脉血康软胶囊对缺血性脑卒中病人MMP-9、Hcy表达的影响

胡 萍，牛建平，宋叶华，彭瑞强，徐 娜，张奕文，陈新侨

脉血康软胶囊对缺血性脑卒中病人MMP-9、Hcy表达的影响

胡 萍，牛建平，宋叶华，彭瑞强，徐 娜，张奕文，陈新侨

目的 观察脉血康软胶囊对缺血性脑卒中病人血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、同型半胱氨酸(Hcy)的影响。方法 入组病人67例，随机分为试验组(35例)和对照组(32例)，另选30名健康人作为健康组，观察所有研究对象第1天、第7天和第14天的MMP-9、Hcy及美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分变化。结果 试验组和对照组组内第7天、第14天和第1天MMP-9水平比较，差异有统计学意义(P<0.05)；试验组和对照组组间第7天MMP-9水平比较，差异有统计学意义(P=0.018)。试验组与对照组第1天Hcy水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)，但均高于健康组；两组与健康组比较，差异有统计学意义(P<0.05)，其水平均在正常范围内，两周内呈逐渐下降的趋势；试验组和对照组组间第7天Hcy水平比较，差异有统计学意义(P=0.012)；与健康组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。血清Hcy水平与NIHSS评分进行相关性检验，r=0.507，P=0.002；r=0.206，P=0.025。结论 MMP-9、Hcy在缺血性脑卒中病人明显升高，呈动态变化，其中Hcy水平增高和单核细胞表面TLR4高表达与缺血性脑卒中严重程度密切相关，MMP-9水平的变化与脑卒中的评分表现出一致性，但差异无统计学意义。脉血康软胶囊可降低MMP-9、Hcy水平，改善缺血性脑卒中病人的临床症状。

缺血性脑卒中；脉血康软胶囊；美国国立卫生研究院卒中量表；基质金属蛋白酶-9；同型半胱氨酸

脑卒中是临床上常见的脑血管病，在统计学上列为死亡的第三大原因[1]。脑卒中病人约80%是缺血性脑卒中。至今没有发现一类生物标志物具有足够的灵敏度和特异性应用缺血性脑卒中的临床诊断或在临床运用。大量研究证明基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)、同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)是缺血性脑卒中发病和死亡的危险因素，且这些指标日益引起关注。国内外研究对其研究多以基础研究为主，临床应用及报道较少。

脉血康软胶囊主要活性成分为水蛭素。水蛭素是高度特异性凝血酶抑制剂，能阻止纤维蛋白原活化和纤维蛋白凝固，抑制血小板结合血管内皮胶原蛋白，抑制血小板黏附和聚集[2]。本研究观察急性缺血性脑卒中病人第1天、第7天和第14天MMP-9、Hcy及美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分变化，在常规治疗基础上加用脉血康软胶囊治疗，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2014年6月—2015年12月厦门市第二医院神经内科住院病人67例，所有病例均符合全国第四届脑血管病学术会议标准(1995)和中国缺血性卒中亚型大动脉粥样硬化性脑梗死诊断标准。随机分为两组，试验组35例，男22例，女13例，年龄66.79岁±6.64岁；对照组32例，男19例，女13例，年龄64.97岁±4.82岁。选取同期在我科门诊健康体检者30名作为健康组，男17名，女13名，年龄30.84岁±4.57岁。

1.2 纳入和排除标准 纳入标准：年龄41岁～75岁；首发卒中；发病到入院≤3 d；NIHSS评分1分～15分。排除标准：溶栓病人；合并有明显肝、肾或心功能衰竭病人发病前后有炎性感染性疾病病人；风湿免疫系统疾病及肿瘤；近3个月内患有血管闭塞性疾病；病人同意入组但不签署知情同意书。

1.3 治疗方法 所有病人均按照《中国脑血管病防治指南》进行基础治疗，具体疗程14 d。对照组：丹参酮(批号：国药准字H31022558，上海第一生化药业有限公司)30 mg，静脉输注，每日1次；依拉达奉注射液(批号：国药准字H20080056，国药集团国瑞药业有限公司)30 mg，静脉输注，每日2次。试验组：在对照组治疗基础上加用脉血康软胶囊(批号：国药准字Z20033197，贵州信邦制药股份有限公司)，每次3粒，每日3次，餐后口服。

