不同能量水平限饲对肉种鸡种蛋氨基酸及脂肪酸含量影响

李仲玉，李佳凝，刘洋，田博，邢泽龙，徐良梅

（东北农业大学动物科学技术学院，哈尔滨 150030）

不同能量水平限饲对肉种鸡种蛋氨基酸及脂肪酸含量影响

李仲玉，李佳凝，刘洋，田博，邢泽龙，徐良梅*

（东北农业大学动物科学技术学院，哈尔滨 150030）

文章探讨不同能量水平日粮对肉种鸡种蛋氨基酸及脂肪酸含量影响。选用27周龄体重相近爱拔益加（AA）肉种鸡240羽，随机分为4组，每组设6个重复，每个重复10羽，产蛋率达5%时开始试验，对照组饲喂基础日粮，试验组饲粮能量水平分别为对照组80%、70%、50%，各组每日投料量及饲粮中粗蛋白质、氨基酸等其他营养水平均相同，40周龄结束试验，测定种蛋中氨基酸及脂肪酸含量。结果表明，①与对照组相比，35周龄时50%限饲组蛋黄中必需氨基酸含量显著升高（P＜0.05），而80%、70%限饲组有上升趋势，但差异不显著（P＞0.05），其中70%、50%限饲组蛋黄中苏氨酸、苯丙氨酸含量显著升高（P＜0.05），各限饲组蛋黄中总游离氨基酸有升高趋势，但差异不显著（P＞0.05）；各限饲组对蛋清中必需氨基酸、总游离氨基酸含量均无显著影响（P＞0.05），但70%、50%限饲组蛋氨酸含量显著升高（P＜0.05）。②与对照组相比，35周龄时50%限饲组蛋黄中必需脂肪酸、不饱和脂肪酸含量显著升高（P＜0.05）；40周龄肉种鸡70%、50%能量限饲组必需脂肪酸、饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸均显著下降（P＜0.05）。综上所述，35周龄时，肉种鸡能量限饲可提高种蛋中氨基酸及脂肪酸含量，40周龄时不宜过度能量限饲。

肉种鸡；能量限饲；氨基酸；脂肪酸

畜禽生长发育需从外界摄取营养供应机体新陈代谢，自由采食可满足其能量需求，但易造成机体脂肪沉积及各系统发育不协调等问题，适宜能量、蛋白水平饲粮限饲对动物机体生长、繁殖具有促进作用[1-2]。王玮等研究肉仔鸡发现，日粮10%能量限饲对肉仔鸡生长性能、机体内脏器官发育具有促进作用[3]。Teguia等指出，早期限饲可提高肉仔鸡饲料利用率，降低生产成本，提高经济效益[4]。Moraes等研究发现，母体饲粮低能量、低蛋白水平限饲显著降低子代肉鸡体重，高能量水平日粮可引起子代肉鸡机体肥胖症[5]。但目前有关母体限饲对种蛋营养物质影响研究较少，种蛋中营养物质是提供鸡胚生长发育必需成分[6]，其中卵黄中脂类为组织器官生长发育所需代谢库[7-8]。胡景威、Peláez等试验发现，母体采食量限饲可提高胚胎生长发育，影响后代脂肪细胞形态及其脂质沉积[9-10]。牛树鹏等发现，肉种鸡产蛋中期能量限饲显著提高13和17胚龄蛋黄胆固醇含量[11]。姜丹等研究发现，肉种鸡能量限饲显著降低16、18和20胚龄胚胎蛋黄EE和GE含量，降低产蛋后期胚胎蛋黄中脂类物质沉积[12]。

综上可知，改变母体营养水平，可调控种蛋中营养物质积累，影响胚胎生长发育。然而有关母体能量限饲对种蛋中氨基酸及脂肪酸代谢影响尚无报道。本试验旨在对产蛋期肉种鸡作能量限饲处理，研究其对种蛋中必需氨基酸、脂肪酸含量影响，为母体能量限饲对子代生长发育和脂肪代谢影响提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物与饲养管理

选用27周龄体重均匀的爱拔益加（AA）肉种鸡240羽，随机分为4组，每组6个重复，每个重复10羽。对照组饲喂基础日粮，试验组饲粮能量水平分别为对照组80%、70%、50%，试验为期14周。按照我国《鸡饲养标准》[13]（NY/T 33-2004）肉鸡营养需要配制玉米-豆粕型基础饲粮，且各组每日投料量及饲粮中粗蛋白质、氨基酸等其他营养水平均相同，肉种鸡40周龄时结束试验。饲粮组成及营养水平见表1。

