TNF-α+489 G/A基因多态性与中国慢性阻塞性肺疾病易感性的Meta分析

李小莉，徐 健，王君丽，张丹丹

(南方医科大学深圳医院呼吸内科，广东 深圳 518101)

慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)具有较高的流行率和病死率，已成为全球性公共健康问题，严重危害大众健康[1]。该病以肺实质破坏及终末气道炎症为主要特征[2]。慢阻肺病因复杂，目前认为吸烟是主要病因之一，但其他因素如环境、遗传基因也越来越引起重视。既往的有关遗传方面研究发现，基因因素能增加慢阻肺易感性。近年来，研究表明遗传多态性的基因分布对慢阻肺进展有较大的影响。目前已报道某些候选基因如IL-6、ACE及TNF-α等与慢阻肺的易感性[3-5]。其中TNF-α基因多态性与慢阻肺易感性较为关注。

目前已有多篇报道TNF-α+489 G/A基因多态性与慢阻肺的易感性，但由于地域、种族等因素不同，研究结果存在争议。本研究收集TNF-α+489 G/A基因多态性与我国慢阻肺的病例对照研究文献进行Meta分析，为明确其是否与我国慢阻肺发病相关。

1 资料与方法

1.1 纳入与排除标准

1.1.1 纳入标准：(1)有关TNF-α+489 G/A基因多态性与慢阻肺相关性研究的中文和英文病例对照研究；(2)有直接的原始数据或经计算后获得的间接数据；(3)同一单位、同一作者发表的相似的研究，只纳入数据更充分的文献。

1.1.2 排除标准：(1)原始文献内容未涉及TNF-α+489 G/A基因多态性与慢阻肺发病风险相关研究；(2)不能得到完整数据或重复发表文献；(3)非病例对照研究，如会议摘要和评论。

1.2 文献检索

计算机检索包括检索PubMed、Embase、Cochrane Library、中国学术期刊全文数据库(1979-2016.11)、维普数据库(1989-2016.11)和万方资源数据库(2000-2016.11)。检索词包括：Chronic obstructive pulmonary disease、TNF-α、Polymorphism、慢性阻塞性肺疾病、TNF-α、基因。

1.3 质量评价

按照STREGA[6]原则进行质量评价：(1)样本量是否充分；(2)诊断标准是否清楚；(3)分组匹配是否合理；(4)对照组与病例组是否具有可比性，对照组基因型分布需符合Hardy-Weinberg(H-W)遗传平衡定律；(5)基因检测方法是否合理；(6)数据是否充分。以上6项，每满足一项记为1分，总分≥3分者，质量可靠。

1.4 文献筛选

2位研究者计算机检索相关数据库，分别阅读所获文献的文题、摘要进行初筛，而后阅读全文进行复筛，根据纳入与排除标准，最终纳入文献。

1.5 资料提取

通过统一的资料提取表，非盲法提取以下文献数据：第一作者姓名、文献发表年限、研究对象地区、样本量、病例组和对照组基因型、各组等位基因频率及H-W平衡检验结果。

1.6 统计学方法

通过Stata 12.0软件进行Meta分析。采用χ2检验检测各研究间的异质性。若纳入研究无统计学异质性，采用固定效应模型合并分析；若各研究有统计异质性，则采用随机效应模型合并分析。同时计算对照组的H-W平衡，若对照组满足H-W平衡则采用优势比(OR)及其95%CI评估TNF-α+489 G/A和慢阻肺的相关性，以P≤0.05表示差异有统计学意义。最后运用Begg’s检验评估发表偏倚。

2 结果

2.1 检索结果

根据检索策略初步检索到文献235篇。阅读标题、摘要，排除重复发表、非临床研究文献共188篇，剩余47篇进一步阅读全文。根据本研究设定的纳入与排除标准，最终纳入6个研究[7-12]。其基本特征，见表1。

表1 纳入研究的基本特征

注： H-W：Hardy-Weinberg遗传平衡检测。

2.2 Meta分析结果

2.2.1 A vs.G与慢阻肺的关系:各研究结果不存在异质性(P=0.057，I2=53.5%)，故采用固定效应模型进行Meta分析。结果显示：基因型A vs.G多态性与慢阻肺有相关性[OR=1.545，95%(1.024，2.332)，P=0.038]。

2.2.2 AA vs.GG与慢阻肺的关系:各研究结果无异质性(P=0.962，I2=0.0%)，故采用固定效应模型进行Meta分析。结果显示：基因型AA vs.GG多态性与慢阻肺存在相关性[OR=2.916，95%(1.120，7.592)，P=0.028]。

2.2.3 AA+GA vs.GG与慢阻肺的关系:各研究结果不存在异质性(P=0.052，I2=54.4%)，故采用固定效应模型进行Meta分析。结果显示：基因型AA+GA vs.GG多态性与慢阻肺之间有相关性[OR=1.752，95%(1.320，2.325)，P=0.000]。

