Luminal型乳腺癌中TBX3表达及其与P53、PS2表达的相关性

黄 燕 吴克瑾 姜 峰 杨 英 倪国英 丁 罡



Luminal型乳腺癌中TBX3表达及其与P53、PS2表达的相关性

黄 燕 吴克瑾 姜 峰 杨 英 倪国英 丁 罡

目的 研究TBX3在Luminal型乳腺癌中表达的情况及其与P53、PS2表达的相关性，探讨TBX3表达在Luminal型乳腺癌中的临床意义。方法 采用免疫组化的方法,检测Luminal型乳腺癌组织标本中TBX3的表达，并分析TBX3的表达与乳腺癌相关的临床病理参数的关系。结果 ①TBX3在luminal型乳腺癌组织中的阳性率为82.19%；②TBX3表达与luminal型乳腺癌的年龄及有无绝经无关(P>0.05)，与乳腺癌肿块大小、淋巴结转移及分期有关(P<0.05)；③TBX3在luminal型乳腺癌中的表达与P53表达呈正相关关系(γ=0.36283，P<0.05)，与PS2表达无明显相关性(γ=-0.1761，P>0.05)。结论 TBX3与luminal型乳腺癌的发生发展及侵袭过程有关，且与P53表达呈正相关关系。

乳腺癌；TBX3；P53；PS2

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:367～369)

乳腺癌是最常见的女性恶性肿瘤，严重威胁妇女的身心健康[1]，目前临床上常用的乳腺癌分子分型是根据乳腺癌组织表达ER、PR、Her-2、Ki-67的情况，对乳腺癌进行分子分型，其中luminal型乳腺癌(包括luminal A型luminal B型)最为常见，大约占乳腺癌48～58%[2-3]。作者先前的研究[4]发现TBX3在luminal型乳腺癌中高表达，提示TBX3与luminal 型乳腺癌关系密切，它有可能是luminal型乳腺癌预后因子之一。本文通过进一步研究luminal 型乳腺癌组织中TBX3的表达，并分析它与临床病理参数的关系及与P53、PS2表达的相关性。

1 材料与方法

1.1 一般资料

收集2011年1月至2013年12月在上海交通大学医学院附属新华医院崇明分院施行手术切除的luminal型乳腺癌73例，要求病史资料完整，术前未行放化疗或靶向治疗，病理标本保存完好。73例患者均为女性，患者年龄39～93岁，平均年龄62.86岁，≤65岁42例，>65岁31例；月经情况：绝经56例，未绝经17例；肿块大小：肿块≤2 cm 34例，肿块>2 cm 39例；有淋巴结转移42例，无淋巴结转移31例；分期：Ⅰ期25例，Ⅱ期32例，Ⅲ期16例；免疫组化结果：P53(+)34例，P53(-)39例；PS2(+)52例，PS2(-)21例；luminal A型40例、luminal B型33例。

1.2 主要试剂

人TBX3多克隆抗体：abcam公司生产，英国。

1.3 实验方法

肿瘤标本均经过10%甲醛固定、石蜡包埋、并切片备用。免疫组化二步法染色严格按照试剂说明书操作步骤进行，采用高压修复法抗原修复，阴性对照组：PBS磷酸缓冲液代替一抗作为阴性对照。

1.4 阳性结果判断

免疫组化结果的评判标准参考许良中[5]的免疫组化评价标准，具体判别标准为：光镜下随机观察4～5个不重叠的高倍(×200)视野，计数100～200个细胞，细胞染色阳性表达为境界清晰,突出于背景的棕黄色或棕褐色颗粒，根据阳性细胞数和着色强度进行半定量分析。阳性细胞数：无阳性细胞，计0分;阳性细胞数占1%～30%，计1分;阳性细胞数占31%～70%，计2分；阳性细胞数占71%～100%，计3分；着色强度：不着色为0分；浅棕色为1分；棕黄色为2分；棕揭色为3分。两项分数之和累计：0分为阴性(-)，1、2分为弱阳性(+)，3、4分为阳性(++)，5、6分为强阳性(+++)。结果分为阴性(0分)及阳性(+～+++)两组进行分析。

