结核病患者痰液及粪便同时培养出分枝杆菌1例结果分析

王强

吉林省长春市传染病医院，吉林长春 132000

肺结核（pulmonarytuberculosisPTB）是由结核分枝杆菌引发的肺部感染性疾病，是严重威胁人类健康的疾病[1]。结核分枝杆菌的传染源主要是排菌的肺结核患者，通过呼吸道传播。肠结核在消化系统中最为常见，多继发于活动性肺结核。1990年以来，肺结核患病率日益增长。通过全球权威医学组织统计，每年全球大约290万人因肺结核死亡[2]。值得注意的是，非洲和我国是肺结核高发国家。然而当前多重耐药情况严重，结核病的防治已经成为了当前临床研究的重点。痰液及粪便培养成为了肺结核临床诊断与鉴定的主要检查方法，其培养结构成为了确诊的主要根据。为了研究分析当前肺结核分歧杆菌耐药情况，探究分析耐药性发展情况，为肺结核临床防治提供真实根据。2016年2月，该院收治的1例肺结核患者，做痰液培养、粪便培养同时培养出分枝杆菌，因在临床中较少见，现报道如下。

1 临床资料

患者男28岁，发现有乏力、消瘦、盗汗、低热、咳嗽、胸痛等症状半年，入院后经X线胸片，痰培养、便培养及血PPD-IgG确认为肺结核，同时伴有咳黄痰，肺部可闻及湿性啰音。

2 试验程序

2.1 试验材料

样品作厚膜涂片染色镜检和培养检验。操作方法按中国防痨协会编审的 《结核病诊断细菌学检验规程》[3]要求进行，染色液依照《规程》自行配制，酸性罗氏培养基由省卫生防疫站结核病防治所提供。改良罗氏酸性Ⅱ型培养基，对硝基苯甲酸（PNB)培养基，噻吩-2-羟酸肼 （THC）培养基及药敏培养基异烟肼（INH）、链霉素（SM）、利福平（RFP）、乙胺丁醇（EMB）、氧氟沙星（OFX）培养基，均购于贝索生物技术有限公司。结核分枝杆菌H3tRv药敏感株由国家参比试验室提供。

2.2 药物浓度

培养基含药物浓度按防痨协会结核病诊断规程比例法[4]。 链霉素（SM）4 μg/mL、异烟肼（INH）0.2 μg/mL、利福平（RFP）40 μg/mL、乙胺丁醇（EMB）2 μg/mL、氧氟沙星（OFX）2 μg/mL。

2.3 操作方法

①取适量的痰液和粪便加入1～2倍的HaOH4%，震荡使标本充分液化，在20 min内操作完成。②取上述处理标本0.1～0.3 mL以无菌操作接种于酸性罗氏培养基中，同时接种2支管，37℃培养，接种后3～7 d观察结果，以后每周观察菌落生长情况1次。③有菌落生长者，经抗酸染色确认。

3 结果

从已确认的酸性培养基中刮取菌苔研磨制成10-2～10-4mg/mL菌悬液（比例法），用22SWG标准接种环，分别沾取1满杯（即0.01 mL）10-2mg/mL和10-4mg/mL的菌液，用划线法均匀接种至对照及含药物培养基表面，菌型鉴定分别用10-2的菌液接种PNB和THC培养基中，培养4周后报告结果。

4 讨论

临床上，肺结核是一种常见的传染性疾病，切断传染源对于防治肺结核大范围传染尤为必要。临床早期诊断不仅有助于肺结核患者的病情康复，而且还能够有效控制肺结核疾病的扩散。痰液和粪便培养成为了临床诊断的主要方法，也是该疾病确诊的重要标准。肺结核分歧杆菌生长速度缓慢，痰液和粪便培养时间一般较长，同时临床培养环境、操作程序都会影响整个培养结果。采集样品是痰液和粪便培养的第一环节，也是最关键的缓解。相关研究指出，痰液和粪便培养的采集量不得≤10 mL。肺结核分歧杆菌繁殖较慢，应严格按照《规程》要求连续培养8周以上。样品质量在很大程度上影响了阳性检出率。基于此，临床操作人员应将相关事宜详细交代给痰液和粪便待检病人，选取合格的样品。

临床上，结核病痰液及粪便同时培养出分枝杆菌实验过程中也会出现漏检的情况，追究其原因主要有主客观方面，客观方面患者曾服用抗生素及样品质量直接影响了分歧杆菌的生长，主观方面则还有检查时间和临床操作技术等。杨细兰等[5]研究指出，在过程中，随机抽取25张阴性片对其进行扩大视野再检，发现2片属于阳性。基于此，临床上应对每一份样品进行培养和涂片，从而提高肺结核分歧杆菌的检出率。如果因条件不允许只能够进行涂片检查时，应连续多次检查和扩大镜检视野来对其结果进行验证。

即使肺结核分歧杆菌培养生长比较慢，然而培养基、培养方法日益成熟，并大大提高了阳性检出率，培养基的质量直接影响了培养结果的分析数据。相关研究指出临床上应采用不同种类的培养基来培养肺结核分歧杆菌，研究结果表明培养基所需时间同阳性检出率之间的差异较大，其中液体变色培养基最为灵敏、便捷。同时，离心时间、离心力也是影响肺结核分歧杆菌培养质量的重要影响因素。

经4周培养后，根据不同部位（痰和便）分离出的2株结核分枝杆菌均对链霉素（SM）4μg/mL、异烟肼（INH）0.2 μg/mL、利福平（RFP）产生耐药，对乙胺丁醇（EmB）2 μg/mL、氧氟沙星（OFX）敏感，其药物结果相同，说明为同一菌株所感染，此病例药物敏感试验表明，在不同部位（痰和便）所留取的标本，药敏试验结果相同，因此，对于该患者诊断为肺结核及肠结核尤为重要，在治疗上可以同时用结核药联合治疗，对早期有效地选用抗结核药物提供帮助。

该文研究结果中，受检患者均存在不同程度的耐药性，如果依然采用初始和复治方案统一治疗，则会造成一些患者治疗结果不理想，产生新的耐药性，甚至造成广泛耐药肺结核。另外，现阶段临床上还未研究出治疗广泛耐药肺结核患者的治疗方案，临床效果差，传染性大，严重威胁了肺结核疾病控制。

综上所述，条件优越的地区应组织开展分歧杆菌培养实验，同时按照药敏结果制定针对性有效的方案，并且高度重视肺结核归档管理，对地区肺结核患者进行去全面监控，降低耐药发生率，提高临床治愈率，有效控制肺结核，具有重大的临床价值。

[1]孙开丽.痰结核分枝杆菌培养结果及影响因素分析[J].世界最新医学信息文摘，2017(36)：140.

[2]张德和，余旭良，祝进，等.复治涂阳肺结核患者分枝杆菌属培养及药敏结果分析 [J].中华医院感染学杂志，2012，22（20）：4666-4667.

[3]王泉，李君莲，许苗，等.新疆地区结核病患者T-SPOT.TB检测与结核分枝杆菌培养结果对比分析[C].中国防痨杂志创刊80周年纪念暨学术会议，2014.

[4]张德和，余旭良，郝晓刚，等.痰涂片阳性肺结核患者分枝杆菌培养及药敏结果743例分析 [J].浙江医学，2013（5）：376-378.

[5]杨细兰，刘运堂，杨春燕，等.结核分枝杆菌检验及结果分析[J].今日健康，2015（11)：413.