1.4 观察指标 观察两组病人第1天、第7天和第14天MMP-9、Hcy及NIHSS评分变化及健康组上述指标的基础值。ELISA检测MMP-9(Catalog Number：SMP900，RD)，严格按照实际说明操作；Hcy由检验科

专业技师完成。

1.5 不良反应 两组病人在治疗过程中有无出血、过敏、休克等不良反应。

2 结 果

2.1 各组一般资料比较 各组年龄、性别、NIHSS评分、血压、血脂等一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)。详见表1。

表1 各组一般资料比较

2.2 3组MMP-9水平比较 试验组和对照组MMP-9水平两周内呈逐渐下降的趋势，两组组内第7天、第14天和第1天MMP-9水平比较，差异有统计学意义(P<0.05)。两组组间比较，试验组第1天与对照组比较，差异无统计学意义(t=0.603，P=0.551)；两组第1天分别与健康组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。试验组第7天MMP-9水平低于对照组，与对照组比较差异有统计学意义(t=2.500，P=0.018)；试验组第14天MMP-9水平低于对照组，与对照组比较差异无统计学意义(t=1.223，P=0.230)；但两组第14天MMP-9水平与健康组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。详见表2。

组别n第1天第7天第14天试验组3510.04±3.652)7.45±1.481)3)5.06±1.371)对照组3210.58±3.952)8.95±3.301)5.40±1.461)健康组304.71±1.54 与同组第1天比较,1)P<0.05;与健康组比较,2)P<0.05;与对照组第7天比较,3)P<0.05。

2.3 3组血清Hcy水平比较 试验组和对照组血清Hcy水平基本在正常范围内，且在两周内呈逐渐下降的趋势，第1天、第7天Hcy水平均高于健康组，分别与健康组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。试验组和对照组组内第7天、第14天和第1天Hcy水平比较，差异有统计学意义(P<0.05)。试验组第14天Hcy水平基本接近健康组，与健康组比较，差异无统计学意义(P>0.05)；对照组第14天Hcy水平高于健康组，与健康组比较差异无统计学意义(P>0.05)。试验组与对照组第1天组间比较，差异无统计学意义(t=0.290，P=0.774)，第7天组间比较，差异有统计学意义(t=2.660，P=0.012)，第14天组间比较，差异无统计学意义(t=1.670，P=0.105)。详见表3。

表3 3组血清Hcy水平比较(±s) mg/L

2.4 试验组和对照组NHISS评分比较 试验组和对照组NIHSS评分2周内均呈下降趋势，两组组内第7天、第14天和第1天NIHSS评分比较，差异有统计学意义(P<0.05)；两组组间NIHSS评分第1天比较，差异无统计学意义(t=1.028，P=0.312)；第7天比较，差异无统计学意义(t=0.924，P=0.362)；第14天比较，差异有统计学意义(t=2.380，P=0.024)。详见表4。

表4 试验组和对照组 NHISS评分比较(±s) 分

2.5 相关性分析 试验组和对照组MMP-9水平与缺血性脑卒中NIHSS评分相关性检验，分别为r=0.034，P=0.862；r=0.140，P=0.446，提示MMP-9水平与缺血性脑卒中严重程度无显著相关性；试验组和对照组血清Hcy水平与缺血性脑卒中NIHSS评分相关性检验，分别是(r=0.507，P=0.002；r=0.206，P=0.025)，提示Hcy水平增高与缺血性脑卒中严重程度有显著相关性。

3 讨 论

据2010年统计，全球脑卒中的发病人数为3 300万人，其中死亡人数为1 690万，大约三分之一是致命的，占全世界死亡总数的11%，也是全球死亡和残疾的主要原因之一[3-4]。

