白介素13在慢性鼻窦炎伴鼻息肉组织中的表达

张 萍，柴向斌∗

（1.山西医科大学临床医学系,山西太原030001；2.大同市第五人民医院耳鼻咽喉头颈外科，山西大同037009；3.山西医科大学第一医院耳鼻咽喉科，山西太原030001）

白介素13在慢性鼻窦炎伴鼻息肉组织中的表达

张 萍1，2，柴向斌3∗

（1.山西医科大学临床医学系,山西太原030001；2.大同市第五人民医院耳鼻咽喉头颈外科，山西大同037009；3.山西医科大学第一医院耳鼻咽喉科，山西太原030001）

目的比较白介素13(IL—13)在慢性鼻窦炎不伴鼻息肉(CRSsNP)和慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)患者中的差异性表达。方法选取10例CRSsNP和20例CRSwNP患者作为研究对象。根据鼻窦CT反映的病变范围评估患者病情，采用模拟视觉量表(VAS)评估慢性鼻窦炎轻重程度；术后采用PCR法分析IL-13在CRSsNP和CRSwNP组患者鼻黏膜及息肉中的差异性表达。结果CRSwNP组鼻息肉组织IL-13 mRNA表达明显高于临近黏膜及CRSsNP黏膜组织；CRSsNP组和CRSwNP组鼻窦黏膜组织IL-13 mRNA表达差异无统计学意义。结论IL-13mRNA表达水平在CRSsNP和CRSwNP组患者鼻黏膜或息肉中存在差异；白介素13(IL—13)在慢性鼻窦炎伴鼻息肉的病理过程中发挥有重要的作用。

白介素13(IL-13)；慢性鼻窦炎不伴鼻息肉(CRSsNP)；慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)

慢性鼻窦炎是鼻科常见病，严重影响患者的生活质量和工作效率，在世界范围内受到极大的关注[1]。慢性鼻窦炎临床定义是指鼻窦炎症状持续发作，超过12周。按照慢性鼻窦炎是否伴有鼻息肉，将慢性鼻窦炎分为慢性鼻窦炎伴息肉(CRSwNP)和慢性鼻窦炎不伴鼻息肉(CRSsNP)2个亚组[2]。慢性鼻窦炎发生是一个多因素、多环节的过程，临床表现具有很大差异，由于其发病机理仍不清楚，缺乏有效的治疗手段。本研究从细胞因子水平探讨IL—13在慢性鼻窦炎的病理过程中发挥的作用。

1 资料与方法

1.1一般资料

选取201608-201610期间在大同市第五人民医院耳鼻咽喉科因慢性鼻窦炎就诊的30例患者作为研究对象，包括10例CRSsNP患者，20例CRSwNP患者。入选标准：①患者年龄〉18岁，男女不限；②通过CT或鼻镜检查；③术后病理学检查确认是CRSwNP；④病例符合中华耳鼻咽喉头颈外科杂志编委会发布的慢性鼻窦炎诊断标准和治疗指南。排除上颌窦后鼻孔息肉、霉菌性鼻窦炎、鼻窦肿瘤等病；排除有过鼻窦手术病史患者。所有患者或其家属均签署知情同意书。

1.2研究分组

所有受试者分为CRSsNP组、CRSwNP(黏膜)组和CRSwNP(鼻息肉)组，每组均为10例患者。对CRSsNP患者鼻黏膜和RSwNP患者鼻息肉及其临近的鼻黏膜标本进行相关检测。

1.3仪器和试剂

广州Ribobio公司生产的RNA提取试剂盒和PCR反应试剂盒，上海权阳生物科技有限公司IL-13引物。美国Agilent公司生产的Mx3000PTM仪器实时定量PCR仪。

