通腑定喘汤对慢性阻塞性肺疾病急性加重期痰热壅肺型患者MMP-9/TIMP-1失衡的影响

胡丹丹 徐宇杰 楼黎明 夏文进 陈素珍 王世强

浙江中医药大学附属第三医院 杭州 310005

通腑定喘汤对慢性阻塞性肺疾病急性加重期痰热壅肺型患者MMP-9/TIMP-1失衡的影响

胡丹丹 徐宇杰 楼黎明 夏文进 陈素珍 王世强

浙江中医药大学附属第三医院 杭州 310005

[目的]探讨通腑定喘汤对慢性阻塞性肺病急性加重期（Acute Exacerbation Chronic obstructive pulmonary disease，AECOPD）痰热壅肺型患者血清基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9，MMP-9)/基质蛋白金属酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloprotease-1,TIMP-1)的影响。[方法]60例AECOPD属痰热壅肺型患者按随机数字表法分为治疗组和对照组，每组各30例；两组常规治疗相同，治疗组予每日加用通腑定喘汤，连用14d。酶联免疫吸附法检测两组患者治疗前后血清MMP-9及TIMP-1含量。[结果]组间比较，治疗后治疗组患者血清MMP-9含量及MMP-9/TIMP-1比值均较对照组明显降低，差异有统计学差异（P<0.05）。组内比较，治疗组患者血清MMP-9、TIMP-1含量及MMP-9/TIMP-1比值较治疗前降低，差异有统计学差异（P<0.05）。[结论]通腑定喘汤对AECOPD痰热壅肺型患者血清MMP-9/TIMP-1失衡有调节作用。

慢性阻塞性肺疾病急性加重；痰热壅肺；通腑定喘汤；基质金属蛋白酶-9；基质蛋白金属酶抑制剂-1

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)是一种发生机制至今尚不完全明确的呼吸系统常见疾病，以持续气流受限为主要特征。在COPD发生机制方面，近年来的研究表明，基质金属蛋白酶9(matrix metallopeptidase 9，MMP-9)/基质金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase 1，TIMP-1)比值起着主要作用[1]。通腑定喘汤由定喘汤加制大黄组成，前期临床研究揭示，属痰热壅肺型的慢性阻塞性肺病急性加重期（Acute Exacerbation Chronic obstructive pulmonary disease，AECOPD）患者，使用通腑定喘汤14d后，可显著降低血清炎症指标、改善患者肺功能并能提高临床疗效[2]。现代药理表明定喘汤及大黄均具有抑菌、抗病毒、抗炎等作用[3,4]，而对MMP-9/TIMP-1是否有调节作用尚无文献报道。本研究试图通过观察通腑定喘汤对属痰热壅肺型AECOPD患者血清MMP-9、TIMP-1及MMP-9/TIMP-1比值的影响，拟进一步探讨其可能的作用机制。

1 资料与方法

1.1 临床资料 研究对象为在我院2014年8月至2015年8月期间住院治疗的AECOPD患者。诊断标准：中医辨证标准参照《中药新药临床研究指导原则》[5]；西医诊断标准参照《慢性阻塞性肺疾病诊治指南》（2013年修订版）[6]。（1）西医诊断标准：患者符合COPD诊断标准，近期表现咳嗽加重，黄脓痰增多，发热，呼吸困难等。（2）中医辨证：痰热壅肺证：咳嗽，咯痰黄稠而量多，胸闷，气喘息粗，甚则鼻翼煽动，或喉中痰鸣，烦躁不安，发热口渴，或咳吐脓血腥臭痰，胸痛，大便秘结，小便短赤，舌红苔黄腻，脉滑数。纳入标准：（1）符合AECOPD西医诊断标准和中医辨证诊断标准，排除肺心病患者；（2）近3月内未参与其他临床治疗；（3）自愿参加，对研究内容充分了解并签署知情同意书。排除标准：（1）不符合上述标准者；（2）合并血液系统、肝、肾等重要脏器严重疾患者；（3）合并意识障碍、癫痫、精神病、脑血管病等患者；（4）不能配合治疗，依从性差患者；（5）处于疾病稳定期患者。将60例证属痰热壅肺型AECOPD患者按照随机数字表法分为对照组和治疗组。对照组30例，男19例，女11例，平均年龄（71.01±6.8）岁，平均病程（13.83±5.0）年，病情程度：轻度7例(24%)，中度14例(46%)，重度9例(30%)；治疗组30例，男20例，女10例，平均年龄（68.52±7.4）岁，平均病程（14.01±4.1）年，病情程度：轻度8例(27%)，中度13例(43%)，重度9例(30%)。对两组患者的年龄、性别、病程、病情程度等资料经统计学处理，显示无统计学差异（P>0.05），具有可比性。

