红花黄色素联合二甲双胍对早期糖尿病肾病患者氧化应激、胰岛素抵抗及肾功能的影响

鲍喜静 李建英 彭一 董陆玲 唐宏霞 杨秀红 王新婷 辛丽娟 张翠静 吴嘉鸣

·论著·

红花黄色素联合二甲双胍对早期糖尿病肾病患者氧化应激、胰岛素抵抗及肾功能的影响

鲍喜静 李建英 彭一 董陆玲 唐宏霞 杨秀红 王新婷 辛丽娟 张翠静 吴嘉鸣

目的 观察红花黄色素联合二甲双胍对早期糖尿病肾病(DN)患者氧化应激、胰岛素抵抗及肾功能的影响。方法 选取2015年10月至2016年10月诊治的DN患者80例，随机分为对照组和观察组，每组40例。2组均接受常规治疗，对照组在常规治疗基础上口服盐酸二甲双胍治疗，观察组在对照组基础上静脉滴注红花黄色素，疗程均为2周。观察2组血清空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 hPG)、胰岛素(FINS)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、8异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)、胱抑素C(Cys C)、同型半胱氨酸(Hcy)、24 h尿蛋白量、尿白蛋白排泄率(UAER)变化，计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果 与治疗前比较，2组治疗后FBG、2 hPG、FINS、HOMA-IR、MDA、Cys C、Hcy水平均较治疗前显著降低(P<0.05)，GSH-Px、SOD水平均较治疗前显著升高(P<0.05)，且观察组上述指标改善程度优于对照组(P<0.05)。结论 红花黄色素联合二甲双胍治疗早期糖尿病肾病能够显著降低氧化应激水平，改善胰岛素抵抗，从而发挥肾脏保护作用。

红花黄色素；二甲双胍；糖尿病肾病；氧化应激；胰岛素抵抗；肾功能

糖尿病肾病(diabetic nephrology，DN)是以肾小球血管受损、细胞外基质积聚、肾小球硬化以及结节性病变为主的糖尿病微血管病变之一，其引发的肾功能衰竭是导致糖尿病患者致死的重要原因[1,2]。因此，DN的早期诊断和治疗对于延缓肾功能损伤、降低病死率至关重要。DN发病机制复杂，其中氧化应激在DN发生发展过程中发挥重要作用，且与胰岛素抵抗密切相关[3,4]。红花黄色素是活血化瘀类中药红花的主要成分，主要含有羟基红花黄色素A，具有通经、活血、止痛的功效。现代药理学研究表明，红花黄色素具有扩张血管、抑制血小板聚集及血栓形成、增加局部血液灌注、改善微循环等作用，能够从多靶点治疗肾脏疾病[5]。本研究在二甲双胍降低血糖基础上加用红花黄色素治疗DN，观察二者联合治疗的临床疗效及对患者血清氧化应激指标、胰岛素抵抗及肾功能的影响，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015年10月至2016年10月我院收治的DN患者80例，随机分为对照组和观察组，每组40例。对照组男22例，女18例；年龄35～71岁，平均(50.45±7.12)岁；病程6～17年，平均(8.26±1.13)年。观察组男23例，女17例；年龄33～70岁，平均(49.74±7.03)岁；病程7～16年，平均(9.06±1.20)年。2组年龄、性别比、病程等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。见表1。

组别年龄(岁)男/女(例)FBG(mmol/L)24h尿微量白蛋白(mg)病程(年)对照组50.45±7.1222/187.51±0.86140.25±23.578.26±1.13观察组49.74±7.0323/177.49±0.82137.44±20.699.06±1.20

1.2 纳入及排除标准

1.2.1 纳入标准：①符合2010年美国糖尿病学会制定的2型糖尿病诊断标准；②符合2013年第八版《内科学》制定的早期DN诊断标准，即尿白蛋白排泄率持续性增加超过20～200 μg/min；③发病持续时间超过1年；④所有患者签署知情同意书。

1.2.2 排除标准：①合并心﹑肝﹑肺﹑肾等重要脏器功能不全者；②高血压、尿路结石等疾病引起的尿蛋白增加者；③自身免疫性疾病、恶性肿瘤患者；④药物过敏患者。

1.3 治疗方法 2组均进行糖尿病宣教、低蛋白饮食、适量运动等常规治疗。对照组在常规治疗基础上口服盐酸二甲双胍片(中美上海施贵宝制药有限公司， 国药准字H20023370)，2 g/d，分次口服。观察组在对照组基础上加用红花黄色素(浙江永宁药业股份有限公司，批号 220050146)，100 mg红花黄色素溶于250 ml 0.9%氯化钠溶液中静脉滴注，1次/d。疗程均为2周。

