李长生 , 宋百军 , 窦凤鸣 , 何玉华
(吉林农业科技学院动物科技学院 , 吉林吉林132109)
东北地区圈养狍脱毛症的病因分析
李长生 , 宋百军 , 窦凤鸣 , 何玉华
(吉林农业科技学院动物科技学院 , 吉林吉林132109)
为探索我国东北地区人工养狍脱毛症的发病原因,对发病地区养狍场出现脱毛症进行流行病学调查,对发病场(户)周边土壤、饲草和狍体内部分矿物质元素和一些生化指标进行检测与分析,结果表明:经实验室病原体检验,病狍患处未分离出寄生虫和皮肤真菌;调查地区属于矿物质元素Se、Cu、Zn和S含量水平较低自然环境,Mg、Mn元素含量水平属正常范围。本病与矿物质元素代谢紊乱相关,其土壤、饲料和狍体内的Se、Cu、Zn、S元素含量水平低是导致狍发生脱毛症主要原因。
东北地区 ; 圈养狍 ; 脱毛症 ; 矿物质元素 ; 病因分析
狍(Capreoluscapreolus)是一种经过驯化人工饲养的鹿科动物,其产品有广泛市场前景,同时也具有观赏价值,但狍人工驯化时间短,仍具有很强的野性,易在外界因素刺激发生应激反应,甚至死亡[1]。近年来,我国养狍发展很快,已初步形成新兴产业[2]。随着养狍产业发展,在我国东北地区一些养狍场陆续出现狍脱毛症,发病范围及数量逐步扩大,一般发病率为15%~33%,2012年辽源某狍场发病率达65%,严重威胁到狍种群的健康和数量的发展。人工圈养条件狍脱毛症在每年10月末开始出现,第二年春季3~4月份最为明显,严重者出现个体死亡,在青绿饲料丰富季节可自愈一些个体。为查找狍脱毛症发病原因,进行以下的研究探索。
1.1 材料
1.1.1 试验动物 吉林省辽源市某狍场患狍9只,敦化市某狍场患狍5只,内蒙古呼伦贝尔盟某养狍场患狍7只,辽宁省辽阳市某养狍户患狍3只。
1.1.2 试验采样 在确定上述用于试验动物同时,获取各自实验基地采集患狍的血样、毛样和饲养场及其周边区域的土样、饲草。
1.1.3 主要仪器设备 TAS-986原子吸收分光光度计、TU-1901紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司); RF-5301荧光分光光度计(日本岛津); SCR20BC低温高速离心机(日本日立); Sartorius精密电子分析天平(德国)。
1.1.4 主要药品与试剂 2-3-二氨基萘)(上海恒远生物科技有限公司);环己烷、TP试剂盒、ALB试剂盒、AKP试剂盒、T-SOD试剂盒、Cu-Zn-SOD试剂盒、GSH-Px试剂盒(上海鼓臣生物技术有限公司)。
1.2 方法
1.2.1 患狍皮表寄生虫病原体检查 用鹿眠宝按0.02~0.025 mL/kg体重标准用吹管针注射麻醉患狍采样,用蒋忠学等皮屑溶解法进行检查[3-4]。
1.2.2 患狍皮肤真菌的检查 用鹿眠宝按0.02~0.025 mL/kg体重标准用吹管针注射麻醉患狍,用手术刀刮取皮肤的患部与健康交界处的鳞屑,用小包装袋密封后标号,放置样品采集瓶,到实验室统一检验。将采集每个样本包装于载玻片上,在载玻片上加10% NaOH 1滴,之后用盖玻片覆盖,用低倍和高倍镜下观察,重复3次[5]。
1.2.3 样品的采集与处理 (1)土壤的采集处理:按刘彩琴介绍的方法进行处理[6];(2)饲料、牧草的采集处理:采集养狍场日常食用的玉米、豆粕、秸秆及豆荚各3份;牧草采集用人工模拟采样法,采集后挑净其中物,再用自来水、去离子水各冲洗3次,置于烘箱70 ℃干燥,粉碎备用[7-9];(3)血样、毛样的采集处理:早晨空腹按0.02~0.025 mL/kg体重,用鹿眠宝和吹管针注射麻醉狍,颈静脉采血,经3 500 r/min 离心10 min,分离血清,-20 ℃保存备用[7-8];取颈侧毛样10 g,去除毛杂物,用中性洗洁剂浸泡10 min,再用蒸馏水、去离子水各冲洗3次,将洁净的毛样置滤纸筒中,60 ℃~65 ℃下烘干备用。
1.2.4 样品S的测定方法 (1)土壤有效S的测定:采用磷酸盐-醋酸浸提-硫酸钡比浊法[9];(2)牧草、饲料、血清、被毛中S的测定:采用许贵善等比浊法[8-11]。
1.2.5 血清主要生化指标测定方法 TP含量测定-双缩脲法, ALB含量测定-溴甲酚绿比色法, T-SOD活性测定-黄嘌呤氧化酶法, Cu-Zn-SOD活性测定-嘌呤氧化酶法, GSH-Px活性测定-DTNB显色法。血清生化指标测定严格按照试剂盒说明书操作进行[12-6]。
1.2.6 样品中Mg、Cu、Zn、Mn含量的测定 原子吸收分光光度法[13-16]。
1.2.7 样品中Se的测定 按照GB 5009.93—2010进行[15-16]。
1.2.8 数据处理与统计分析 数据用SPSS17.0单因素方差分析,差异显著时用LSD法多重比较,结果用LSD表示。
2.1 寄生虫和真菌病原体检查结果 狍患处寄生虫病原体的检查未见寄生虫虫体及虫卵;对皮肤真菌检查未见有无分枝的菌丝和真菌孢子。
2.2 土壤、饲草料、血清和被毛中硫元素含量 土壤、血清、被毛和饲草料中硫元素的含量测定结果见表1,参照“长白山野狍驯化与饲养配套技术研究”项目组[17],健康狍血清中S含量水平为1.59~1.62 mmol/L,牧草、玉米、豆荚、苜蓿及秸秆中S含量均显著低于上述参考值。
表1 土壤、血清、被毛和饲草料中硫元素含量(DM 基础)