2 研究方法

2.1视觉模拟量表(VAS)评分

采用VAS对慢性鼻窦炎患者的脓涕、头痛、鼻塞、嗅觉减退等症状的严重程度进行评分。此方法是患者根据自身的症状，对慢性鼻窦炎严重程度进行主观评估[3]。

2.2鼻窦病变评价

根据鼻窦CT对慢性鼻窦炎病变范围及其严重程度进行评估。依据Lund-Mackay评分法[4]，依照鼻窦CT所显示的窦口鼻道复合体、上颌窦、前组筛窦、后组筛窦、额窦和蝶窦的病变程度评分。鼻窦：0分=正常；1分=部分浑浊；2分=全部浑浊；窦口鼻道复合体：0分=无阻塞，2分=阻塞；每一侧0～12分，总分是0～24分。

2.3实时定量RCR方法

按照RNA提取试剂盒的程序进行总RNA的提取，首先研磨鼻黏膜或息肉样品约30～100 mg，后加入500 μL裂解液，充分摇匀，放在冰盒上面；加30～100 μL的匀浆液添加剂，充分摇匀，再放在冰上10 min；然后加入500 μL酸性苯酚，涡旋30～60 min，之后离心5 min(10 000 r/min)。提取的总RNA样品中加入用DEPC处理过的水，通过A260/A280比值来反应提取RNA的纯度。对提取的RNA反转录，进行PCR扩增，通过1.5%琼脂糖凝胶电泳分析PCR反应中混合物。

2.4统计方法

实验数据采用SPSS 11.5统计软件进行分析。结果以均数±标准差(±s)或百分数表示。采用单因素方差分析组间IL-13mRNA表达差异。采用Spearman等级相关性分析评价CRSwNP患者鼻息肉及临近黏膜组织IL-13 mRNA表达的相关性。以P〈0.05为差异有统计学意义。

3 结果

VAS评分：CRSsNP组是16.3±2.5；CRSwNP组是17.5±4.3。CT评分：CRSsNP组10分和CRSwNP组14分。二者均无明显差异。

CRSwNP组鼻息肉组织IL-13 mRNA表达0.605±0.192明显高于临近鼻窦黏膜0.358±0.137及CRSsNP黏膜组织0.360±0.104(P 〈 0.05)；CRSsNP组和CRSwNP组鼻窦黏膜组织IL-13 mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05)。

4 讨论

慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)是上呼吸道黏膜炎症性疾病，是耳鼻咽喉头颈外科常见病之一。其特点是复发性强，发病率高。据文献报道，慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)发病率占总人口的1%～4%，在欧洲成人中的发病率达1%～2%，各年龄组均有发病，男女比例约为2∶1。手术复发率为15%～20%[5]。慢性鼻窦炎伴鼻息肉发病原因的研究较多，学说各有所长。慢性鼻窦炎伴鼻息肉的发生是一个多因素，多环节的过程，主要原因有慢性炎症、黏液纤毛清除受阻、鼻道窦口阻塞、变态反应、嗜酸性粒细胞的作用、细胞因子的作用等。近几年，随着细胞生物学及免疫学的不断发展，细胞因子逐渐成为学者研究的方向，目前已有较多的文献报道，鼻息肉组织中的多种细胞因子如IL-4、IL-17、IL-15、IL-33等表达有显著增高。这说明，各种细胞因子的协同作用，参与慢性鼻窦炎伴鼻息肉的发生发展。细胞因子在慢性鼻窦炎伴鼻息肉的发生发展中起关键作用。通过研究慢性鼻窦炎伴鼻息肉发病机制，为疾病预防及治疗提供新的思路。目前仍存在许多问题值得深入研究，利用分子生物学前沿理论和临床结合，寻找关键细胞因子做为靶点，提供有效的预防和治疗疾病措施，将是学者继续研究的课题。

