIP30蛋白阳性率低；TIP30蛋白表达与绝经状态、年龄、临床分期无相关性，差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 TIP30表达与TNBC临床病理参数的关系

3 讨论

乳腺癌属于高度异质性肿瘤,无论在分子生物学、组织形态、免疫表型，还是对治疗的反应上均存在极大的个体差异，TNBC且好发于40岁以下女性，具有特殊的生物学行为和临床病理特征,临床表现为侵袭性病程,易发生局部复发和远处转移，恶性度高预后较其他类型的乳腺癌差，生存率低。 目前TNBC术后主要依靠化疗，内分泌治疗和抗HER-2靶向治疗均无效,因此，寻找新的治疗靶点，对TNBC的治疗起到非常积极的作用。

TIP30最早是1997年Shtivelman在用RNA差异显示技术比较高转移性小细胞肺癌细胞株及低转移性小细胞肺癌细胞株时发现的一种新的抑癌基因，一开始命名为CC3。研究结果显示，TIP30在人体的各种正常组织中如心、肝、肾、肺、脑，肌肉、骨骼等广泛表达[5]。然而在肿瘤组织中，其存在表达降低或缺失的情况，说明TIP30低表达在这些肿瘤的发生过程中发挥作用。Ito等的研究结果显示，TIP30蛋白的表达降低或缺失与大肠癌的发生有关，张霞等[6]的研究证明在TIP30在肝癌组织中也呈低表达状态。

本研究运用免疫组织化学的方法，对40例三阴性乳腺癌及53例非三阴性乳腺癌组织的检测发现，与正常乳腺组织比较，TIP30在乳腺癌组织中的表达均较正常组织降低，差异有统计学意义。而TIP30在三阴性乳腺癌组织中的表达则较非三阴性乳腺癌降低，差异有统计学意义。这也与TIP30在其他癌组织中的表达情况相符。从而提示TIP30作为一种抑癌基因，其表达降低参与了乳腺癌的发生过程，增强其表达可以起到遏制肿瘤的作用。另外，三阴性乳腺癌易发生复发和远处转移，恶性度高预后较其他类型的乳腺癌差，这其中一方面原因可能与TIP30在三阴性乳腺癌组织中的低表达有关。

本研究结果显示，TIP30的表达与乳腺癌年龄、绝经状态、TNM分期无相关性，而与肿瘤大小及腋窝有无淋巴结转移相关。说明在肿物较大或者有腋窝淋巴结有转移的三阴乳腺癌中，TIP30的表达更低，甚至是缺失的，这提示TIP30的低表达有利于乳腺癌的生长及淋巴结转移。

然而，TIP30的低表达通过何种途径影响乳腺癌的发生发展和淋巴结转移，先前的研究结果显示，TIP30基因是一个有潜在抗血管形成的肿瘤转移抑制基因，而新血管生成对于肿瘤生长、侵袭和转移的关系已被肯定[7]，这提示TIP30能够抑制肿瘤血管生成。TIP30在三阴性乳腺癌中的低表达甚至缺失，有可能促进了肿瘤的血管生成，进而导致其恶性程度高及易侵袭性，提示TIP30有可能成为TNBC靶向治疗的新靶点，但对其发挥作用的具体分子通路及表达调控点的有待进一步研究。

[1] CLEATOR S,HELLER W,COOMBES R C.Triple-negative breast cancer:therapeutic options[J].Lancet Oncol,2007,8(3):235-244.

[2] RAKHA E A,EL-SAYED M E,GREEN A R,etal.Prognostic markers in triple-negative breast cancer[J].Cancer,2007,109(1):25-32.

[3] HUDIS C A,GINANNI L.Triple-negative breast cancer:anunmet medical need[J].Oncologist,2011,1:1 -11.

[4] XIAO H,TAO Y,GREENBLATT J,etal.A cofactor,TIP30,specifically enhances HIV-1 Tat2 activated transcription[J].Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America,1998,95(5):2146-2151.

[5] LTO M,JIANG C，KRUMM K，etal．TIP30 deficiency increases susceptibilityto tumorigenesis[J].Cancer Research,2003,63(24):8763-8767．

[6] 张霞,赵健,王皓,等．TIP30基因在肝癌组织中的表达及意义[J].中华肝胆外杂志,2004,10(10):678-714．

[7] 郁宝铭.胃肠道肿瘤分子生物学研究的发展方向[J].中华实验外科杂志,2005,22(10):1162-1163．