1.4 观察指标 观察2组血清空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2hPG)、胰岛素(FINS)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、8异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)、胱抑素C(Cys C)、同型半胱氨酸(Hcy)、24 h尿蛋白量、尿白蛋白排泄率(UAER)变化，计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。

1.5 检测方法

1.5.1 标本采集:分别于治疗前后抽取患者清晨空腹静脉血5 ml，3 000 r/min离心10 min，分离血清，-20℃保存备用。

1.5.2 生化指标:采用酶法测定FBG、2 hPG 水平。

1.5.3 FINS、HOMA-IR:采用放射免疫法测定FINS水平。公式法计算HOMA-IR， HOMA-IR=FBG(mmol/L)×(mU/L)/22.5。

1.5.4 氧化应激指标:采用硫化巴比安酸法测定MDA水平，氮蓝四唑法测定SOD水平，比色法测定GSH-Px水平。

1.5.5 8-iso-PGF2α:采用ELISA法测定血清8-iso-PGF2α水平，试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司。严格按照试剂盒说明书操作。在酶标仪450 nm波长处测定各孔吸光度值(OD值)，根据说明书提供的标准品浓度及测得的OD值得到标准曲线的直线回归方程，即可计算出各样品浓度。

1.5.6 肾功能指标:采用7080全自动生化分析仪测定BUN、Scr、Cys C、Hcy水平。同时留取患者隔夜尿，采用化学发光免疫分析仪测定24 h尿蛋白量、UAER。

2 结果

2.1 2组血糖、胰岛素水平比较 2组治疗前FBG、2hPG、FINS、HOMA-IR比较差异无统计学意义(P>0.05)；2组治疗后FBG、2hPG、FINS、HOMA-IR均较治疗前显著降低，差异有统计学意义(P<0.05)，且观察组降低程度优于对照组(P<0.05)。见表2。

组别FBG(mmol/L)2hPG(mmol/L)FINS(mU/L)HOMA-IR对照组 治疗前7.51±0.868.41±0.8513.48±2.114.77±0.52 治疗后6.50±0.97*7.23±0.92*11.22±1.23*4.23±0.56*观察组 治疗前7.49±0.828.38±0.8213.90±2.134.81±0.53 治疗后5.88±0.62*#6.61±0.63*#8.13±0.96*#3.62±0.47*#

注：与治疗前比较,*P<0.05;与对照组比较,#P<0.05

2.2 2组氧化应激指标比较 2组治疗前GSH-Px、SOD、MDA比较差异无统计学意义(P>0.05)；2组治疗后GSH-Px、SOD均较治疗前显著升高，MDA均较治疗前显著降低，差异有统计学意义(P<0.05)，且观察组改善程度优于对照组(P<0.05)。见表3。

2.3 2组8-iso-PGF2α水平比较 2组治疗前8-iso-PGF2α水平比较差异无统计学意义(P>0.05)；2组治疗后8-iso-PGF2α均较治疗前显著降低，差异有统计学意义(P<0.05)，且观察组降低程度优于对照组(P<0.05)。见表4。

组别GSH-Px(U)SOD(U/ml)MDA(cB/μmol/L)对照组 治疗前376.23±42.7558.42±8.366.99±0.83 治疗后409.52±51.34*66.72±9.55*5.72±0.63*观察组 治疗前381.23±40.8460.27±9.457.12±0.90 治疗后497.15±55.37*#79.21±10.45*#5.02±0.46*#

注：与治疗前比较,*P<0.05;与对照组比较,#P<0.05

2.4 2组肾功能指标比较 2组治疗前BUN、Scr、24 h 尿蛋白、UAER比较差异无统计学意义(P>0.05)；2组治疗后BUN、Scr、24 h尿蛋白、UAER均较治疗前显著降低，差异有统计学意义(P<0.05)，且观察组降低程度优于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表5。

组别8-iso-PGF2α(ng/ml)对照组 治疗前22.14±3.41 治疗后15.06±2.23*观察组 治疗前21.89±3.32 治疗后9.15±1.25*#

注：与治疗前比较,*P<0.05;与对照组比较,#P<0.05

组别BUN(mmol/L)Scr(μmol/L)24h尿蛋白(g/24h)UAER(μg/min)对照组 治疗前14.12±2.11246.24±25.212.51±0.3263.57±8.44 治疗后10.33±1.35*206.53±18.67*1.79±0.26*45.58±6.39*观察组 治疗前13.78±2.04250.43±27.452.49±0.2862.84±8.35 治疗后7.36±1.00*#154.48±12.69*#1.04±0.15*#20.61±3.68*#

注：与治疗前比较,*P<0.05;与对照组比较,#P<0.05

2.5 2组Cys C、Hcy水平比较 2组治疗前Cys C、Hcy水平比较差异无统计学意义(P>0.05)；2组治疗后Cys C、Hcy水平均较治疗前显著降低，差异有统计学意义(P<0.05)，且观察组降低程度优于对照组(P<0.05)。见表6。