IL-13主要是T细胞生成，也可由多种其他细胞产生，如Th2/CD4+细胞、Thl/CD4+细胞、嗜酸性细胞、肥大细胞等。同时，IL-13也可调节多种参与变态反应的细胞。IL-13及其受体IL-13R在慢性鼻窦炎伴鼻息肉的病理过程中发挥有重要的作用：①IL-13刺激嗜酸性粒细胞活化、促使嗜酸性细胞黏附分子的表达，抑制嗜酸性粒细胞凋亡；②IL-13可使鼻腔鼻窦上皮细胞产生嗜酸性细胞化学因子Eotaxin[6]；③IL-13促使B细胞产生IgE，增强过敏反应，促进黏蛋白分泌；④IL-13使B细胞产生IgE，增强过敏反应，促进黏蛋白分泌；⑤IL-13通过上调p-catenin蛋白的表达而促使嗜酸性细胞迁移至鼻窦黏膜，促进息肉形成。

本研究发现，IL-13mRNA表达水平在慢性鼻窦炎不伴鼻息肉和慢性鼻窦炎伴鼻息肉组患者鼻黏膜或息肉中存在差异性，在慢性鼻窦炎伴鼻息肉组患者的鼻息肉组织中，IL-13 mRNA表达明显高于慢性鼻窦炎不伴鼻息肉患者的黏膜组织。这说明IL—13在慢性鼻窦炎伴鼻息肉的发生发展过程中发挥有重要的作用。

[1]钟竹青，李曼鸿，王天生，等．鼻窦炎特异性生活质量量表评价慢性鼻窦炎鼻内镜手术后的生活质量及疗效[J].中南大学学报(医学版)，2012，37(6)：625-628．

[2]王芳玲，徐智广，马小允.慢性鼻窦炎治疗研究进展[J].现代中西医结合杂志，2011，20(33)：4321-4322．

[3]赵延明，张媛，张罗.慢性鼻窦炎患者和医生症状视觉模拟量表评分的差异性研究[J].临床耳鼻咽喉头颈外科杂志，2015(23)：2030-2034．

[4]杜纯忠.Lund-Mackay CT系统在慢性鼻-鼻窦炎中的应用分析[J].全科医学临床与教育，2014(3)：310-311．

[5]Bachert C，Gevaert P，Holtappels G，et al.Nasal polyposis：From，cytokines to growth[J].Am J Rhinology，2000，14(5)：279-290．

[6]Wynn T A.IL，-13 effector functions[J]． Annu Rev Immunol，2003，21：425-456．

Expression of Interleukin-13 in Chronic Sinusitis with Nasal Polyps

ZHANG Ping1，2，CHAI Xiang-bin3
（1.Shanxi Medical University，Taiyuan Shanxi，030001；2.Otolaryngology head and Neck Surgery,Fifth People's Hospital of Datong，Datong Shanxi,037009；3.Department of Otorhinolaryngology,First Hospital of Shanxi Medical University，Taiyuan Shanxi，030001）

ObjectiveTo compare the expression of interleukin-13(IL-13)in chronic sinusitis without nasal polyps(CRSsNP)and chronic sinusitis with nasal polyps(CRSwNP).MethodsTen patients with CRSsNP and 20 patients with CRSwNP were selected as the study subjects.The severity of chronic sinusitis was assessed by visual analogue scale(VAS).The difference of expression of IL-13 in nasal mucosa and polyp of CRSsNP and CRSwNP was analyzed by PCR.ResultsThe expression of IL-13 mRNA in CRSwNP group was significantly higher than that in adjacent mucosa and CRSsNP mucosa.There was no significant difference in the expression of IL-13 mRNA between CRSsNP group and CRSwNP group.Conclusion The expression of IL-13mRNA in nasal mucosa or polyps of patients with CRSsNP and CRSwNP is different.Interleukin 13(IL-13)plays an important role in the pathogenesis of chronic sinusitis with nasal polyps．

interleukin 13(IL-13);chronic sinusitis without nasal polyps(CRSsNP);chronic sinusitis with nasal polyps(CRSwNP)

R284.2

A

〔责任编辑 杨德兵〕

1674-0874(2017)01-0047-02

2016-10-06

张萍(1973-),女，山西大同人，主治医师，研究方向：耳鼻咽喉科疾病。∗柴向斌（1968-），男，博士，主任医师，通信作者。