2.2.4 AA vs.GG+GA与慢阻肺关系:各研究结果无异质性(P=0.977，I2=0.0%)，故采用固定效应模型进行Meta分析。结果显示：基因型AA vs.GG+GA多态性与慢阻肺易感性之间存在相关性[OR=2.680，95%(1.028，6.986)，P=0.044]。

2.2.5 AA+GG vs.GA与慢阻肺相关性:各研究结果不存在异质性(P=0.051，I2=54.7%)，故采用固定效应模型进行Meta分析。结果显示：基因型AA+GG vs.GA多态性与慢阻肺易感性之间有相关性[OR=0.620，95%(0.464～0.827)，P=0.001]，见表2。

表2 TNF-α+489 G/A基因多态性与慢阻肺易感性meta分析

2.3 发表偏倚

通过Begg’s检验判断发表偏倚，结果可见(A vs.G：P=0.452；AA vs.GG：P=0.707；AA+GA vs.GG：P=0.452；AA vs.GG+GA：P=1.000；AA+GG vs.GA：P=0.707)均不存在任何发表偏倚。

3 讨论

TNF-α是一个主要的促炎性细胞因子，主要由激活的巨噬细胞产生，也可由几个其他类型的细胞，如淋巴细胞(T细胞和自然杀伤细胞)，中性粒细胞，嗜酸性粒细胞，肥大细胞，内皮细胞，成纤维细胞，与神经元等产生[13]。参与组织和器官多种生理学和病理学的重要过程，包括炎症、免疫调节、增殖和凋亡[14]。TNF-α从血液循环中募集白细胞到肺组织，因此是肺部炎症反应的一个重要决定因素。TNF-α水平增加对脂代谢、凝血和内皮功能有严重影响，可能有助于慢阻肺的进展。

众所周知，慢阻肺是一种慢性气道炎症性疾病，包括TNF-a在内的炎症介质和炎症因子在慢阻肺发病机制中起重要作用，而TNF-α是慢阻肺慢性气道炎症的重要细胞因子之一。TNF-α基因位于染色体6p21.3，跨度约3 kb，包含四个外显子。在其启动子的遗传变异可以改变TNF-α的代谢和功能。其中+489 G/A多态性研究相对较少。有研究表明，此位点多态性与TNF-α的释放增加有关。但尚未发现TNF-α+489 G/A与我国慢阻肺易感性的系统评价，因此我们进行了相关的研究。

我们的Meta分析包括6个病例对照研究，探讨TNF-α+489 G/A基因多态性与慢阻肺关系。经Begg’s检验对所纳入的研究进行检验，我们未发现发表偏倚，表明所纳入的研究具有较好的代表性。同时，对纳入研究进行异质性检(P>0.05)，表明所有研究同质性较好，结果可信度高。我们研究发现，TNF-α+489 G/A基因型(A vs.G；AA vs.GG；AA+GA vs.GG；AA vs.GG+GA；AA+GG vs.GA)多态性与慢阻肺易感性之间均有相关性。梁欢等[15]对TNF-α+489 G/A基因多态性与慢阻肺患者的Meta分析发现，总人群TNF-α+489 G/A基因多态性与慢阻肺不存在相关性，随后以种族和吸烟人群的亚组分析也未发现其与慢阻肺存在易感性。他们认为TNF-α+489基因多态性与COPD的发病风险可能不存在相关性。而Cui K等人对TNF-α+489基因多态性与亚洲人群慢阻肺相关性研究发现，TNF-α+489能增加亚洲慢阻肺患者易感性[16]。其结果与我们研究结果存在一致性。我们研究限制了种族和地域，因而能在最大程度上减少其对基因分布的影响，因此结果相对可靠。本研究发现TNF-α+489 G/A基因多态性与慢阻肺的发病风险存在相关性，为慢阻肺遗传易感性再添循证医学证据。

但本研究也有不足之处：(1)各个原始研究纳入的对照组的定义并没有统一标准，因而可能影响结果的可靠性。(2)虽然本研究未发现发表偏倚，但由于纳入文献较少，可能存在偏倚；(3)本研究纳入文献语种限定为中英文，虽然未发现明显的发表偏倚，仍不能排除发表偏倚存在的可能。(4)慢阻肺是一种多基因、多因素共同参与的慢性疾病，由于原始数据的缺乏，未能分析其他因素如吸烟、年龄、职业和生活工作环境，及其他基因的相互作用。

综上所述，TNF-α+489 G/A基因多态性与慢阻肺的易感性存在相关性，然而由于纳入研究的数量有限，尚需开展更多多中心、高质量、同质性好的病例对照研究予以证实。

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