1.2 肉种母鸡饲养管理

肉种母鸡在3层金属笼中饲养，每笼1只，每天08:00定量投料，全期自由饮水。鸡舍温度20℃，湿度55%，定期防疫消毒。

1.3 样品采集与指标测定

于肉种鸡人工授精后第35、40周龄末收集种蛋。种蛋避光保存，保存室温度10～12℃，相对湿度65%～70%。

1.3.1 蛋黄和蛋清中氨基酸测定

于试验第35周龄末每个重复随机选10枚鸡蛋，测定蛋黄和蛋清中氨基酸含量。分别取蛋清0.2 g、蛋黄0.5 g，加去离子水10mL，在冰浴中用T10型分散器（IKA）高速匀浆3次（22 000 r·min1，每次10 s，间隔10 s），加入10%磺基水杨酸10 m L，震荡混合，静置10 min，离心机（Anke GL-20B，上海）15 200×g离心10min，定量滤纸过滤，4 mol·L-1LiOH调滤液pH 2.2，去离子水定容至25 mL，经滤膜过滤，全自动氨基酸分析仪（日立L-8900）测定游离氨基酸含量。

1.3.2 蛋黄脂肪酸含量测定

于35、40周龄末取蛋黄（脂肪酸甲酯化法）测定氨基酸含量：称取0.5 g蛋黄于离心管中，加入1.5 m L超纯水震荡，0.5m LC17:0内标溶液（5mg·L-1）、2.5mL甲醇、2.5mL氯仿，漩涡振荡5min；静止2 h后，在4 200 r·min-1下离心5min，取氯仿层1mL于螺口管中，氮吹仪在30℃恒温中吹干，加入2mL甲醇钠溶液，50℃孵育30min；冷却后加入3mL盐酸-甲醇溶液，90℃孵育60min；冷却后加入1mL双蒸水，1.5m L正己烷，振荡1min，静止分层，上层有机相（正己烷相）经无水硫酸钠过滤于进样瓶中，气相色谱分析仪（岛津GC）测定豆蔻酸（C14:0）、银杏酸（C15:0）、棕榈酸（C16:0）、棕榈一烯酸（C16:1）、十七碳一烯酸（C17:1）、硬脂酸（C18:0）、反油酸甲酯（C18:1n9t）、二十二烷酸甲酯（C18:2n6t）、亚油酸（C18:2n6c）、γ-亚麻酸甲酯（C18:3n6）、花生一烯酸（C20:1）、花生酸（C21:0）、花生二烯酸（C20:2）、山嵛酸（C22:0）、二十碳三烯酸甲脂（C20:3n6）、花生四烯酸（C20: 4n6）、木焦油酸（C24:0）、二十二碳六烯酸（C22: 6n3）含量[14]。

表1 饲粮组成及营养水平(风干基础)Tab le 1 Com position and nutrient levelsof diets(Air-d ry basis)

1.4 数据处理

SPSS 19.0对数据作单因素方差分析（one-way ANOVA），结果以“平均值±标准误”表示，各组间平均值采用Duncan作多重比较，以P＜0.05作为差异显著判断标准。

2 结果与分析

2.1 不同能量水平限饲种蛋氨基酸含量

由表2可知，与对照组相比，35周龄肉种鸡50%能量限饲种蛋蛋黄中必需氨基酸含量显著升高（P＜0.05），而80%、70%能量限饲组种蛋蛋黄中必需氨基酸有上升趋势，但差异不显著（P＞0.05）；与对照组相比，80%、70%、50%能量限饲组种蛋蛋黄中总游离氨基酸有上升趋势，但差异不显著（P＞0.05）。与对照组相比，70%、50%能量限饲组种蛋蛋黄中Thr和Phe含量显著提高（P＜0.05）。

由表3可知，与对照组相比，不同能量水平限饲对蛋清中必需氨基酸、总游离氨基酸均无显著含量影响（P＞0.05）；但70%、50%能量限饲组必需氨基酸中Met含量显著提高（P＜0.05）。

表2 肉种鸡不同能量水平限饲种蛋蛋黄氨基酸含量Table 2 Different energy restriction on contentsof am ino acids in yolk of eggs

表3 不同能量水平限饲种蛋蛋清氨基酸含量Tab le3 Differentenergy restriction on contentsof am ino acids in albumen of eggs