2.3 土壤、饲草料、血清和被毛中Mg、Cu、Zn、Mn、Se含量 土壤、饲草料、血清和被毛中硒、铜、锌、锰、镁元素含量结果见表2。参照“长白山野狍驯化与饲养配套技术研究”[17],健康狍血清中Mg 为0.91~0.93 mmol/L,Mn为 0.14~0.17 mmol/L,Zn为 50.14~53.84 μmol/L,Cu为10.98~11.09 μmol/L,Se为1.03~1.12 μmol/L。采样地区土壤、牧草、玉米、苜蓿、豆荚及血清和被毛中Mg含量属于正常范围,Zn含量属于正常范围,Cu含量也略低状态、 Se处于缺乏水平。
表2 土壤、饲草料、血清和被毛中硒、铜、锌、锰、镁元素元素含量(DM 基础)
2.4 血清中某些生化指标测定结果 血清中某些生化指标测定结果见表3。患狍体内 GSH-Px 活性处于临界值,血清TP和ALB均处于临界值下, T-SOD、Cu、Zn、SOD 含量均低于参考值。
表3 脱毛狍血清中某些生化指标测定结果
依据土壤有效硫含量小于12 μg/g视为缺S,采样土壤有效S含量为11.26 μg/g,属于缺S土壤。健康狍血清S含量为1.59~1.62 mmol/L,患狍血清硫含量均显著低于参考值。
参照“长白山野狍驯化与饲养配套技术研究”[17],采样地区土壤、牧草、玉米、苜蓿、豆荚及血清和被毛中Mg含量属于正常范围,Zn含量属于正常范围,Cu含量也略低状态、Se含量处于缺乏状态。
患狍血清TP和ALB均处于临界值下状态与患狍日粮蛋白质量有关,狍在圈养条件的饲料主要为秸秆或青贮,精料为玉米和少量豆粕,饲料品种单一。患狍体内 T-SOD、Cu、Zn-SOD 含量均低于参考值,间接反应患狍缺乏Cu、Zn。Se构成GSH-Px活性中心,GSH-Px 的活性与血硒水平呈正相关,患狍体内 GSH-Px 活性处于临界值,表明患狍的抗氧化能力较健康狍低。
综上,我国东北部分地区土壤和饲草处于Se、Cu、S、Zn缺乏的自然环境,患狍血清中Se、Cu、S、Zn低于正常值,Mg、Mn正常,其中血清中Se、Cu含量低于正常值;被毛Se、Cu处于临界值,Mg、Mn在正常范围。患狍 TP、 ALB、 GSH-Px 的含量均在参考值的下限,而 T-SOD、 Cu、Zn-SOD 活性均低于参考值。试验结果初步表明,土壤、饲草料、患狍体内矿物质元素Se、Cu、S、Zn缺乏是东北部分地区人工养狍发生脱毛症的主要原因。
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Etiological Analysis Of Rod Deer Alopecia In Northeast Region Of China
LI Chang-sheng , SONG Bai-jun , DOU Feng-ming, HE Yu-hua
(College of animal science and technology, Jilin Agriculture Science And Technology College, Jilin 132109,China)
In order to find the main reason of roe deer alopecia in northeast region of china, the epidemiology of roe deer alopecia was investigated. Also, the level of partial mineral elements in soil, forage grass and feed (from the epidemic area of the disease) and biochemical indexes(from roe deer in northeast region of china) were analyzed.The results showed that: the mineral elements including Se,Cu,Zn,and S were relatively low in the environment where the disease were distributed in. However, the Mg and Mn were in a normal level. Thus, we conclude that the occurrence of roe deer alopecia has a high relevance to metabolic disorder of mineral elements and the main reason might be the lack of Se ,Cu,Zn and S.
Roe deer; alopecia; mineral elements; etiology analysis
2016-09-23
吉林省教育厅十二·五重点科研项目[吉教科合字(2012)第307号];吉林农业科技学院种子基金项目[吉农院合字(2014)第Z10号]
李长生(1964-),男,副教授,硕士,研究方向为特种经济动物养殖,E-mail csli-64@163.com
S864.7
A
0529-6005(2017)03-0018-03