MMP-9又叫做92kDa酶，是Destin Beach在基质金属蛋白酶学术会议上提出并命名的[5]。MMP-9是调节细胞外基质(extracellular ma-trix，ECM)动态平衡的最主要酶系，发挥降解和再塑造血管壁分泌细胞外基质的作用。MMP-9失衡导致血管壁结构变化[6-8]，该变化超过血管代偿能力引起斑块不稳定，进而破裂形成附壁血栓，最终导致缺血性脑卒中的发生。本研究试验组和对照组第1天MMP-9水平明显高于健康组，其产生机制如上所述，也与Zhao等[9]研究脑卒中病人血清基质金属蛋白酶大量表达的结果一致。进一步证据表明，MMP-9局部过量表达是通过增加细胞因子的刺激和组织因子介导的凝血级联反应实现的[10]。基础试验及临床观察均提示一些药物不仅可降低不同细胞MMP-9的表达及活性，且影响MMP-9释放[11-13]。本研究结果发现，通过脉血康软胶囊治疗脑卒中干预的试验组MMP-9水平较对照组下降明显，试验组第7天与对照组比较，差异有统计学意义(P=0.018)；两组第7天、第14天MMP-9水平呈下降趋势，且第14天MMP-9水平与健康组比较，差异无统计学意义。脉血康可显著降低MMP-9，机制可能如上述所述，但具体途径尚待进一步研究。

大量研究实验及流行病学调查显示，Hcy升高是心血管疾病的一个重要独立的危险因素，且进一步证明Hcy可扰乱铜(Cu)稳态，降低Cu利用率，严重引起线粒体Cu-依赖酶(CCO)活性下降，使参与线粒体呼吸链反应电子传递无法进行，进而伴随线粒体膜电位Hcy处理细胞的崩溃，导致内皮细胞的裂解，使细胞内Hcy大量释放到血液中，引起Hcy水平升高[14]。一项荟萃分析研究报告说明空腹Hcy每升高3 μmol/L，缺血性心脏疾病发病率增加11%和中风发病率增加19%，同型半光氨酸血症增加中风风险5倍，且Hcy每增加2.5 μmol/L中风风险可增加约20%[15-17]。本研究试验组和对照组第1天血清Hcy含量显著高于健康组，并且随着神经功能缺损程度减少，血清Hcy水平明显下降，且血清Hcy与神经功能缺损有相关性(r=0.347，P=0.004)，提示Hcy水平升高与脑卒中病情发生及进展密切相关，进一步提示Hcy可作为脑卒中的预警因子，其水平升高可能是导致脑卒中病人血液黏度升高的主要原因。

本研究结果发现，试验组与对照组第1天Hcy水平虽然均在正常范围内，但是通过药物干预后，两组Hcy水平在两周内仍呈逐渐下降趋势，且相关性检验显示Hcy水平增高与NIHSS评分显著相关，提示目前临床使用的正常值范围可能不适于脑卒中的风险评估，选择更低的目标值可能有利于卒中的预防，同时Hcy水平高低与卒中的严重程度呈正相关，提示该指标可能预测进展性卒中，其有待进一步扩大研究样本量证实。试验组和对照组第14天Hcy水平与健康组比较，差异无统计学意义(P>0.05)；试验组与对照组第7天组间Hcy水平比较，差异有统计学意义(P<0.05)；试验组与对照组第14天组间Hcy水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)，提示脉血康胶囊可能更有效下调血清Hcy水平，从而改善脑卒中的临床症状。

综上所述，根据本研究结果认为MMP-9、Hcy水平增高与缺血性脑卒中发生密切相关，提示MMP-9、Hcy联合监测可比单一指标监测更有效预测脑卒中，Hcy水平高表达与缺血性脑卒中严重程度呈正相关，提示其更有效地预测病情的进展，反映病情的严重程度，预测和判断预后。MMP-9水平变化与脑卒中的评分虽表现出一致性，但无统计学意义，提示其可能参与缺血性脑卒中发生的慢性病理生理过程，与脑卒中发生有一定的关联，但不是脑卒中急性期病理生理变化的主要炎症介质。通过药物干预后两组NHISS评分在治疗周期内逐渐下降，表明降低Hcy、MMP-9水平可改善缺血性脑卒中病人临床症状。本研究试验组NIHSS评分下降程度明显高于对照组，说明试验组比对照组能更显著降低Hcy、MMP-9水平，提示中药脉血康胶囊可通过降低上述指标从而改善缺血性脑卒中病人临床症状。

[1] Nabavi SF，Sureda A，Habtemariam S，et al.Ginsenoside Rd and ischemic stroke；a short review of literatures[J].J Ginseng Res，2015，39(4)：299-303.

