肠通对小鼠急性毒性的影响※

武 伟张岱权贺 葵洪 音王茂娇黄雨佳吴显和刘珉甬

肠通对小鼠急性毒性的影响※

武 伟1张岱权1贺 葵1洪 音2王茂娇2黄雨佳2吴显和3刘珉甬4

目的探讨肠通对小鼠急性毒性的影响。方法将36只SPF级小鼠随机分为对照组（n=12）和实验组（n=24），雌雄各半。对照组：采用0.9%氯化钠注射液灌胃，0.8 ml/只，1次/d，连续观察14 d；实验组：0.9%氯化钠注射液0.8 ml/只+肠通0.4 g灌胃，1次/d，连续观察14 d。比较两组小鼠一般情况及主要脏器外形、体积、颜色与病理检查结果。结果对照组与实验组小鼠精神状态、活动度、大便均正常，体重、进食量差异均无统计学意义（均 P＞0.05）；对照组与实验组小鼠各脏器均无变性、充血、水肿、坏死等异常现象；部分实验组小鼠肝细胞轻度水肿，双核细胞增多，远端结肠淋巴细胞增多，但肝、肾、结肠病理检查结果异常率与对照组比较差异均无统计学意义（均 P＞0.05）。结论在本实验条件下，肠通无明显急性毒性，安全性较高。

肠通；小鼠；急性毒性

便秘主要表现为排便频率减少，排便费力，粪便量减少或干结，是常见的消化系统疾病，发病率约为10%～15%，且呈逐年上升趋势[1]。其不仅可严重影响患者生命质量[2]，还可引发多种并发症，甚至导致心血管性猝死[3]，因此及时、有效防治便秘具有重要意义。目前，治疗便秘的西药包括泻剂、促动力药、钙通道阻滞剂等，虽然疗效较确切，但易出现不同程度不良反应，如胃肠胀气、腹痛、腹泻、头晕等，长期使用还易产生依赖性，诱发泻剂依赖性便秘[3]，各因素之间互相影响，导致便秘反复发作，

迁延难愈。目前国家卫生部大力推行特膳食品防治慢性疾病，临床急需安全有效、服用方便、价格低廉的食品防治便秘。肠通是依据中医“食药同源”特性，结合现代肠道微生态研究进展，根据便秘特点自主研制的食品。前期已对组方配伍及制剂工艺进行了相关研究，小样本人群实验取得良好效果，现开展肠通对小鼠急性毒性实验评价其安全性，为其应用于临床提供客观科学的实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物与分组 SPF级健康昆明小鼠36只 [由西南医科大学动物实验中心提供，动物生产许可证号：SCXK（川）2013-17]，随机分为对照组（n=12）和实验组（n=24），雌雄各半，体重18～22 g，自由饮食，饲料为依科达普通繁殖生产料[成都达硕实验动物有限公司，批号：苏饲审（2009）05032]。实验环境：西南医科大学动物实验中心，湿度：40%～70%，温度：20～25 ℃。

1.1.2 实验药品与试剂 0.9%氯化钠注射液（四川美大康佳乐药业有限公司，批号：15032142），肠通（西南医科大学护理器械研发实验室自主研发），10%甲醛溶液（上海榕柏生物技术有限公司，批号：060701），3%戊巴比妥钠（中国医药集团上海化学试剂公司，批号：F20050405）。

1.1.3 实验器材 动物电子称（上海花潮电器有限公司，型号：ES-06B），分析天平（上海卓精电子科技有限公司，型号：BSM/BS），1 ml、5 ml注射器（成都市新津事丰医疗器械有限公司，批号：160116），灌胃针（赞德仪器有限公司，型号：FNC-12-4），手术器械（深圳市瑞沃德生命科技有限公司，型号：SP1006-M），眼科镊（深圳市瑞沃德生命科技有限公司，型号：F14004-08），刀片（杭州华威医疗用品有限公司，批号：20100227），滤纸（杭州沃华滤纸有限公司，批号：GB/T1914-2007）。

1.2 实验方法实验动物适应性喂养7 d后，禁食不禁水12 h，分组进行干预。对照组采用0.9%氯化钠注射液灌胃，0.8 ml/只，1次/d，连续观察14 d；实验组采用0.9%氯化钠注射液0.8 ml/只+肠通0.4 g（肠通最大给药量为0.4 g,相当于临床剂量400倍）灌胃，1次/d，连续观察14 d。

1.3 观察指标

1.3.1 一般情况 每天观察并记录小鼠精神状态、活动度、体重、进食量、大便（性状、颜色）。

1.3.2 大体解剖观察 实验第15天用3%戊巴比妥钠腹腔麻醉后，颈椎脱臼处死小鼠并解剖，观察其心、肝、肺、肾、脾、胃、结肠外形、体积、颜色。1.3.3 显微镜下观察 在实验组及对照组分别随机选取50%小鼠切取肝脏、双侧肾脏、远端结肠8～10 mm，用10%甲醛溶液固定24 h后包埋、切片、苏木精-伊红染色法（HE染色）。观察：①肝组织、细胞结构是否完整，分界是否清楚，有无异常改变；②肾组织有无出血、肾小管结构有无异常改变、有无淋巴细胞浸润、皮质与髓质分界是否清楚；③远端结肠黏膜细胞有无异常改变。