1.2 治疗方法 对照组采用常规西药治疗：持续低流量吸氧、支气管扩张剂改善气道痉挛、抗生素抗感染、化痰、糖皮质激素抑制炎症反应等对症治疗。按对照组上述常规治疗的基础上，治疗组加服通腑定喘汤（制大黄10g，黄芩10g，炙麻黄6g，杏仁10g，桑白皮10g，白果10g，炙苏子15g，法半夏10g，款冬花10g，大枣10g）治疗。通腑定喘汤药物每日1剂，由本院中药房采用全自动煎药机代煎，每次煎取200mL，早晚分2次温服，共服14d。分别于治疗前1天及治疗结束后第1天抽取患者血清5mL，离心后备用。

1.3 观察指标 酶联免疫吸附法检测两组患者治疗前后血清MMP-9及TIMP-1含量。MMP-9 ELISA试剂盒、TIMP-1 ELISA试剂盒均购自sigma公司，货号分别为RAB0372、RAB0467。

1.4 统计学处理 统计学分析使用SPSS 20.0统计软件：计量资料以(±s)表示，若符合正态性分布，采用两独立样本t检验；若非正态分布，则采用非参数检验。P<0.05则视为差异有统计学意义。

2 结果

治疗前，两组患者血清MMP-9、TIMP-1含量及MMP-9/TIMP-1比值相互比较，差异无统计学；治疗14d后，两组患者血清MMP-9、TIMP-1含量及MMP-9/TIMP-1比值较治疗前降低，差异有统计学差异（P< 0.05），而治疗组患者血清MMP-9含量及MMP-9/ TIMP-1比值均较对照组降低明显，差异有统计学差异（P<0.05）。见表1。

表1 两组血清MMP-9、TIMP-1和MMP-9/TIMP-1比值变化(±s)

表1 两组血清MMP-9、TIMP-1和MMP-9/TIMP-1比值变化(±s)

注：与本组治疗前相比，*P<0.05；与对照组同期相比，#P<0.05。

组别 治疗组对照组治疗前 治疗后 治疗前 治疗后MMP-9（ng/ml）TIMP-1（ng/ml）MMP-9/TIMP-1比值258.58±40.26 154.87±41.26 1.75±0.42 141.27±30.55*#137.39±50.74*1.09±0.29#261.83±42.01 162.37±43.44 1.74±0.58 177.99±42.71*140.06±25.49*1.31±0.39*

3 讨论

COPD是以气道不完全性可逆气流受限为特征的一种常见病，肺实质破坏、黏液高分泌、气道重塑等多种原因都可导致COPD气流持续受限，而导致气流受限的重要不可逆因素为气道重塑。引起气道壁结构异常构建的重要原因则是细胞外基质（extracellular matrix，ECM）的降解和沉积失衡。MMP-9是MMPs家族的重要成员，可破坏COPD患者的肺泡结构及肺泡基质成分，降解气道和肺的ECM和基底膜，进而介导炎症细胞聚集、破坏气道内皮和上皮结构，从而参与到气道重塑过程[7,8]，导致气流不可逆受限。TIMP-1则是MMP-9的天然抑制因子，其对MMP-9活性有明显抑制作用，可促进ECM在气道壁大量沉积，从而具有修复气道基底膜的作用[9]。正常情况下，MMP-9/ TIMP-1保持平衡，维持ECM的稳态。在炎症等因素刺激下，MMP-9/TIMP-1比例失调，ECM失去稳态，二者就参与到气道炎症、修复过程中。因此，若能调节MMP-9/TIMP-1比值失衡，即可抑制气道重塑，进而可改善气流受限，由此可为AECOPD患者提供新的治疗思路。