组别CysC(μmol/L)Hcy(mg/L)对照组 治疗前20.34±2.671.78±0.27 治疗后16.99±2.41*1.11±0.18*观察组 治疗前19.58±2.451.76±0.25 治疗后11.78±1.91*#0.65±0.09*#

注：与治疗前比较,*P<0.05;与对照组比较,#P<0.05

3 讨论

近年来，氧化应激在DN发生发展中的作用越来越受到重视，其产生的活性氧(ROS)和活性氮(RNS)参与DN的多种病理机制[6,7]。高糖状态极易诱发氧化应激反应，过多的ROS主要来源于线粒体氧化呼吸链、晚期糖基化终产物合成、PKC信号途径、一氧化氮合酶等，而ROS生成增多又进一步激活以上通路从而造成氧化损伤不断扩大[8,9]。研究显示，ROS、RNS可对线粒体结构造成直接破坏，从而导致SOD、CTA、GPX等抗氧化酶缺失，进而使得机体清除氧自由基的能力降低。

本研究选用GSH-Px、SOD、MDA、8-iso-PGF2α反映机体氧化应激状态。其中GSH-Px、SOD是线粒体产生的抗氧化酶，是机体主要抗氧化物质之一，其水平高低直接反映机体抗氧化能力强弱。MDA是脂质过氧化产物，间接反映机体过氧化反应程度。8-iso-PGF2α是DNA氧化应激损伤的特异性指标，反映机体DNA过氧化反应程度[10,11]。本研究结果显示，两组治疗前GSH-Px、SOD、MDA、8-iso-PGF2α比较差异无统计学意义(P>0.05)；2组治疗后GSH-Px、SOD均较治疗前显著升高，MDA、8-iso-PGF2α均较治疗前显著降低，差异有统计学意义(P<0.05)，且观察组改善程度优于对照组(P<0.05)。提示红花黄色素联合二甲双胍能够明显降低机体氧化应激水平，增强抗氧化能力。

此外，已有研究证实氧化应激不仅能够直接损伤胰岛β细胞，促进其凋亡，还通过多个途径干扰胰岛素信号传导，从而导致胰岛素抵抗状态。本研究结果表明，2组治疗前FBG、2 hPG、FINS、HOMA-IR比较差异无统计学意义(P>0.05)；2组治疗后FBG、2 hPG、FINS、HOMA-IR均较治疗前显著降低，差异有统计学意义(P<0.05)，且观察组降低程度优于对照组(P<0.05)。说明红花黄色素联合二甲双胍能够明显改善DN患者胰岛素抵抗，从而发挥降糖作用。

Cys C是评价肾小球滤过功能的内源性标志物，是检测早期肾功能损害的可靠指标，且其生成不受性别、年龄、疾病等因素影响[12,13]。Hcy作为蛋氨酸代谢的中间产物，通过细胞毒性作用、诱导氧化应激等途径损伤血管内皮，与糖尿病微血管病的发生发展密切相关[14,15]。本研究结果显示，2组治疗前Cys C、Hcy、BUN、Scr、24 h尿蛋白、UAER水平比较差异无统计学意义(P>0.05)；2组治疗后Cys C、Hcy、BUN、Scr、24 h 尿蛋白、UAER水平均较治疗前显著降低，差异有统计学意义(P<0.05)，且观察组降低程度优于对照组(P<0.05)。提示红花黄色素联合二甲双胍能够明显改善DN患者受损的肾功能，与他人研究结果[16,17]一致。

综上所述，红花黄色素联合二甲双胍治疗早期糖尿病肾病能够有效延缓肾小球硬化及肾间质纤维化进程，降低尿蛋白，从而发挥肾脏保护作用，效果优于单纯二甲双胍治疗，具有一定临床应用价值。其机制与抑制氧化应激、改善胰岛素抵抗有关。本研究为红花黄色素应用于糖尿病肾病的临床治疗中提供了实验依据。

1 梁德平.丹红注射液联合缬沙坦早期干预高血压肾病的疗效观察.现代中西医结合杂志，2015，24：60-62.

2 张颖.氯沙坦联用阿托伐他汀治疗早期糖尿病肾病的临床疗效分析.糖尿病新世界，2016，14：38-40.

3 宿世震，刘杰.α-硫辛酸对早期糖尿病肾病患者保护作用机制研究.亚太传统医药，2015，11：108-110.

4 冯亚敏，徐家蓉，游娜，等.硫辛酸对早期糖尿病肾病微量白蛋白尿及氧化 应激的影响.实用临床医药杂志，2014，18：95-97.