1.4 统计学分析采用SPSS 21.0统计软件进行数据分析，计量资料以±s表示，组间比较采用 t检验，计数资料以百分率表示，组间比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般情况实验期间无小鼠病死，两组小鼠精神状态、活动度及大便性状颜色均正常。

2.2 体重变化对照组与实验组小鼠体重均稳定增长，差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 对照组和实验组小鼠体重变化比较(g,±s)

表1 对照组和实验组小鼠体重变化比较(g,±s)

组别 数量(只) 第1天 第5天 第9天 第13天对照组 12 18.5±0.9 19.5±0.9 22.1±1.0 26.3±1.2实验组 24 18.8±1.2 19.8±1.0 22.0±1.1 25.4±1.3 t值 0.78 0.63 0.28 1.97 P值 0.22 0.71 0.98 0.88

2.3 进食量比较 对照组与实验组小鼠进食量呈同步变化，差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。

表2 对照组和实验组小鼠进食量变化比较(g,±s)

表2 对照组和实验组小鼠进食量变化比较(g,±s)

组别 数量(只)第1天第5天第9天第13天对照组 12 3.8±0.3 3.48±0.1 2 3.92±0.1 8 3 .66±0.1 3实验组 24 3 .65±0.2 2 t值3.8±0.3 3.51±0.1 6 3.90±0.2 0 0.37 0.43 0.26 0.16 P值0.95 0.37 0.35 0.07

2.4 大体解剖肉眼观察对照组与实验组小鼠心、肝、肺、肾、脾、胃、结肠外形、体积、颜色均无异常。

2.5 显微镜下观察对照组小鼠肝脏、肾脏、远端结肠均正常，见图1、图3、图5。实验组小鼠肾组织结构正常，皮、髓质分界清楚，无淋巴细胞浸润，见图2；部分肝细胞轻度水肿，双核细胞增多，见图4；部分远端结肠淋巴细胞增多，见图6。对照组与实验组小鼠肝、肾、结肠病理检查结果异常率比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05），见表3。

图2 实验组肾脏(HE,×200)

图1 对照组肾脏(HE,×200)

图3 对照组肝脏(HE,×200)

图4 实验组肝脏 (HE,×200)

图5 对照组远端结肠(HE,×200)

图6 实验组远端结肠 (HE,×200)

表3 对照组和实验组小鼠病理检查结果比较[只(%)]

3 讨论

近年来，功能性食品治疗便秘取得了显著成效[4-5]，突显了其独有的特色与优势。肠通是自主研制食品，已申报国家发明专利，其主要成分为肠通1与肠通2单体。肠通1具有低聚木糖生理活性，前期预实验表明，能有效减少老年便秘发生。分析原因，可能是肠通 1分子具有多个亲水基团，可与水分子聚集成巨大分子，且黏度高，稳定性好有关。在胃肠道中，肠通 1能吸水与水形成黏稠胶状物，软化食物残渣而直接发生通便作用[6]。肠通 1是由2～10个单糖分子通过糖苷键连接形成的低度聚合糖，其可有效促进生物体内以双歧杆菌为代表的肠道有益菌群特异性增殖。多项研究证实低聚木糖可被多种双歧杆菌所代谢，产生一系列肠保健功能[7-9]。肠通 2是中药单体，促进肠蠕动作用显著。两者组合，是一种较好的润肠通便保健食品。

精神状态、活动度、体重、进食量、饮水量、大便是综合反映药物毒性对机体代谢、健康状况影响的基本指标。本研究中对照组和实验组小鼠精神状态、活动度均正常，体重稳定增长，进食量呈同步变化，大便性状正常。表明肠通最大给药量0.4 g对小鼠生长代谢无明显影响。内脏是机体发挥生理功能的场所，其组织结构的改变将对机体正常生理功能造成影响。本研究病理检查结果显示，部分肝细胞轻度水肿，双核细胞增多；部分远端结肠淋巴细胞增多。提示肠通0.4 g+0.9%氯化钠注射液0.8 ml灌胃对部分小鼠肝脏、远端结肠产生了一定影响，发生机制有待进一步研究，但对照组与实验组小鼠肝、肾、结肠病理检查结果异常率差异均无统计学意义。

综上所述，肠通的安全剂量约为0.4 g，相当于人临床用量的400倍，灌胃对小鼠的生长代谢无明显影响，且在该剂量范围内对小鼠肾脏也无可见病变损伤，安全性较高。

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[3] 张效东,蒲磊,史季.规范化便秘的诊断与治疗[J].中国实用医药, 2011,6(23):151-152.

[4] 翟丽丽.膳食纤维的研究进展[J].科技论坛,2014,1(1):70.

[5] 赵金凤,曲佳乐,皮子凤,等.植物酵素润肠通便保健功能研究[J].食品与发酵科技,2012,48(3):54-56.

[6] 王瑾,佘君,张彦亭,等.慢性便秘患者临床特征的研究[J].胃肠病学和肝病学杂志,2013,22(8):819-822.

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10.12010/j.issn.1673-5846.2017.05.009

1西南医科大学附属医院，四川泸州 646000

2西南医科大学护理学院，四川泸州 646000

3西南医科大学护理医疗器械研发实验室，四川泸州 646000

4泸州岷宏科技有限公司，四川泸州 646000

四川省科技厅支撑计划（编号：2016FZ0059）

武伟，主管护师。研究方向：应用技术和应用基础研究

刘珉甬，Email：1047986020@qq.com