1.5 乳腺癌分子分型标准

分子分型标准为2013年第十三届St.Gallen国际乳腺癌会议专家共识[6-7]，即:①luminal A型：免疫组织化检测结果为ER阳性和(或)PR阳性，Her-2阴性，Ki-67<20%；②luminal B型：ER阳性或PR阳性，Her-2 阳性；或ER阳性和(或)PR阳性，Her-2阴性，Ki-67≥20%；③Her-2型：ER、PR阴性，Her-2阳性，Ki-67多为高表达；④Basical-like型：ER(-)和PR(-)/HER-2(-)。本组研究对象73例均为luminal型乳腺癌，其中luminal A型40例、luminal B型33例。

1.6 统计学方法

乳腺癌组织在不同的临床病理因素(年龄、月经、肿块大小、有无淋巴结转移、分期)下TBX3表达率的差异均采用χ2检验，如出现个别因样本数较少，不符合χ2检验条件，则采用确切概率分析法，相关性检验采用Spearman相关分析(χ2检验、确切概率分析法、Spearman相关分析均运用SAS 8.02软件包对数据进行处理)，P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 Luminal型乳腺癌中TBX3表达与其临床病理参数的关系

TBX3表达主要定位于细胞核，阳性表达为境界清晰、突出于背景的黄色或棕黄色。73例luminal型乳腺癌组织中，TBX3表达阳性率为82.19%(60/73)；其与乳腺癌临床病理参数的关系见表1。

表1 TBX3表达与luminal型乳腺癌临床病理参数的关系/例

2.2 Luminal型乳腺癌组织中TBX3表达与P53、PS2、Her-2、Ki-67蛋白表达的相关性

Luminal型乳腺癌组织中，TBX3表达阳性率为82.19%，P53阳性表达率为46.58%(34/73)，两者呈正相关关系(γ=0.36283，P=0.0016<0.05)；PS2阳性表达率为71.23%(52/73)，两者无明显相关性(γ=-0.1761，P=0.2457>0.05)，见表2。

表2 Luminal型乳腺癌组织中TBX3表达与P53、PS2蛋白表达的相关性/例

3 讨论

3.1 TBX3与luminal型乳腺癌

乳腺癌是1个多基因突变驱动的疾病，TBX3基因是乳腺癌相关的癌基因之一[8]。TBX基因家族也称T-box，它具有高度保守的DNA结合区-T区，T区具有回文结构的双链DNA的两个位点，其中的一个位点与靶基因的启动子特点序列相结合形成半位结合体，并通过与不同的转录因子结合发挥不同的作用[9]。TBX3不但与生长发育有关，它与多种肿瘤的发生发展中关系密切，国内学者[10]研究发现TBX3基因在癌组织中的表达高于癌旁组织，作者单位先前研究提示TBX3在乳腺癌中的表达明显高于良性肿瘤和癌旁组织，中晚期乳腺癌表达明显高于早期乳腺癌，研究发现TBX3在乳腺癌在luminal A型、luminal B型乳腺癌中高表达，提示结果提示TBX3基因与乳腺癌的发生发展及预后因素有关，而且它与luminal A型、luminal B型乳腺癌的关系密切，可能是luminal型乳腺癌预后因子之一[4]。本研究结果显示TBX3在luminal型乳腺癌组织中表达的阳性率为82.19%，TBX3的表达与患者的年龄及有无绝经无关，与乳腺癌肿块的大小、淋巴结转移及分期有关，它在肿块大于2 cm、有淋巴结转移、Ⅱ、Ⅲ期luminal型乳腺癌中呈高表达。这提示TBX3在luminal型乳腺癌的发生进展及侵袭过程中发挥了作用。