5 易晔，卢远航.红花黄色素对维持性血液透析患者微炎症的影响.中华临床医师杂志(电子版)，2013，7：2249-2250.

6 Cui Y,Xu Q,Chow PKH,et al.Transferrin-conjugated magnetic silica PLGA nanoparticles loaded with doxorubicin and paclitaxel for brain glioma treatment.Biomaterials,2013,34:8511-8520.

7 任春久，张瑶，崔为正，等.氧化应激在2型糖尿病发病机制中的作用研究进展.生理学报，2013，65：664-673.

8 Hadjadj S,Cariou B,Fumeron F,et al.Death,end-stage renal disease and renal function decline in patients with diabetic nephropathyin French cohorts of type 1 and type 2 diabetes.Diabetologia,2016,59:208-216.

9 谢崇凡，吴启斌，周海川.ARB 联用ACEI治疗老年糖尿病肾病的临床效果观察.海南医学院学报，2013，19：338-340.

10 Ying Z,Li Y,Wu J,et al.Loss of miR-204 expression enhances glioma migration and stem cell-like phenotype.Cancer research,2013,73:990-999.

11 Galldiks N,Rapp M,Stoffels G,et al.Response assessment of bevacizumab in patients with recurrent malignant glioma using [18F] Fluoroethyl-L-tyrosine PET in comparison to MRI.European journal of nuclear medicine and molecular imaging,2013,40:22-33.

12 李君莲，木合塔尔·麦合素提，基连成.联合检测血清胱抑素C和同型半胱氨酸在2型糖尿病肾病早期诊断中的意义.重庆医学，2012，41： 654-655.

13 白福艳，王译晨，高影，等.血清胱抑素C测定对糖尿病肾病早期诊断的临床意义.中国实验诊断学，2013，17：2019-2022.

14 刘树娇，唐灵，陆慧慧.同型半胱氨酸、白介素18、 高敏C反应蛋白与2 型糖尿病肾病的相关性研究.实用医院临床杂志，2013，10：65-67.

15 候卫科，孙云霞.血清胱抑素C与尿微量清蛋白联合检测在糖尿病肾病早期诊断中的临床价值.国际检验医学杂志，2014，35：3431-3432.

16 高燕，袁鲁亮，刘占全，等.红花黄色素在早期糖尿病肾病中的应用价值.陕西医学杂志，2015，44：298-299.

17 高燕，袁鲁亮，郑鹏，等.红花黄色素联合贝那普利对早期糖尿病肾病患者肾功能的影响.现代生物医学进展，2015，15：4333-4336.

Effects of safflower yellow combined with metformin hydrochloride on oxidative stress,insulin resistance and renal function in patients with early diabetic nephropathy

BAOXijing*,LIJianying,PENGYi*,etal.

*DepartmentofEndocrinology,TheFirstHospitalofZhangjiakouCity,Hebei,Zhangjiakou075000,China

Objective To observe the effects of safflower yellow combined with metformin hydrochloride on oxidative stress,insulin resistance and renal function in patients with early diabetic nephropathy (DN).Methods A total of 80 patients with DN who were admitted and treated in our hospital from October 2015 to October 2016 were enrolled in the study.These patients were randomly divided into observation group (n=40) and control group (n=40).The patients in both groups were treated by conventional therapy,in addition to that,the patients in control group were treated by oral metformin hydrochloride,however,the patients in observation group,on the basis of control group,were given safflower yellow by intravenous drip,with a treatment course of 2 weeks for both groups. The changes of levels of FBG, 2hPG,FINS,GSH-Px,SOD,MDA,8-iso-PGF2α,Cys C,Hcy,24h urine protein,UAER and HOMA-IR before and after treatment were observed and compared between two groups.Results As compared with those before treatment,the levels of FBG, 2hPG, FINS,HOMA-IR,MDA,8-iso-PGF2α,Cys C,Hcy,24h urine protein and UAER were significantly decreased after treatment in both groups (P<0.05), however, the levels of GSH-Px, SOD were significantly increased in both groups (P<0.05),moreover, the improvement degree in observation group was suprior to that in control group (P<0.05).Conclusion The safflower yellow combined with metformin hydrochloride in treatment of early DN can obviously reduce oxidative stress and improve insulin resistance to bring into play a protective effect on renal function of patients.

safflower yellow; metformin hydrochloride; diabetic nephropathy; oxidative stress; insulin resistance; renal function

10.3969/j.issn.1002-7386.2017.12.005

075000 河北省张家口市第一医院内分泌科(鲍喜静、彭一、董陆玲、唐宏霞、杨秀红、王新婷、辛丽娟、张翠静、吴嘉鸣)，重症监护科(李建英)

R 587.24

A

1002-7386(2017)12-1780-04

2016-12-08)