2.2 不同能量水平限饲种蛋脂肪酸含量

2.2.1 35周龄能量限饲种蛋蛋黄中脂肪酸含量

由表4可知，35周龄肉种鸡50%能量限饲种蛋蛋黄中必需脂肪酸和不饱和脂肪酸含量显著高于其他各组（P＜0.05）。与对照组相比，80%、70%能量限饲组种蛋蛋黄中必需脂肪酸、不饱和脂肪酸有下降趋势，但差异不显著（P＞0.05）。50%能量限饲种蛋蛋黄中C18:0、C18:1、C18:2n6t、C18: 2n6c、C20:1、C21:0、C22:1、C20:2、C20:3n6、C20:4n6、C24:0、C22:6n3含量显著高于其他组。

表4 35周龄肉种鸡能量限饲种蛋蛋黄脂肪酸含量Table4 Energy restriction on contentsof fatty acids in 35weeksyolk ofeggs

2.2.2 40周龄能量限饲种蛋蛋黄脂肪酸含量

结果见表5。

由表5可知，与对照组相比，40周龄肉种鸡70%、50%能量限饲组中必需脂肪酸、饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸均显著下降（P＜0.05），而80%能量限饲组有下降趋势，但差异不显著（P＞0.05）。

表5 40周龄肉种鸡能量限饲种蛋蛋黄脂肪酸含量Tab le5 Energy restriction on contentsof fatty acids in 40weeksyolk of eggs

3 讨论

3.1 不同能量水平限饲对种蛋氨基酸含量影响

动物自身无法合成必需氨基酸或合成量不足，须由饲粮提供，其含量增加有益于机体生长发育、繁殖。家禽摄入氨基酸不足或产蛋性能提高引起相对不足时，动用分解体组织以保证产蛋需要[15]。有关家禽母体限饲对种蛋氨基酸含量影响尚无定论。本试验结果表明，肉种鸡50%能量限饲蛋黄、蛋清必需氨基酸（苏氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸）含量显著升高，可能由于木桶效应，蛋氨酸影响蛋黄、蛋清氨基酸组成，但对总游离氨基酸含量无显著影响。种蛋苏氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸等氨基酸直接来源于饲料，通过血液运输到卵巢部位，沉积到卵黄中[16]，约占鸡蛋中氨基酸含量15%～20%[17-18]，其余大部分氨基酸均来自体组织分解。王强等研究表明，日粮能值对鸭蛋氨基酸含量影响比较复杂，高能量日粮可提升蛋壳质量，降低鸭蛋氨基酸含量。本试验也发现，与对照组相比，70%、50%能量限饲组种蛋蛋黄中苏氨酸和苯丙氨酸含量显著升高，而蛋清中蛋氨酸含量显著升高。日粮能量直接影响蛋中氨基酸含量，还是较低能量日粮影响机体蛋白质代谢进而影响蛋中氨基酸含量，有待深入研究。前期研究发现，肉种鸡产蛋后期能量限饲对子代生长发育、胚胎期血脂代谢指标具有显著母体营养效应[20]，子代生长过程表现明显补偿性生长[21]，由此推测，氨基酸沉积于蛋黄中，通过母体效应作用于子代机体，促进其生长发育。

3.2 不同能量水平限饲对种蛋脂肪酸含量影响

必需脂肪酸为动物维持机体正常代谢不可缺少而自身又无法合成，须通过食物供给，其含量不足导致动物免疫力下降，生长受阻，繁殖力下降。种蛋中必需脂肪酸直接来源于饲料，日粮中脂肪酸组成影响蛋黄中脂肪酸含量，影响胚胎发育和孵化率[22-23]。家禽蛋中脂肪酸沉积主要靠肝脏脂肪酸合成[24]，因此，家禽营养状况直接影响肝脏脂肪酸合成及蛋中脂肪酸积累。胚胎生长发育时期对脂肪酸吸收与利用完全来自于鸡蛋，母体饲粮营养及胚胎发育胚龄可改变胚胎脂肪酸含量，其中主要被利用脂肪酸包括9-十六碳烯，油酸，亚油酸，亚麻酸，其次为花生四烯酸、二十二碳六烯酸及二十四碳烯酸。胚胎发育过程中，吸收利用率最高的饱和脂肪酸为棕榈酸、十八烷酸[25]。因此，通过母体营养影响蛋中脂肪酸沉积，改善胚胎脂肪酸的吸收与利用成为有效途径。Wang等研究表明，高蛋白饲粮可促进家禽胆固醇、降低脂肪酸合成[26]。高脂肪饲粮抑制脂肪酸合成，胚胎发育期蛋黄内脂肪被吸收利用，在孵化12胚龄以后，蛋黄吸收利用率大幅上升[27]，脂肪酸为脂肪水解的产物，肉种鸡饲喂低能量水平饲粮对产蛋后期子代生长发育和脂类代谢有显著影响，在早期生长过程出现补偿性生长[28]。母体过高强度能量限饲则给子代生长发育带来不利影响[29]。本试验结果表明，在35周龄时，50%能量限饲组必需脂肪酸和不饱和脂肪酸含量显著增加，可能由于能量限饲抑制一些脂酶活性使脂肪合成减少，促进脂肪水解，脂肪酸含量升高。40周龄时，80%、70%、50%能量限饲组中必需脂肪酸、不饱和脂肪酸和饱和脂肪酸均显著降低。40周龄阶段能量需求较高，脂肪酸用以提供机体能量，不适合大幅度能量限饲。