3.2 TBX3与P53

P53是1种促进凋亡的细胞因子，即野生型P53，在正常的情况下，它在细胞内的表达维持低水平，主要作用于受损的细胞，延缓细胞周期停滞在G1/S节点上以修复损伤DNA，而当DNA损伤超过细胞的修复能力时，就诱导细胞发生凋亡[11]。野生型P53是人体细胞内最有效的肿瘤抑制因子之一，但也是最容易发生突变的蛋白之一，突变型P53一方面丧失了野生型P53的抑癌活性，另一方面能产生获得性功能，反而促进癌症的发生与发展[12]。也就是说，突变型P53由原来的抑癌基因变成了癌基因，从而促进正常细胞的转化或加速已经转化的细胞进一步恶化[13]。研究表明，在乳腺癌、直肠癌、胃癌、子宫内膜癌等多种恶性肿瘤中均发现了突变型P53基因的高表达[14-17]。本研究结果显示，P53在luminal型乳腺癌组织中的阳性表达率为46.58%，并且与TBX3的表达呈正相关关系，提示luminal型乳腺癌组织中TBX3表达上调可能与突变型P53基因的表达上调有关。

3.3 TBX3与PS2

PS2是雌激素诱导蛋白之一，由Masialowski于1982 年从激素依赖性乳腺癌MCF-7细胞株中提取出来的，在乳腺癌中阳性表达率约为43%～58%，它是一种雌性激素调节的基因产物，其表达反映ER功能，研究表明，PS2在反映肿瘤恶性程度上有重要价值，其阳性率越高，则肿瘤的恶性程度越低，患者预后越好[18]。本研究发现PS2在luminal型乳腺癌中的阳性表达率为71.23%，高于陈守菊等[19]报道的PS2在乳腺癌中阳性表达率45.6%，这考虑与本研究的对象为luminal型乳腺癌有关，luminal型乳腺癌ER为阳性，这正好了说明PS2是反映ER功能的指标。在TBX3与PS2在luminal型乳腺癌组织中表达的相关性分析方面，没有发现两者有相关性关系。

综上所述，TBX3在luminal型乳腺癌中的表达患者的年龄及是否绝经无关；与乳腺癌肿块的大小、淋巴结转移及分期有关，它在肿块大于2 cm、有淋巴结转移、Ⅱ、Ⅲ期luminal型乳腺癌中呈高表达。这提示TBX3可能与乳腺癌的发生进展及侵袭过程有关；在luminal型乳腺癌中，TBX3与P53 蛋白表达呈正相关关系，提示TBX3与P53在luminal型乳腺癌的进展中可能具有协同作用；TBX3与Her-2及PS2无明显的相关性关系。

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(编辑：吴小红)

Expression of TBX3 and the Correlations with P53、PS2 in Luminal Breast Cancer

HUANG Yan,WU Kejin，JIANG Feng，et al.

Chongming branch of Xinhua Hospital Affiliated to Shanghai Jiaotong University School of Medicine,Shanghai,202150

Objective To study the expression of TBX3 and its clinical significance in luminal breast cancer.Methods Luminal breast cancer tissues were detected by immunohistochemistry for TBX3,and analyzed the relation between the expression of TBX3 and the clinical pathologic parameters.Results ①The positive rate of TBX3 express in the luminal breast cancer was 82.19%;②The expression of TBX3 was not correlated with the age of patient and menopause or not(P>0.05),but was correlated with the size of mass in the breast,the cancer lymph node metastasis and the clinical stage of breast cancer (P<0.05).③The expression of TBX3 was positively correlated with the expression of P53(γ=0.36283，P<0.05);There were no correlations between the expression of TBX3 and the expression of PS2(γ=-0.1761，P>0.05).Conclusion TBX3 associated with the progression and invasive process of luminal breast cancer，and is positively correlated with P53.

Breast cancer;TBX3;P53;PS2

上海崇明县青年科技启明星项目(编号：CQYL 2014-01)

202150 上海交通大学医学院附属新华医院崇明分院(黄 燕，姜 峰，杨 英，倪国英，丁 罡)；200092 上海交通大学医学院附属新华医院(吴克瑾)

丁 罡

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.03.006

R737.9

A

1001-5930(2017)03-0367-03

2016-06-02

2017-02-07)