[2] Nabavi SF，Turner A，Dean O，et al.Post-stroke depression therapy：where are we now?[J].Curr Neurovasc Res，2014，11(3)：279-289.

[3] Feigin VL，Forouzanfar MH，Krishnamurthi R，et al.Global and regional burden of stroke during 1990-2010：findings from the Global Burden of Disease Study 2010[J].Lancet，2014，383(9913)：245-254.

[4] Shim R，Wong CH.Ischemia，immunosuppression and infection-tackling the predicaments of post-stroke complications[J].Int J Mol Sci，2016，17(1)：551-556.

[5] Nagase H，Barrett AJ，Woessner JJ.Nomenclature and glossary of the matrix metalloproteinases[J].Matrix，1992(Suppl 1)：421-424.

[6] Raffetto JD，Khalil RA.Matrix metalloproteinases and their inhibitors in vascular remodeling and vascular disease[J].Biochem Pharmacol，2008，75(2)：346-359.

[7] Glagov S，Weisenberg E，Zarins CK，et al.Compensatory enlargement of human atherosclerotic coronary arteries[J].N Engl J Med，1987，316(22)：1371-1375.

[8] Mcpherson DD，Sirna SJ，Hiratzka LF，et al.Coronary arterial remodeling studied by high-frequency epicardial echocardiography：an early compensatory mechanism in patients with obstructive coronary atherosclerosis[J].J Am Coll Cardiol，1991，17(1)：79-86.

[9] Zhao BQ，Wang S，Kim HY，et al.Role of matrix metalloproteinases in delayed cortical responses after stroke[J].Nat Med，2006，12(4)：441-445.

[10] Morishige K，Shimokawa H，Matsumoto Y，et al.Overexpression of matrix metalloproteinase-9 promotes intravascular thrombus formation in porcine coronary arteries in vivo[J].Cardiovasc Res，2003，57(2)：572-585.

[11] Copin JC，Merlani P，Sugawara T，et al.Delayed matrix metalloproteinase inhibition reduces intracerebral hemorrhage after embolic stroke in rats[J].Exp Neurol，2008，213(1)：196-201.

[12] Izidoro-Toledo TC，Guimaraes DA，Belo VA，et al.Effects of statins on matrix metalloproteinases and their endogenous inhibitors in human endothelial cells[J].Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol，2011，383(6)：547-554.

[13] Lakhan S E，Bagchi S，Hofer M.Statins and clinical outcome of acute ischemic stroke：a systematic review[J].Int Arch Med，2010，3(1)：22.

[14] Luo X，Xiao Y，Song F，et al.Increased plasma S-adenosyl-homocysteine levels induce the proliferation and migration of VSMCs through an oxidative stress-ERK1/2 pathway in apoE(-/-) mice[J].Cardiovasc Res，2012，95(2)：241-250.

[15] Smulders YM，Blom HJ.The homocysteine controversy[J].J Inherit Metab Dis，2011，34(1)：93-99.

[16] Kalani A，Kamat PK，Tyagi SC，et al.Synergy of homocysteine，microRNA，and epigenetics：a novel therapeutic approach for stroke[J].Mol Neurobiol，2013，48(1)：157-168.

[17] He Y，Li Y，Chen Y，et al.Homocysteine level and risk of different stroke types：a meta-analysis of prospective observational studies[J].Nutr Metab Cardiovasc Dis，2014，24(11)：1158-1165.

(本文编辑薛妮)

厦门市科技局立项课题(No.3502Z20139013)

福建省厦门市第二医院(福建厦门 361021)

牛建平，E-mail：549872685@qq.com

R743 R289.5

B

10.3969/j.issn.1672-1349.2017.08.030

1672-1349(2017)08-0994-04

2016-10-12)

引用信息：胡萍，牛建平，宋叶华，等.脉血康软胶囊对缺血性脑卒中病人MMP-9、Hcy表达的影响[J].中西医结合心脑血管病杂志，2017，15(8)：994-997.