痰热蕴结、肺气郁闭、肺失宣降[10]是AECOPD的主要病机特点，课题组前期临床研究表明，“肺气失宣→痰热壅肺→肺壅腑实”极可能是导致AECOPD患者出现气道炎症、气道重塑和进行性气道受限的关键性病理环节。在“肺与大肠相表里”及“治病理当攻邪，邪去而元气自复”等中医理论指导下，课题组予通腑定喘汤治疗此类患者。该方由定喘汤加制大黄组成，通过肺肠同治，上宣下通，因势利导，使得腑通邪去，肺气自复。前期临床观察表明，通腑定喘汤用于属痰热壅肺型的AECOPD患者，可降低患者炎症指标、改善患者的肺功能并显著提高患者的临床疗效[2]。现代药理证实，定喘汤有抗变态反应、抗病毒、抑菌、抗炎等作用，且具抗炎、平喘、化痰之效[3]。大黄对链球菌及葡萄球菌等多数革兰氏阳性菌和某些革兰氏阴性菌，均具有较强抑制作用；此外大黄还具有消除内毒素和抗病毒的作用[4]。本研究通过观察通腑定喘汤对AECOPD患者血清MMP-9、TIMP-1含量及MMP-9/TIMP-1比值的影响，以进一步探讨其可能的作用机制。研究表明，与对照组比较，治疗组患者血清MMP-9含量及MMP-9/TIMP-1比值均较对照组明显降低，降低有统计学意义（P<0.05）。治疗组治疗前后比较，治疗后各项指标均较治疗前下降，降低有统计学意义（P<0.05）。表明通腑定喘汤改善AECOPD的机制可能与其调节MMP-9/TIMP-1失衡相关，其深入的作用机制有待进一步研究。

[1]Yang XP,Zhou ZS,Hu HB,et al.Effects of Gubenkeli capsule on matrix metallopeptidase-9 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 levels in lung tissue of a rat model of chronic obstructive pulmonary disease[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2011,15 (11):2087-2090．

[2]徐宇杰，胡丹丹，楼黎明，等.通腑定喘汤治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期痰热壅肺型30例观察[J].浙江中医杂志，2015，50(11)：790-791.

[3]李德顺，李亚清.定喘汤及其拆方治疗哮喘药理作用实验研究[J].天津中医学院学报,2003，22(1)：16-18.

[4]丁丽，邹宇，李智永.大黄的药理与临床应用[J].中国现代药物应用,2011，5（4）：165-166.

[5]郑筱萸.中药新药临床研究指导原则[M].北京：中国医药科技出版社，2002：54-57.

[6]中华医学会呼吸病学分会慢性阻塞性肺疾病学组.慢性阻塞性肺疾病诊治指南(2013年修订版)[J].中华结核和呼吸杂志，2013，36(4)：255-264.

[7]Yang Xiaoping，Zhou Zhaoshan，Hu Haibo，et al.Effects of Gubenkeli capsule on matrix metallopeptidase 9 and tissue inhibitor of metalloproteinase 1 levels in lung tissue of a rat model of chronic obstructive pulmonary disease[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research，2011，15(11)：2087-2090.

[8]Yadav RK，Gupta SP，Sharma PK，et al．Recent advances in studies on hydroxamates as matrix met alloproteinase inhibitors:areview[J]．Curr Med Chem，2011，18(11):1704-1722．

[9]Schirmer H，Bassoda Silva L，Teixeira PJ，et al.Matrix metalloproteinase gene polymorphisms：lack of association with chronic obstructive pulmonary disease in a Brazilian population[J].Genet Mol Res，2009，8(3)：1028-1034.

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Influence of Tongfu Dingchuan Decoction on Expression of MMP-9/TIMP-1 in Acute Exacerbation Chronic Obstructive Pulmonary Disease Patients with Syndrome of Phlegm-heat Obstructing Lung

HU Dandan，XU Yujie，LOU Liming，et al
The Third Hospital Affiliated to Zhejiang Traditional Chinese Medical University,Hangzhou(310005)

[Objective]To observe the effect of Tongfu Dingchuan Decoction on expression of MMP-9/TIMP-1 in acute exacerbation chronic obstructive pulmonary disease patients with syndrome of phlegm-heat obstructing lung.[Methods]60 patients of AECOPD with syndrome of phlegm-heat obstructing lung were randomly divided into two groups(each n=30).The treatmeat group were treated by Tongfu Dingchuan Decoction,while all patients in the two groups were treated following the routine western medicine.All patients would be treated for 14 days.MMP-9 and TIMP-1 in serum were detected by enzyme-linked immunoassay(ELISA).[Results]After the therapeutic course,compared with normal group,the expressions of MMP-9 and MMP-9/TIMP-1 in serum were decreased in patients with COPD(P<0.05).[Conclusion]Tongfu Dingchuan Decoction has effect on patient with AECOPD by regulating the balance of MMP-9/TIMP-1.

acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease;phlegm-heat obstructing lung;Tongfu Dingchuan Decoction;Matrix metallopeptidase-9;tissue inhibitor of metalloproteinase 1

R273

：A

：1005-5509（2017）05-0397-03

10.16466/j.issn1005-5509.2017.05.013

2016-09-22）

浙江省中医药科技计划（2012ZA069；2012ZB069）

Fund project:Item of Zhejiang Provincial TCM Administration（2012ZA069；2012ZB069）

徐宇杰，E-mail：sky20010827@yeah.net