4 结论

a.在肉种鸡35周龄时，能量限饲提高蛋黄必需氨基酸含量。

b.在肉种鸡35周龄时，50%能量限饲组必需脂肪酸和不饱和脂肪酸显著升高；40周龄时各组脂肪酸均有所下降，不适宜大幅度能量限饲。

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Effect of different energy restriction levels on amino acids and fattyacids of broiler breeders during laying period

LIZhongyu,LIJianing,LIU Yang,TIAN Bo,XING Zelong,XU Liangmei
(School of Animal Sciences and Technology, NortheastAgricultural University, Harbin 150030, China)

This experiment studied the effect of different energy restriction levels on amino acids andfatty acids of Arbor Acres (AA) broiler breeders during the initial laying period. 240 AA broiler breeders (27weeks old) with similar body weights were randomly divide into four groups with six replicates per group and10 birds each replicate. The experiment was conducted when laying rate reached 5%. The birds in thecontrol group were fed the basal diet, and those in trial groups were fed the diets with 80%, 70% and 50%energy levels of the basal diet, respectively. During the experimental period, feed intake of each group wasrestricted and set the same for each day. The experiment ended at 40 weeks old of broiler breeders, andwent on for 14 weeks, determination of the amino acids and fatty acid content of eggs. ① The resultsshowed that the contents of essential amino acids in 50% energy restriction group in egg yolk of 35 weekold broiler breeder was significantly higher than that of control group (P＜0.05), the content of essentialamino acids in egg yolk of 80% and 70% energy restriction group was increased, but not significant (P＞0.05), and the content of Thr and Phe in 70%, 50% energy restriction group in egg yolk was significantlyincreased（P＜0.05）. Total free amino acids in egg yolk of each energy restriction groups were increased, butthe difference was not significant (P＞0.05); The content of essential amino acids and total free amino acidsin egg white had no significant difference (P＞0.05), but the contents of the Met in 70%, 50% energyrestriction groups were significantly increased（P＜0.05）. ② The content of essential fatty acids andunsaturated fatty acids in 50% energy restriction group in egg yolk of 35 week old broiler breeder wassignificantly higher than that of control group (P＜0.05); The contents of essential fatty acids, saturated fattyacids and unsaturated fatty acids of 40 weeks old broiler breeder in 70% and 50% energy restriction groupswere significantly decreased (P＜0.05). In summary, energy restriction of broiler breeders could increase thecontents of amino acids and fatty acids in eggs at 35 weeks, but could not be excessive energy restriction at40 weeks.

broiler breeder; energy restriction; amino acids; fatty acid

S816

A

1005-9369（2017）03-0031-09

时间2017-3-21 14:04:00[URL]http://kns.cnki.net/kcms/detail/23.1391.S.20170321.1404.016.htm l

李仲玉,李佳凝,刘洋,等.不同能量水平限饲对肉种鸡种蛋氨基酸及脂肪酸含量影响[J].东北农业大学学报,2017,48(3):31-39.

Li Zhongyu, Li Jianing, Liu Yang, et al. Effect of different energy restriction levels on amino acids and fatty acids of broilerbreeders during laying period[J]. Journal of Northeast Agricultural University, 2017, 48(3): 31-39. (in Chinese with Englishabstract)

2016-12-01

黑龙江省教育厅科学技术研究项目（12531036）；哈尔滨市应用技术研究与开发项目（2016RAXXJ015）

李仲玉（1982-），女，实验师，硕士，研究方向为动物营养与饲料科学。E-mail:potato_li@163.com

*通讯作者：徐良梅，教授，硕士生导师，研究方向为家禽营养与肉质。E-mail:xuliangmei@sina.com